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2大腸菌群-在線瀏覽

2024-09-05 04:03本頁面
  

【正文】 最可能數(shù) most probable number, MPN ? 基于泊松分布的一種間接計(jì)數(shù)方法。 1 ℃ 。 ? 恒溫水浴箱: 46 ℃ 177。 ? 天平:感量 g。 ? 振蕩器。 ? 無菌錐形瓶:容量 500 mL。 ? pH 計(jì)或 pH 比色管或精密 pH 試紙。 4 培養(yǎng)基和試劑 ? 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨( Lauryl Sulfate Tryptose,LST)肉湯:見附錄 A 中 。 ? 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂( Violet Red Bile Agar,VRBA):見附錄 A 中 。 ? 無菌生理鹽水:見附錄 A 中 。 ? 無菌 1 mol/L HCl:見附錄 A 中 。 6 操作步驟 ? 樣品的稀釋 ? 固體和半固體樣品:稱取 25 g 樣品 ,放入盛有 225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi) ,8000 r/min~ 10000 r/min 均質(zhì) 1 min~ 2 min,或放入盛有 225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打 1 min~ 2 min,制成 1:10 的樣品勻液。 ? 樣品勻液的 pH 值應(yīng)在 ~ 之間,必要時(shí)分別用1 mol/L NaOH 或 1 mol/L HCl 調(diào)節(jié)。 ? 根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì),按上述操作,依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。從制備樣品勻液至樣品接種完畢,全過程不得超過 15 min。 1 ℃ 培養(yǎng) 24 h177。 2 h產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn),如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至 48 h177。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。 1℃ 培養(yǎng) 48 h177。產(chǎn)氣者,計(jì)為大腸菌群陽性管。 第二法 大腸菌群平板計(jì)數(shù)法 ? 7 檢驗(yàn)程序 ? 大腸菌群平板計(jì)數(shù)法的檢驗(yàn)程序見圖 2。 ? 平板計(jì)數(shù) ? 選取 2個(gè)~ 3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度 , 每個(gè)稀釋度接種 2個(gè)無菌平皿,每皿 1 mL。 ? 及時(shí)將 15 mL~ 20 mL冷至 46 ℃ 的結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂( VRBA)約傾注于每個(gè)平皿中。翻轉(zhuǎn)平 ? 板,置于 36 ℃ 177。 ? 平板菌落數(shù)的選擇 ?
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