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2024-08-09 06:21本頁面
【正文】 選擇Graph Info Window。質(zhì)量峰的形狀與分辨率在儀器上可被調(diào)整。 裝機(jī)時(shí), 工程師會(huì)最佳化所有的電壓值包括正離子及負(fù)離子(表列于Parameter Settings 中)。 cts), 形狀(shape。 一般的步驟為:1. 設(shè)置Duration為10分鐘或更長2. 關(guān)閉MCA3. 開始采樣，并觀察829 的質(zhì)量峰及其同位素峰。5. 調(diào)整GV 直到獲取最佳的質(zhì)量峰形狀/分辨率/強(qiáng)度。3 V 來調(diào)整, 然后用177。6. 調(diào)整OFS 直到獲取最佳的質(zhì)量峰形狀/分辨率/強(qiáng)度。1 V 來調(diào)整, 然后用177。7. 接著調(diào)整PV 然后再調(diào)整GV 直到獲取最佳的質(zhì)量峰形狀/分辨率/強(qiáng)度。有關(guān)TOF 部分的參數(shù)(BERTAN Module)并不能由軟件控制。質(zhì)量峰的形狀決定于位于質(zhì)量峰50%的寬度與5%的寬度之比值(peak width at 50 % / peak width at 5% peak height)(Tailing Factor。 這些值均可在Graph Info Window 中找到。對(duì)于829 及132 的強(qiáng)度應(yīng)該大于60 counts。在儀器得到好的分辨率, 質(zhì)量峰的形狀及強(qiáng)度后,便可以執(zhí)行質(zhì)量的校正。 單擊以采集約20 個(gè)掃描數(shù)據(jù)。在所打開的質(zhì)譜圖中右擊鼠標(biāo)并點(diǎn)選后以下的視窗便出現(xiàn):在Experimental Mass 中會(huì)自動(dòng)出現(xiàn)所要校正的質(zhì)量數(shù), 在TOF Calibration 視窗中選擇正確的質(zhì)量參考表(Reference Table)后Theoretical Mass 中便會(huì)出現(xiàn)正確的理論質(zhì)量數(shù)。 勾選以將所得的校正數(shù)值設(shè)定為預(yù)設(shè)的校正值。B. MSMS 模式下的校正(Calibrating in MS/MS mode)。 以1 mL 注射針取足量的GluFibrinopeptide 標(biāo)準(zhǔn)品并將之放置于注射針泵上。 在Products of 的視窗中鍵入母離子的質(zhì)量數(shù)785 并設(shè)定TOF 掃描范圍為65~1500 amu (記得在Advanced MS 視窗下用鼠標(biāo)點(diǎn)一下Suggest 以重設(shè)四極桿傳輸率)。 在Resolution 下,將Q1 resolution 改為Low resolution 以打開Q1四極桿的傳輸率。 最后, 在Compound 下的碰撞能量(Collision energy。 設(shè)定CE = 21,掃描次數(shù)為100, 單擊Start 以開始掃描。 此時(shí)增加CE, 碎片的程度增加, m/z 時(shí)的CE 即為最佳的值(CE ~ 3540)。 。 取得圖譜后再做一次質(zhì)量校正。C. 為新的校正標(biāo)準(zhǔn)建立一個(gè)質(zhì)量參考文件(Reference File for New Calibration Standard)如果[Glu1]Fibrinopeptide B 被經(jīng)常用來作為校正標(biāo)準(zhǔn)品, 質(zhì)量參考表的建立會(huì)更方便。 單擊然后關(guān)閉視窗即可。 每天的校正動(dòng)作可提供一般30ppm 以下的準(zhǔn)確度(在室溫沒有明顯的改變前提下)。注意每次掃描特定離子強(qiáng)度不要超過飽和的1000 counts 同時(shí)也不要超過總和200 000 counts。如果需要更好的校正準(zhǔn)確度, 外標(biāo)校正(External Calibration)在分析樣品前應(yīng)該立刻被使用(這可提供5~10ppm 的準(zhǔn)確度) 相對(duì)來說, 內(nèi)部校正(Internal Calibration)能夠提供更高的質(zhì)量準(zhǔn)確度(5 ppm)。 附錄A. ALILTLVS_CsI TOF 校正材料: 碘化銫CsI (Sigma cat C8643: 25 g)合成肽 – cPDI inhibitor (Sigma Cat A1061, 1 mg) 甲醇 (色譜純)甲酸 (色譜純)1. CsI 儲(chǔ)備液 (3 x 102 M)2. 稀釋溶劑: 水 ：甲醇：甲酸 = : : 13. TOF校正儲(chǔ)備液(6 x 105 M CsI 及 3 x 105 M 肽)將 1 mg 的肽溶于 40 mL 的稀釋溶劑中 加入 80 uL CsI 儲(chǔ)備液。B. [Glu1]Fibrinopeptide BSIGMA(cat. F3261). 溶于 30% 甲醇/水 + 1%甲酸, 濃度大約在5 pmol/uL 左右. 若使用Nanospray做校正，則濃度需再稀釋至約1 pmol/uL 左右。Q2 增強(qiáng)模式 在子離子掃描模式下的 Q2 增強(qiáng) (Q2 Enhancing).在 Qstar Pulsar 以上等級(jí)的機(jī)器均可使用 Enhancing (或 Q2 pulsing)的功能. 當(dāng) Q2 pulsing 功能被打開, 對(duì)特定選定的小質(zhì)量范圍離子的duty cycle (或transmission efficiency)會(huì)被增強(qiáng). 這個(gè)增強(qiáng)功能通常只用在窄小的質(zhì)量范圍, 或是增強(qiáng)的范圍可設(shè)定涵蓋整個(gè)掃描范圍以增加整個(gè)范圍的靈敏度.第一個(gè)例子, 勾選 En
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