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2024-09-11 19:26本頁面
【正文】 微生物篩選，主要成分有牛肉膏3 g、蛋白胨5 g、NaCl 5 g、K2HPO4 5 g、蒸餾水1 000 mL，pH ～；平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基：用于細菌計數(shù)，主要成分為蛋白胨5 g、 g、葡萄糖10 g、瓊脂13 g、蒸餾水1 000 mL，pH ～。L1），將采集的土樣10 g接入到培養(yǎng)液中，設(shè)置3次重復(fù)，置于30 ℃，轉(zhuǎn)速為150 rL1新鮮培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)7 d；以后每隔1周均從上次的培養(yǎng)液中取出10 mL加入到100 mL新鮮培養(yǎng)基中，咪唑乙煙酸的濃度每次增加100 mg .L1，共富集培養(yǎng)6次；然后轉(zhuǎn)入到基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中進行篩選，共進行3次，培養(yǎng)基中咪唑乙煙酸的濃度分別為800、1 000三位數(shù)以上加空格。L1。最后選擇在含咪唑乙煙酸的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板中可以大量生長的菌株作為目標(biāo)菌株進行研究?！∩砩b定 通過接觸酶、葡萄糖氧化發(fā)酵、甲基紅、淀粉水解、硝酸鹽還原、乙醇氧化、明膠液化、反硝化、檸檬酸鹽等來進行鑒定試驗，鑒定至屬[810]。以波長為650 nm處的OD值表示菌體生長量。對于實驗所觀察到的結(jié)果，一定要實事求是地敘述，無論正面或反面、陰性或陽性的結(jié)果，均應(yīng)客觀報道，而不能根據(jù)自己的主觀意愿隨意取舍。 降解咪唑乙煙酸細菌的富集分離與鑒定 咪唑乙煙酸降解菌的分離 按照上述富集篩選降解菌株方法，經(jīng)過40 d的富集培養(yǎng)液培養(yǎng)，并轉(zhuǎn)入基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基繼續(xù)篩選培養(yǎng)20 d，取最后篩選培養(yǎng)液，經(jīng)10倍稀釋法，將1010106的培養(yǎng)液稀釋液分別轉(zhuǎn)至牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上劃線培養(yǎng)，待出現(xiàn)單個菌落后，按照菌落的形狀、直徑、顏色、透明度、邊緣、粘度不同，發(fā)現(xiàn)有5株不同的細菌菌株生長，挑取菌株，編號記為X、Y、Z、W、M，繼續(xù)在牛肉膏蛋白胨含藥培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)上述5株細菌，發(fā)現(xiàn)菌株X、Y、Z在含藥培養(yǎng)基可以大量生長，因此決定對這3株細菌進行研究。表格內(nèi)容可合并的盡量合并。表中數(shù)字須上下對齊，相鄰欄內(nèi)數(shù)字相同時不能用“``”或“同上”、“同左、右”等，應(yīng)一一標(biāo)注。表內(nèi)不設(shè)“備注”欄，需要說明的事項，可用簡煉文字附注于表格底線下方，且附英文。m) Diameter寬(181。表面光滑，邊緣有褶皺，隆起生長，不透明，在培養(yǎng)基上呈乳黃色?！〗到饧毦砩卣鳌 “凑赵囼灧椒ㄟM行部分細菌生理生化試驗，包括芽孢染色、革蘭氏染色、需氧性測定、最適NaCl濃度試驗、接觸酶試驗、淀粉水解試驗、甲基紅試驗（MR）、乙酰甲基醇試驗（VP）、明膠液化試驗、檸檬酸鹽利用試驗、油脂水解試驗、葡萄糖分解代謝形式等試驗，測定結(jié)果見表2。圖２～４略表 2 降解細菌的部分生理生化特性Table 2 Physiological and biochemical characters of degrading bacteria試驗Test菌株StrainsXYZ革蘭氏染色 Gram stain+芽孢 Spore stain ()無無無需氧性 Characters of needing oxygen+++接觸酶 Contact enzyme++淀粉水解 Starch hydrolysis (Fig. 2)++甲基紅（MR） Methyl red++乙酰甲基醇（VP） Acetyl methyl carbinol (Fig. 3)+明膠液化 Liquefy glutin++檸檬酸鹽利用 Use of citrate+++葡萄糖分解代謝形式 Modality of deposing and metabolizing of glucose發(fā)酵氧化氧化熒光色素 Fluorochrome+硝酸鹽還原 Nitrate reductase+++反硝化 Denitrification (Fig. 4)+++乙醇氧化 Alcohol oxidation+注：“+”表示生化反應(yīng)（或革蘭氏染色）為陽性；“” 表示生化反應(yīng)（或革蘭氏染色）為陰性。 “”means negativ
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