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微生物培養(yǎng)技術(shù)-在線瀏覽

2025-01-12 06:26本頁面
  

【正文】 易分離出單個(gè)菌落 ,不能計(jì)數(shù) 。 (2)稀釋涂布平板法的缺點(diǎn) :稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中菌落的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目低。 (3)平板劃線法純化大腸桿菌時(shí)不同階段灼燒接種環(huán)的目的 不同 : ① 第一次操作 :殺死接種環(huán)上原有的微生物。 ③劃線結(jié)束后 :殺死接種環(huán)上殘存的菌種 ,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 (2)方法 :① 證明培養(yǎng)基未被污染 ,用空白培養(yǎng)基作對(duì)照。 【 高考警示 】 (1)為了使結(jié)果接近真實(shí)值 ,應(yīng)設(shè)置三個(gè)或三個(gè)以上的平板 ,計(jì)算出菌落平均數(shù)。 (3)對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)首先要明確設(shè)計(jì)的目的 ,分析出實(shí)驗(yàn)的自變量之后才能準(zhǔn)確設(shè)計(jì)。 新課標(biāo)全國卷 )有些細(xì)菌可分解原油 ,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染 ,某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。 (2)純化菌種時(shí) ,為了得到單菌落 ,常采用的接種方法有兩種 ,即 和 。 (4)通常情況下 ,在微生物培養(yǎng)過程中 ,實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 。 【 解析 】 實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菫榱撕Y選出可以分解原油的高效菌株 ,因此在篩選的時(shí)候選擇培養(yǎng)基的碳源為原油。滅菌的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。青霉素培養(yǎng)基往往是真菌選擇培養(yǎng)基 ,在加青霉素的培養(yǎng)基中 ,細(xì)菌生長被抑制 ,因而不能篩選出能高效降解原油的菌株 (細(xì)菌 )。高壓蒸汽滅菌的設(shè)備 ,通常用于培養(yǎng)基的滅菌?;鹧孀茻?,可以迅速徹底地滅菌 ,適用于微生物的接種工具 ,如接種環(huán)。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤 ,可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌 (已知該除草劑在水中溶解度低 ,含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明 )。 (2)要在長期使用該除草劑的土壤中分離出目的菌 ,從物理性質(zhì)、用途方面來看 ,上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是 。 (4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中 ,無透明圈菌落利用的氮源主要是 ,有透明圈菌落利用的氮源主要是 ,據(jù)此可篩選出目的菌。突變株 A和 B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是 。 (2)從物理性質(zhì)方面來看 ,題圖中的培 養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基 。該除草劑為含氮有機(jī)化合物 ,降解該除草劑的細(xì)菌可以 以除草劑為氮源。 (3)在以該除草 劑為惟一氮源的培養(yǎng)基上 ,不能降解該除草劑的細(xì)菌 (除具有 固氮能力的細(xì)菌外 )是不能生長的。 (5)突變株 A的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)甲 ,突變株 B的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)乙。 答案 : (1)稀釋 (2)在無氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑 (3)培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源 (4)氮?dú)? 該除草劑 (5)突變株 A缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶 突變株 A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲 ,突變株 B可以提供 。 (1)不同微生物的生存環(huán)境不同 ,獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣 ,然后再按一定的方法分離、純化。 (2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件 ,使其群落中的數(shù)量大大增加 ,從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。 (3)接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行 處理。 (4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖 ,請(qǐng)分析接種的具體方法。一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí) ,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片 ,最可能的原因是 ,應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象 ?_________________________ 。 【 解析 】 (1)篩選菌種應(yīng)從適于目的菌種生長、繁殖的環(huán)境中尋找 ,故培養(yǎng)噬鹽菌應(yīng)從高鹽環(huán)境中采集。 (3)微生物的分離及培養(yǎng)中必須保證無菌 ,包括培養(yǎng)基的滅菌和操作過程的滅菌等。 (5)探究溫度對(duì)酶活性的影響時(shí) ,溫度為自變量 ,酶活性為因變量 ,其他變量如底物和酶的用量、 pH、反應(yīng)時(shí)間等均為無關(guān)變量?;蛴媒臃N環(huán)劃下一區(qū)域前接種環(huán)沒有滅菌 每劃一個(gè)新區(qū)域前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌處理 )(原因與操作要對(duì)應(yīng) ) (5)溫度 纖維素的量與濃度、反應(yīng)時(shí)間、 pH 熱點(diǎn) 三 微生物的計(jì)數(shù) 【 典例 3】 下面是探究如何從土壤中分離出自生固氮菌與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn) ,完成下列問題 : 實(shí)驗(yàn)原理 :農(nóng)田的表層土壤中 ,自生固氮菌的含量比較多。在這種情況下 ,只有自生固氮菌才能生長繁殖。 材料用具 :農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有 9 mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛有 90 mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。 ②制備土壤稀釋液 :取土樣 10g加入盛有 90mL無菌水的錐形瓶中 ,充分搖勻。 ③涂布 :按照由 107~ 103稀釋度的順序分別吸取 mL進(jìn)行平板涂布 ,每個(gè)稀釋度下 ,無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布 個(gè)平板 ,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布 個(gè)。 ⑤細(xì)菌的計(jì)數(shù) :當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí) ,選取菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (稀釋度是 105) (2)預(yù)期結(jié)果 :相同稀釋度下 ,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù) (選填“多于”或“少于” )無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。 【 解析 】 (1)在酒精燈火焰旁倒平板 ,可以減少雜菌的污染。 ) 105=5 107。 答案 : (1)① 酒精燈火焰旁 ③ 3 1 ⑤ 30~ 300 5 107 (2)多于 無氮培養(yǎng)基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖 ,而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存 【 互動(dòng)探究 】 (1)據(jù)上題可知 ,在稀釋涂布平板法中 ,為何需涂布三個(gè)平板 ? 提示 :對(duì)照作用、減少實(shí)驗(yàn)誤差等。二是作為重復(fù)實(shí)驗(yàn) ,統(tǒng)計(jì)時(shí)取平均值 ,以減少實(shí)驗(yàn)誤差。培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落也可能是相連的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞 ,而統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)來表示 ,因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)
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