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分子生物學(xué)技術(shù)(1)-在線瀏覽

2025-03-02 07:55本頁(yè)面
  

【正文】 散 , 變成單鏈 , 即為DNA 變性 。 ? DNA是否發(fā)生變性的常用指標(biāo)是 DNA對(duì)260 nm波長(zhǎng)吸光值 ( A260) 變化 。 DNA的復(fù)性 ? 變性DNA在適當(dāng)條件下 , 兩條互補(bǔ)鏈可重新配對(duì) , 恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象 ,這一現(xiàn)象稱為復(fù)性 。 核酸分子雜交 ? DNA復(fù)性時(shí) , 如果將不同種類的 DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中 , 只要兩種單鏈分子之間存在一定程度配對(duì)關(guān)系 , 在適宜的條件下 ( T、 離子強(qiáng)度 ) , 就可以在不同的分子間形成雜化雙鏈 。 ? 核酸研究中的應(yīng)用十分廣泛 。 ? 標(biāo)記物:同位素、生物素或熒光染料 ? 核酸片段:人工合成、克隆的基因組DNA、 cDNA、 RNA ? 探針種類: DNA、 RNA 印跡技術(shù) (Blotting): 將在凝膠中分離的生物大分子轉(zhuǎn)移 (印跡 )在固相化介質(zhì)上并加以檢測(cè)分析的技術(shù) 。 轉(zhuǎn)移完成后 , 加熱使 DNA固定于 NC膜上 , 用于雜交反應(yīng)可進(jìn)行 DNA印漬 。 RNA 印跡技術(shù) : Northern blotting ? 與 DNA blotting( Southern blotting)原理相同 ?
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