【正文】 3. 磷酸化可以使 Rb與細胞內(nèi)蛋白形成復(fù)合物的能力喪失 4. 在 G1期， Rb 為去磷酸化的狀態(tài)，當(dāng)細胞開始進入 S期，磷酸化狀態(tài)急劇 Rb基因的磷酸化 Rb 基因調(diào)控細胞周期的機制 Rb基因異常與腫瘤 ? 基因的異常主要表現(xiàn)為 等位基因缺失和基因突變 ? 在視網(wǎng)膜細胞瘤 ﹑ 小細胞肺癌 ﹑ 非小細胞肺癌 ﹑ 膀胱癌 ﹑ 乳腺癌 ﹑ 軟組織肉瘤 ﹑ 肝癌等腫瘤中發(fā)現(xiàn)有高頻率的等位基因丟失和基因突變 ? 在腫瘤的發(fā)生中， Rb 基因與 p53﹑ Cmyc﹑ Cfos﹑ TGF等還存在相互調(diào)節(jié)的關(guān)系 ? Rb 與其他相關(guān)基因間的調(diào)節(jié)機制尚需進一步闡明 是 tumor suppressor gene 一明珠， Pubmed有超過 3萬篇論文， 1979年， 發(fā)現(xiàn) SV40轉(zhuǎn)化的細胞中與 SV40large T抗原結(jié)合， 而被誤認(rèn)為癌基因，直到 1989年才被證實為抑癌基因 DeLeo AB, Jay G, Appella E, Dubois GC, Law LW, Old LJ. Detection of a transformationrelated antigen in chemically induced saras and other transformed cells of the mouse. Proc Natl Acad Sci U S A. 1979 May。249(4971):9125. p53和腫瘤 p53基因異常與腫瘤 ? p53 基因的缺失或突變已被證實是人類腫瘤中 p53功能喪失的主要原因， 突變形式可表現(xiàn)為點突變﹑ 缺失突變 ﹑ 插入突變 ﹑ 移碼突變 ? 目前已知的突變位點約有 3500種，多集中于第 58外顯子 ? p53基因甲基化狀態(tài)的變化 也是較為常見的基因異常 ? 在胃癌 ﹑ 結(jié)直腸癌 ﹑ 膀胱癌 ﹑ 乳腺癌 ﹑ 頭頸部鱗狀細胞癌 ﹑ 肺癌 ﹑ 前列腺癌 ﹑ 肝癌 ﹑ 軟組織肉瘤 ﹑ 淋巴造血系統(tǒng)腫瘤等都發(fā)現(xiàn)有p53 的點突變 ? 在乳腺癌 ﹑ 肺癌 ﹑ 骨肉瘤 ﹑ 結(jié)腸癌中發(fā)現(xiàn)有 p53的基因缺失異常 p53基因的結(jié)構(gòu) ? p53基因全長 20kb，定位于人類染色體，由 11個外顯子組成 ? 編碼 393個氨基酸組成的 53kD的核內(nèi)磷酸化蛋白 ? 具有蛋白質(zhì) DNA和蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)結(jié)合的功能 p53的細胞生物學(xué)功能 ? 細胞周期中的負調(diào)節(jié)因子，與 細胞周期的調(diào)控﹑ DNA修復(fù) ﹑ 細胞分化 ﹑ 細胞凋亡 等重要的生物學(xué)功能相關(guān) ? p53 在細胞內(nèi)的核心作用是 介導(dǎo) DNA損傷后的細胞應(yīng)激反應(yīng) , 維持細胞的遺傳穩(wěn)定性 ? 對細胞周期的調(diào)節(jié)主要在 G1/S控制點 起作用 , 以決定細胞是否啟動 DNA合成或決定細胞是否進行細胞凋亡 ? p53蛋白具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用 , 其中央核心區(qū)域可與細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，起到活化和調(diào)節(jié)的作用 與 CDK活性相關(guān)的 p21基因 與 DNA損傷導(dǎo)致細胞生長受阻相關(guān)的 GADD45基因 ? 目前已發(fā)現(xiàn) p53激活轉(zhuǎn)錄的基因有 107種 ,抑制轉(zhuǎn)錄活性的基因有 54種 ? 與 p53關(guān)系最密切的基因是 Mdm2和 p21 p53的細胞生物學(xué)功能 p16 基因 ? 屬于 INK4 ( inhibitors of CDK) 基因家族(p16, p15, p18, p19)，為主要成員 ? 1994年由 Kamb等人在觀察黑色素瘤細胞中發(fā)現(xiàn) ? 是一種重要的多腫瘤抑制基因 p16基因的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)特性 ? 