【正文】 pH計(jì)。(4) 分光光度計(jì)。(6) 比色管：50mL。(8) 移液管：1mL、2mL、5mL。三、實(shí)驗(yàn)步驟（一）氨氮的測定——納氏試劑比色法1. 原理氨與納氏試劑反應(yīng)可生成黃色的絡(luò)合物，其色度與氨的含量成正比，可在425nm波長下比色測定。2. 試劑(1) 不含氨的蒸餾水：水樣稀釋及試劑配制均用無氨蒸餾水。(2) 磷酸鹽緩沖溶液（）： ，溶于水中并稀釋至1L。(3) 吸收液：2%。② ：，用水稀釋至1L。冷卻后加入氫氧化鉀溶液（15g氫氧化鉀溶于30mL水中），充分冷卻，加水稀釋至100mL。(5) 酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g 酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6(6) 氨標(biāo)準(zhǔn)溶液： g無水氯化銨（NH4Cl）（預(yù)先在100℃干燥至衡重），溶于水中，轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中，稀釋至刻度。3. 步驟較清潔水樣可直接測定，如水樣受污染一般按下列步驟進(jìn)行。然后將此蒸餾瓶中的蒸餾液傾出（但仍留下玻璃珠），量取水樣200mL，放入此蒸餾瓶中（如預(yù)先試驗(yàn)水樣含氨量較大，則取適量的水樣，用無氨水稀釋至200mL，然后加入10mL磷酸鹽緩沖液）。(2) 測定：如為較清潔的水樣，直接取50mL澄清水樣置于50mL比色管中。若氨氮含量太高可酌情取適量水樣用無氨水稀釋至50mL。在上述各比色管中，搖勻，搖勻放置10min，用1cm比色管，在波長425nm處，以試劑空白為參比測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得水樣中氨氮的含量（μg/mL）。2. 試劑(1) 不含亞硝酸鹽的蒸餾水：蒸餾水中加入少量高錳酸鉀晶體，使呈紅色，再加氫氧化鋇（或氫氧化鈣），使呈堿性，重蒸餾。（ MnSO4(2) 亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液： 亞硝酸鈉溶于水中，加入1mL氯仿，稀釋至1000mL 。標(biāo)定方法： ，（加亞硝酸鈉貯備液時(shí)需將吸管插入高錳酸鉀溶液液面以下）混合均勻，置于水浴中加熱至70～80℃， mol/L草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，使高錳酸鉀溶液褪色并過量，記錄草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液用量（V2）；再高錳酸鉀溶液滴定過量的草酸鈉到溶液呈微紅色，記錄高錳酸鉀溶液用量（V1）。(3) 亞硝酸鹽使用液：。(5) 高錳酸鉀溶液（1/5KMnO4，）： g ，使體積減小至1000mL左右，放置過夜，用G3號(hào)熔結(jié)玻璃漏斗過濾后，濾液貯于棕色試劑瓶中，用上述草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定其準(zhǔn)確濃度。12H2O]或硫酸鋁銨[NH4Al (SO4)2澄清后，把上層清液盡量全部傾出，只留濃的懸浮物，最后加100mL水。(7) 鹽酸萘乙二胺顯色劑：50mL冰醋酸與900mL水混合，加熱使其全部溶解，攪拌溶解后用水稀釋至1L。3. 步驟(1) 水樣如有顏色和懸浮物，可在每100mL水樣中加入2mL 氫氧化鋁懸浮液，攪拌后，靜置過濾，棄去25mL初濾液。(3) 取7支50mL比色管，分別加入含亞硝酸鹽氮1μg/、用水稀釋至刻度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得水樣中亞硝酸鹽氮的含量（μg/mL）。少量的氯化物即能引起硝酸鹽的損失，使結(jié)果偏低。 μg/mL時(shí)，將使結(jié)果偏高，可用高錳酸鉀將亞硝酸鹽氧化成硝酸鹽，再從測定結(jié)果中減去亞硝酸鹽的含量。(2) 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：（經(jīng)105℃烘4 h），溶于水中，轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。