【正文】 遺傳信息由 DNA傳遞給 RNA。 （ 1）、轉(zhuǎn)錄的不對稱性 能夠轉(zhuǎn)錄 RNA的那條 DNA鏈稱為 模板鏈 (template strand) ，也稱作 反義鏈 。 模板鏈 編碼鏈 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 5? 3? 3? 5? 模板鏈 編碼鏈 編碼鏈 模板鏈 轉(zhuǎn)錄方向 轉(zhuǎn)錄方向 模板鏈和編碼鏈的相對性 5′3′ 3′5′ 編碼鏈 模板鏈 mRNA 5′3′ 轉(zhuǎn)錄 NAla His （ 2）、轉(zhuǎn)錄的連續(xù)性 RNA轉(zhuǎn)錄合成時，只能向一個方向進(jìn)行聚合，所依賴的模板 DNA鏈的方向為 339。而 RNA鏈的合成方向為 539。 （ 3）、轉(zhuǎn)錄的單向性 RNA轉(zhuǎn)錄合成時，只能以 DNA分子中的某一段作為模板，故存在特定的起始位點(diǎn)和特定的終止位點(diǎn)。 （ 4）、有特定的起始和終止位點(diǎn) 3，轉(zhuǎn)錄發(fā)生過程 （ 1） 參與轉(zhuǎn)錄合成的酶和蛋白因子 Enzymes and Protein Factors for RNA Biosynthesis ?原料： NTP （ ATP, UTP, GTP, CTP）。 ?酶： RNA聚合酶（ RNApol）。 參與 RNA轉(zhuǎn)錄 合成 的物質(zhì) 這是一種不同于 引物酶 的 依賴 DNA的 RNA聚合酶（ DNA dependent RNA polymerase， DDRP） 。 RNA聚合酶（ DDRP） 原核生物中的 RNA聚合酶全酶由五個亞基構(gòu)成，即 ?2??39。 ?亞基 與 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的識別 有關(guān)，在轉(zhuǎn)錄合成開始后被釋放；余下的部分（ ?2??39。 原核生物的 RNA聚合酶 核心酶 (core enzyme) 全酶 (holoenzyme) ?? ? ? ? ? ?? ? ? ? 原核生物 RNA聚合酶的核心酶和全酶 ? 36512 決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄? 1506 18 催化功能?? 1556 13 結(jié)合 D NA 模板? 70263 辨認(rèn)起始點(diǎn)亞 基 分 子 量 功 能原核生物 RNA聚合酶亞基的功能 單因子 RNA 聚合酶 T3,T7， sp6噬菌體 RNA 聚合酶 200多個氨基酸組成的多肽 特異性多噬菌體上幾個啟動子進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。 RNA 聚合酶 +T7/T3/T6啟動子 + DNA 雙聯(lián)模板 +終止子 + NTP+Mg2+ H2O 真核生物中的 RNA聚合酶可按其對 ?鵝膏蕈堿 的敏感性而分為三種，它們均由 10~12個大小不同的亞基所組成，結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，其功能也不同。 凡是與基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)的蛋白因子統(tǒng)稱為反式作用因子（ transacting factor） 。 不同的 RNA聚合酶存在相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子，如與RNA聚合酶 Ⅱ 相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子包括 TFⅡ A，TFⅡ B， TFⅡ D， TFⅡ E， TFⅡ F， TFⅡ H等。 有的終止信號的作用可被特異的因子所阻止，使RNA聚合酶得以越過終止子繼續(xù)轉(zhuǎn)錄，這稱為通讀(readthrough)，這類引起抗終止作用的蛋白質(zhì)稱為抗終止因子 (antitermination)。 ??蛋白能識別轉(zhuǎn)錄終止信號，并與 RNA緊密結(jié)合，導(dǎo)致 RNA的釋放。 2. DNA雙鏈解開，使其中的一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板。 1. 模板與酶的辨認(rèn)識別： 5?3? 3?5? 結(jié)構(gòu)基因 調(diào)控序列 RNApol DNA分子中參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控的序列統(tǒng)稱為 順式作用元件（ cisacting element） 。 位于基因上游，與 RNA聚合酶識別、結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄有關(guān)的一些 DNA調(diào)控序列被稱為 啟動子（ promoter） 。 利用 足跡法 (footprint)和 DNA測序法可以確定啟動子的序列結(jié)構(gòu)。在用酶移出與蛋白質(zhì)結(jié)合的 DNA后，又可測出被結(jié)合處 DNA的序列。 RNA聚合酶與該區(qū)結(jié)合后，即滑動至 10區(qū) 的TATAAT序列 （ Pribnow盒），并啟動轉(zhuǎn)錄。 ⑴ RNA聚合酶全酶 (?2????)與模板（啟動子區(qū)）結(jié)合。產(chǎn)生第一個核苷酸 (+1) RNApol (?2????) DNA pppGpN OH 3? 轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物 : 5?pppG OH + NTP ? 5?pppGpN OH 3? + ppi 2. 轉(zhuǎn)錄的起始過程： Transcription Initiation Complex:RNA polymerase makes many small,abortive transcripts without ever leaving the abortive transcripts up to 910 nt in size 流產(chǎn)轉(zhuǎn)錄 通過啟動子（起始）快：強(qiáng)啟動子 慢： 弱啟動子 轉(zhuǎn)錄起始可被抑制 利福平 rifamycin ：抑制 β亞基 利迪鏈霉素 strepolydigin抑制 β亞基 注意 鏈霉素 strepomycin結(jié)合了細(xì)菌核糖體 30S 小亞基 放線菌素 D actinomycin 抑制真核聚合酶 I，與DNA 結(jié)合，阻止延伸 （凋亡） α鵝膏蕈堿 α— amanitin ：具有雙環(huán)結(jié)構(gòu)的八肽毒素，真核聚合酶 II 結(jié)合，抑制催化合成mRNA ，（致死） ?因子從全酶上脫離，余下的核心酶繼續(xù)沿DNA鏈移動，按照堿基互補(bǔ)原則，不斷聚合RNA。 （二）轉(zhuǎn)錄延長 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 轉(zhuǎn)錄空泡 (transcription bubble)的形成 原核生物轉(zhuǎn)錄過程中的羽毛狀現(xiàn)象 RNA轉(zhuǎn)錄合成的終止機(jī)制有兩種： 1，內(nèi)在因子，非 Rho因終止子：轉(zhuǎn)錄的終止的特殊信號（一段RNA 序列） 2． 依賴 Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止： ? 由終止因子（ ?因子）識