基因定位于人類染色體 9p21位，編碼一種 已知的細胞周期素依賴性激酶（ CDK4)的抑制蛋白 ? p16基因產(chǎn)物是 細胞周期的直接抑制因子 ，能通過與cyclinD1 競爭性結(jié)合 CDK4（ 細胞周期依賴蛋白激酶）而特異性抑制其活性，從而調(diào)節(jié) R b 的活性，阻止細胞于 G1期，發(fā)揮抑癌基因的作用 ? p16蛋白在保持 Rb蛋白的非磷酸化狀態(tài)，抑制細胞周期的進行中扮演了重要角色 p16基因異常與腫瘤 ? p16基因的缺失和突變與多種腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)(食管癌、胰腺癌、非小細胞肺癌、頭頸部腫瘤、卵巢癌、腎細胞癌、前列腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等 ) ? 突變方式及頻率在各種腫瘤中極不均一 ,在非小細胞肺癌細胞系中的突變高達 70%，而在小細胞肺癌的細胞系中卻很少突變 ? p16基因啟動子 5’CpG島的異常甲基化也是基因異常的主要機制 (早期肺癌 ) p21基因 ? 屬 于 CIPKIP基因家族（ p21, p27, p57） ? 存在于染色體 ? 編碼 164個氨基酸殘基的蛋白質(zhì) ? 可 抑制多種 CyclinCDK復(fù)合物的活性 ? 參與由 p53 介導(dǎo)的細胞 DNA損傷反應(yīng) ，當(dāng)細胞損傷時 p53作為轉(zhuǎn)錄因子啟動 p21 的表達 ,抑制 cyclin Ecdk2復(fù)合物的活性，使 Rb低磷酸化，細胞不能進入 S期而停滯于 G1期 ? p21與 腫瘤的關(guān)系主要是與其他相關(guān)基因間的協(xié)同作用 ,大多數(shù)腫瘤組織中未發(fā)現(xiàn) p21的突變 PTEN 基因 ? 1997年分離鑒定，定位于人染色體 10q23 ? 為 p53， P16， P27基因后與腫瘤關(guān)系密切的 一個新的抑癌基因 ? 編碼的蛋白具有特異性蛋白磷酸酶和脂磷酸酶活性 ? 在誘導(dǎo)細胞周期阻滯及細胞凋亡，參與胚胎的正常發(fā)育，抑制端粒酶活性，抑制腫瘤的遷移，鋪展和局部粘附中具有重要的作用。 腫瘤相關(guān)病毒的分子生物學(xué) 人類的腫瘤 20%與病毒有關(guān) DNA virus 與動物或人類腫瘤有關(guān)的致瘤性 DNA病毒 ： ? 病毒的核心是由 DNA和蛋白質(zhì)組成的復(fù)合體 ? 乳頭瘤病毒科 (Aapillomaviridae): 人乳頭瘤病毒 (HPV) ? 腺病毒科 (Adenoviridae):所有型別的腺病毒 ? 皰疹病毒科 : EpsteinBarr病毒 (EBV) ? 嗜肝病毒科 (Hepadnaviridae):乙型肝炎病毒類 (HBV) ? 痘病毒科 (Poxviridae):Shope纖維瘤病毒 ? 多瘤病毒科 (Polyomaviridae):猴病毒 40(SV40) 共同特征： retrovirus LTR gag pol env LTR RNA virus RNA RNA病毒致癌的機理 (一 ) ? 致癌基因直接引起腫瘤： 急性轉(zhuǎn)化型反轉(zhuǎn)錄病毒感染病毒細胞后 ,可以 將致癌基因整合到細胞基因組內(nèi) , 可能從病毒致癌基因轉(zhuǎn)錄mRNA， 翻譯癌基因產(chǎn)物（如蛋白激酶），修飾并活化細胞的某些蛋白 ，導(dǎo)致細胞轉(zhuǎn)化 ﹑ 克隆增殖 ﹑ 形成惡性腫瘤 ? Rous肉瘤病毒的癌基因 vsrc ? 特點 : 1. 病毒不僅在感染動物致瘤，而且可以使體外培養(yǎng)的細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化 2. 病毒感染細胞并表達癌基因的時間短，為急性轉(zhuǎn)化 3. 病毒感染細胞后導(dǎo)致轉(zhuǎn)化的頻率較高 4. 產(chǎn)生的腫瘤為多克隆性 . RNA病毒致癌的機理 (二 ) ? 整合作用引起腫瘤： 病毒自身并不帶癌基因，而是通過整合插入細胞基因組中，激活鄰近的細胞原癌基因而導(dǎo)致腫瘤。否 。可作為判斷患者愈后的分子指標(biāo) ? 腫瘤的分子治療： 將正常的抑癌基因?qū)氚┘毎兄亟ㄒ职┗虻墓δ?,將反義基因?qū)肽[瘤細胞中 ,抑制癌基因的表達 Thanks for Your Attention!