如加入2mL氯仿保存，溶液可穩(wěn)定半年以上。(4) 硫酸銀溶液：，溶于水中，稀釋至1L，于棕色瓶中避光保存。(5) 高錳酸鉀溶液（1/5KMnO4， mol/L）：，溶于蒸餾水中，并稀釋至1L。(7) 碳酸鈉溶液（1/2Na2CO3，）：，溶于1L水中。3. 步驟(1) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：、用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。(2) 樣品的測定脫色：污染嚴(yán)重或色澤較深的水樣（即色度超過10度），可在100mL水樣中加入2mL Al(OH)3懸浮液。除去氯離子：先用硝酸銀滴定水樣中的氯離子含量，據(jù)此加入相當(dāng)量的硫酸銀溶液。 mg硫酸銀作用。再通過離心或過濾除去氯化銀沉淀，濾液轉(zhuǎn)移至100mL的容量瓶中定容至刻度；也可在80℃水浴中加熱水樣，搖動(dòng)三角燒瓶，使氯化銀沉淀凝聚，冷卻后用多層慢速濾紙過濾至100mL容量瓶，定容至刻度。具體方法如下：在已除氯離子的100mL容量瓶中加入1mL ，至淡紅色出現(xiàn)并保持15min不褪為止，以使亞硝酸鹽完全轉(zhuǎn)變?yōu)橄跛猁}，最后從測定結(jié)果中減去亞硝酸鹽含量。取下蒸發(fā)皿，用玻棒研磨，使試劑與蒸發(fā)皿內(nèi)殘?jiān)浞纸佑|，靜止10min，加入少量蒸餾水，攪勻，濾入50mL比色管中，加入3毫升濃氨水（使溶液明顯呈堿性）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出水樣中硝酸鹽氮的含量(μg/mL)。五、思考題1. 如何通過測定三氮的含量來評價(jià)水體的“自凈”程度？如水體中僅含有NO3N，而NH4+和NO2未檢出，說明水體“自凈”作用進(jìn)行到什么階段？如水體中既有大量NH3N，又有大量NO3N，水體污染和“自凈”狀況又如何？2. 用納氏比色法測定氨氮時(shí)主要有哪些干擾，如何消除？3. 在三氮測定時(shí)，要求蒸餾水不含NHNONO3，如何檢驗(yàn)？4. 在蒸餾比色測定氨氮時(shí)，？pH偏高或偏低對測定結(jié)果有何影響？5. 在亞硝酸鹽氮分析過程中，水中的強(qiáng)氧化性物質(zhì)會(huì)干擾測定，如何確定并消除？實(shí)驗(yàn)四 生物化學(xué)需氧量的測定BOD5一、 目的和要求1. 了解BOD測定的意義及稀釋法測BOD的基本原理。二、 原理生物化學(xué)需氧量是指在好氧條件下，微生物分解有機(jī)物質(zhì)的生物化學(xué)過程中所需的溶解氧量。一般來說，在第5天消耗的氧量大約是總需氧量的70%，為便于測定，目前國內(nèi)外普遍采用20℃培養(yǎng)5d所需氧作為指標(biāo)，以氧的mg/L表示，簡稱BOD5。對易降解的有機(jī)物，如碳水化合物、脂肪酸、油脂等，一般微生物均能將其降解，如硝基或硫酸取代芳烴等，則必須進(jìn)行生物菌種馴化。為此，實(shí)驗(yàn)用的稀釋水要充分曝氣以達(dá)到氧的飽和或接近飽和。3. 有微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)。稀釋法測定BOD是將水樣經(jīng)過適當(dāng)稀釋后，使其中含有足夠的溶解氧供微生物5d生化需氧的要求，將此水樣分成兩份。水中有機(jī)污染物的含量越高，水中溶解氧消耗愈多，BOD值也愈高，水質(zhì)愈差。三、 儀器與試劑1. 恒溫培養(yǎng)箱[（20+1）℃]。3. 抽氣泵（或無油壓縮泵）。在玻璃下端安裝一個(gè)2mm厚，大小和量筒相匹配的有孔橡皮片。6. 氯化鈣溶液。7. 三氯化鐵溶液。6H2O），溶于水中，稀釋至1L。（MgSO49. 磷酸鹽溶液。7H2O）（NH4CL），溶于水中，稀釋至1L。分別稱取150mg葡萄糖和谷氨酸（均于130℃烘過1h），溶于水中，稀釋至1L。12. 1mol氫氧化鈉溶液。在20L玻璃瓶內(nèi)加入18L水，用抽氣或無油壓縮機(jī)通入清潔空氣2~8h，使水中溶解氧飽和或接近飽和（20℃時(shí)溶解氧大于8mg/L）。14. 接種稀釋水。對某些特殊工業(yè)廢水最好加入專門培養(yǎng)馴化過的菌種。與碘量法測定溶解氧實(shí)驗(yàn)相同的硫酸錳溶液、碘性碘化鉀溶液、濃硫酸、%的淀粉溶液（詳見實(shí)驗(yàn)3“水中溶解氧的測定”）。采樣后，需在2h內(nèi)測定；否則，應(yīng)在4℃或4℃以下保存，且應(yīng)在采集后10h內(nèi)測定。（3） ，加亞硫酸鈉或硫代硫酸鈉除區(qū)[見注意事項(xiàng)1]。 水樣的稀釋根據(jù)確定的稀釋倍數(shù)，用虹吸法把一定量的污水引入1L量筒中，再沿壁慢慢加入所需稀釋水（接種稀釋水），用特制攪拌棒在水面以下慢慢攪勻（不應(yīng)產(chǎn)生氣泡），然后沿瓶壁慢慢傾入兩個(gè)預(yù)先編號(hào)、體積相同的(250mL)的碘量瓶中，直到充滿后溢出少許為止。用同樣方法配置另兩份稀釋比水樣。 培養(yǎng)將各稀釋比的水樣，稀釋水（接種稀釋水）空白各取一瓶放入（20+1）C的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5d，培養(yǎng)過程中需每天添加封口水。（1） 用碘量法測定未經(jīng)培養(yǎng)的各份稀釋比的水樣和空白水樣中的剩余溶解氧。五、 數(shù)據(jù)處理 根據(jù)公式計(jì)算BOD5，并以表格形式表示測定數(shù)據(jù)和結(jié)果。六、注意事項(xiàng)1. 為除去水樣中游離氯而加入亞硫酸鈉的量可用實(shí)驗(yàn)方法得到。2. 稀釋比應(yīng)根據(jù)水中有機(jī)物的含量來確定。（2） 污染嚴(yán)重的水樣，稀釋100~1000倍。（4） 受污染的河水，稀釋0~4倍。原則上，是以培養(yǎng)后減少的溶解氧占培養(yǎng)前溶解氧的40%~70%為宜。4. 所用試劑和稀釋水如發(fā)現(xiàn)渾濁有細(xì)菌生長時(shí)，應(yīng)棄去重新配制，或用葡萄糖—谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液校核。37）mg/L范圍，則說明試劑或稀釋水有問題或操作技術(shù)有問題。2. 掌握碘量法測定溶解氧的操作技術(shù)。 碘量法測定溶解氧的原理為：氫氧化亞錳性溶液中，被水中溶解氧氧化成四價(jià)錳的水合物H4MnO4，但在酸性溶液中四價(jià)錳又能氧化KI而析出I2。 根據(jù)硫化酸鈉的用量，一計(jì)算出水中溶解氧的含量。2. 硫酸錳溶液。3. 堿性碘化鉀溶液。4. 濃硫酸。6. 1%淀粉溶液。冷卻后加入0。4氯化鋅防腐。~110。8. 。5H2O,溶于經(jīng)煮沸冷卻的水中，稀釋至1000mL，儲(chǔ)于棕色試劑瓶內(nèi)。平行做3份。四、實(shí)驗(yàn)步驟1. 將洗凈的250mL碘量瓶用待測水樣蕩洗3次。平行做3份水樣。蓋上瓶塞，注意瓶內(nèi)不能留有氣泡，然后將碘量瓶反復(fù)搖動(dòng)數(shù)次，靜置，當(dāng)沉淀物下降至瓶高一半時(shí)，再顛倒搖動(dòng)一次。小心蓋好瓶塞顛倒搖勻。若溶解不完全，可再加入少量濃硫酸至溶液澄清且呈黃色或棕色（因析出游離碘）。3. ，分別置于2個(gè)250mL碘量瓶中，用硫代硫酸鉀溶液滴定。五、數(shù)據(jù)處理 溶解氧濃度（mg/L）＝式中：c1——硫代硫酸納溶液的物質(zhì)的量濃度； V1——消耗的硫代硫酸鈉溶液的體積。2. ，應(yīng)加入硫化硫酸鈉除去，方法如下：250mL的碘量瓶裝滿水樣，加入5mL 3mol/L硫酸和1g碘化鉀，搖勻，此時(shí)應(yīng)有碘析出，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淺黃色，加入1% ，再滴定至藍(lán)色剛好消失。3. 水樣采集后，應(yīng)加入流酸錳和堿性碘化鉀溶液以固定溶解氧，當(dāng)水樣含有藻類、懸浮物、氧化還原性物質(zhì)，必須進(jìn)行預(yù)處理。2. 掌握重鉻酸鉀法測定COD的原理和方法。用硫酸亞鐵銨溶液回滴，根據(jù)用量算出水樣中還原性物質(zhì)消耗氧的量。氯離子含量高于2000mg/L的樣品應(yīng)先做定量稀釋，使含量降低至2000mg/L以下，在進(jìn)行測定。三、 儀器與試劑1. 回流裝置。2. 加熱裝置。3. 50mL酸式滴定管。稱取預(yù)先在120℃，移入1000mL容量瓶，稀釋至標(biāo)線，搖勻。（C12H8N27H2O）溶于水中，稀釋至100mL，儲(chǔ)于棕色瓶內(nèi)。6H2O~] 。臨用前，用重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定。冷卻后，加入3滴亞鐵靈指示液（），用硫酸亞鐵銨溶液滴定，溶液的顏色有黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色即為終點(diǎn)。7. 硫酸硫酸銀溶液。放置1~2d，不時(shí)搖動(dòng)使其溶解（如無2500mL容器，可在500mL濃硫酸中加入5g硫酸銀）。結(jié)晶或粉末。輕輕搖動(dòng)錐型瓶使溶液混勻，加熱回流2h（自開始沸騰時(shí)計(jì)時(shí)）。如溶液顯綠色，在適當(dāng)減少廢水取樣量，直至溶液不變路色為止。稀釋時(shí)，所取廢水樣量不得少于5mL，如果化學(xué)需氧量很高，則廢水應(yīng)多次稀釋。以下操作同實(shí)驗(yàn)步驟。溶液總體積不得少于140mL，否則因酸度太大，滴定終點(diǎn)不明顯。4. 測定水樣的同時(shí)，按同樣操作步驟做空白實(shí)驗(yàn)。五、數(shù)據(jù)處理CODcr濃度（以O(shè)2計(jì)）（mg/L）=（V0V1） c81000/V式中c硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L； V0滴定空白時(shí)硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量，Ml； V1滴定水樣時(shí)硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量，mL； V水樣的體積，mL； 8氧（1/2 O）摩爾質(zhì)量，g/mol。若氯離子濃度較低，也可少加硫酸汞，使保持硫酸汞：氯離子=10：1（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。2. ~，但試劑用量及濃度需按表151進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整，也可得到滿意的結(jié)果。4. 水樣加熱回流后，溶液中重鉻鉀剩余量應(yīng)為加入量的1/5~4/5為宜。6. CODcr的測定結(jié)果應(yīng)保留三位有效數(shù)字。表 151 水樣取用量和試劑用量表水樣體積/mLK2Cr2O7溶液/mLH2SO4Ag2SO4/mLHgSO4/gFeSO4(NH3)2SO4/(mol/L)滴定前總體積15703014.452106028075350七、思考題（1） 為什么需要做空白實(shí)驗(yàn)？（2） 化學(xué)需氧量的測定時(shí)，有哪些影響因素？實(shí)驗(yàn)六 水中鉻的測定一、 目的和要求1. 掌握用分光光度法測定六價(jià)鉻和總鉻的原理和方法；熟練應(yīng)用分光光度計(jì)。二、 原理在酸性溶液中，六價(jià)鉻離子與二苯碳酰二肼反應(yīng)，生成紫紅色化合物，其最大吸收波長為540nm，吸光度與濃度符合比爾定律。三、 六價(jià)鉻的測定（1） 分光光度計(jì)，比色皿（1cm、3cm）。2. 試劑（1） 丙酮。（3） （1＋1）磷酸。（5） 氫氧化鋅共沉淀劑：稱取硫酸鋅（ZnSO4將以上兩液混合。（7） 鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液：稱取于120干燥2h的重鉻酸鉀（優(yōu)級純），用水溶解，移入1000mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖均。使用當(dāng)天配制。（10） 2％（m/V）亞硝酸鈉溶液。顏色變深后不能再用。（2） 如果水樣有色但不深，可進(jìn)行色度校正。（3） 對渾濁、色度較深的水樣，應(yīng)加入氫氧化鋅共沉淀劑并進(jìn)行過濾處（4） 水樣中存在次氯酸鹽等氧化性物質(zhì)時(shí)，干擾測定，可加入尿素和亞硝酸鈉消除。 ：取9支50mL比色管，依次加入0、用水稀釋至標(biāo)線，加入1＋＋，搖均。5－10min后，于540nm波長處，用1cm或3cm比色皿，以水為參比，測定習(xí)吸光度并作空白校正。 ：取適量（含Cr