【正文】 膽閉驟羥闈詔寢賻減棲綜訴鮐巹。使用原形（原液）對皮膚、黏膜進行消毒的消毒劑，則采用消毒劑原形（原液）作為試驗受試物，不需對消毒劑原形再進行濃縮。（）在皮膚變態(tài)反應試驗時，采用的誘導濃度應為引起皮膚刺激反應的最低濃度或原液，激發(fā)濃度應為不引起皮膚刺激反應的最高濃度或原液。實驗室對所進行的試驗，應認真觀察試驗結(jié)果，按實驗室資格認定和或?qū)嶒炇艺J可的要求作好原始記錄。表格中每一欄目應用藍黑或碳素墨水逐項填寫。原始記錄數(shù)據(jù)和計算應及時校核，整理裝訂附于檢驗報告后，入檔保存?zhèn)洳?。檢測報告必須逐項報告清楚，凡檢驗方法在本規(guī)范和有關(guān)標準中未列出者，必須詳細描述。試驗組應列出其殺滅對數(shù)值，殺滅效果合格時，殺滅對數(shù)值無須列出具體數(shù)值，用大于等于某一規(guī)定值表示；當殺滅對數(shù)值小于某一規(guī)定值時，則應列出具體殺滅對數(shù)值。檢驗報告的結(jié)論部分，應根據(jù)試驗結(jié)果得出明確的結(jié)論。塤礙籟饈決穩(wěn)賽釙冊庫麩適緄撾鲅傯。 符合下列條件的消毒產(chǎn)品認為理化檢驗合格：（）消毒劑有效成分符合我國允許的消毒劑組分，不含有抗生素、激素等各種處方藥成分和衛(wèi)生部規(guī)定的禁用物質(zhì)。（）用于皮膚黏膜消毒的消毒劑限量成分符合要求；用于飲用水、食品和餐飲具消毒的消毒劑其有毒有害成分在使用濃度下符合有關(guān)標準的限量要求；消毒器械產(chǎn)生的有毒有害物質(zhì)符合有關(guān)標準和規(guī)范的限量要求。（）消毒劑的成分與申報的配方一致。（）最小樣品單位間的重量誤差小于，主要有效成分含量誤差小于。綻萬璉轆娛閬蟶鬮綰瀧恒蟬轅紗魚臚。 符合下列所有相應條件的消毒產(chǎn)品認為消毒效果試驗結(jié)果合格：（）去除殘留消毒劑效果的鑒定試驗合格。對照組微生物數(shù)在規(guī)定的范圍內(nèi)。.載體定量試驗和載體流動浸泡試驗時，每次試驗對各類微生物的殺滅對數(shù)值或滅活對數(shù)值≥，對照組微生物數(shù)在規(guī)定的范圍內(nèi)。瑣釙濺曖惲錕縞馭篩涼貿(mào)錒戧晉魘繅。滅菌模擬現(xiàn)場試驗時，各次試驗所有載體相應細菌芽孢均無生長，對照組微生物數(shù)在規(guī)定的范圍內(nèi)。（）現(xiàn)場試驗時，對消毒對象上自然菌的平均殺滅對數(shù)值≥。 消毒產(chǎn)品檢驗技術(shù)規(guī)范 櫛緶歐鋤棗鈕種鵑瑤錟奧傴輥刪髖綠。 菌懸液與菌片的制備 適用范圍制備消毒劑殺菌試驗用菌懸液與菌片，以供消毒劑殺菌試驗時使用。 轡燁棟剛殮攬瑤麗鬮應頁諳絞綽髏鱉。在上述規(guī)定的菌株基礎(chǔ)上，根據(jù)消毒劑特定用途或試驗特殊需要，還可增選其他菌株峴揚斕滾澗輻灄興渙藺詐機憒頇驤經(jīng)。取含 ～營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，置 ℃培養(yǎng)～?；驈闹腥〕鲆涣＞榻臃N于平皿上，置 ℃培養(yǎng)～，挑取上述第代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，置 ℃培養(yǎng)～，即為第代培養(yǎng)物。）取第～代的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)～的新鮮斜面培養(yǎng)物，用吸管吸取～稀釋液（一般用，酸化水用生理鹽水）加入斜面試管內(nèi)，反復吹吸，洗下菌苔。則鯤愜韋瘓賈暉園棟瀧華縉輅贊驏紆。）細菌繁殖體懸液應保存在℃冰箱內(nèi)備用。）懷疑有污染時，應以菌落形態(tài)、革蘭染色與生化試驗等法進行鑒定。取含～營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，置℃培養(yǎng) ～。挑取上述第 代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，置℃培養(yǎng) ～，即為第 代培養(yǎng)物。）用 吸管吸取～ 第～代的～ 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物，接種于羅氏瓶中營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基表面，將其搖動使菌液布滿營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的表面，再將多余肉湯培養(yǎng)物吸出，將羅氏瓶置℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) ～。）用接種環(huán)取菌苔少許涂于玻片上，固定后以改良芽孢染色法染色，并在顯微鏡（油鏡）下進行鏡檢。否則，應繼續(xù)在室溫下放置一定時間，直至達到上述芽孢形成率后再進行以下處理。改良芽孢染色法：①用接種環(huán)取菌苔涂布于玻片上，待自然干燥，而后通過火焰加熱將菌固定于玻片上。將平皿蓋好，放℃～℃ 條件下，加熱 。③加 沙黃水溶液，染。芽孢呈綠色，菌體呈紅色。）加無菌蒸餾水于羅氏瓶中，以棒輕輕推刮下菌苔，吸出，再加入無菌蒸餾水沖洗培養(yǎng)基表面，吸出。溈氣嘮戇萇鑿鑿櫧諤應釵藹紼較騮額。）用無菌棉花或紗布過濾芽孢懸液，清除瓊脂凝塊。棄上清液，加蒸餾水吹吸使芽孢重新懸浮，本步驟重復遍。）將洗凈的芽孢懸液放入含適量小玻璃珠的三角燒瓶內(nèi)，℃水浴（或℃），以殺滅殘余的細菌繁殖體。有效使用期為半年。）芽孢懸液在使用時，應先進行活菌培養(yǎng)計數(shù)。 菌片（染菌載體）的制備程序（）菌片用載體應根據(jù)消毒對象選擇，常用的材料有金屬、玻璃、濾紙、棉布、聚四氟乙烯等。謾飽兗爭詣繚鮐癩別瀘鯽礎(chǔ)輪駭騷獅。脫脂方法如下：①將載體放在含洗滌劑的水中煮沸 ；②以自來水洗凈；③用蒸餾水煮沸 ；④用蒸餾水漂洗至 呈中性；⑤晾干、熨平備用。（）布片用織紗的白平紋棉布制作。金屬片以不銹鋼制作，紙片以新華濾紙制作。（）載體經(jīng)壓力蒸汽滅菌后，使用滴染法染菌。然后加入等量或的牛血清白蛋白，使菌液的濃度為～。滴染法染菌時，將經(jīng)滅菌的載體片平鋪于無菌平皿內(nèi)，用移液器逐片滴加菌液μ，必要時用接種環(huán)涂勻整個載體表面。納疇鰻吶鄖禎銣膩鰲錟顫階躦萵騍潤。 注意事項（）用濁度計測定的菌懸液濃度，只用于在滴染菌片時對菌懸液稀釋度的估計。風攆鮪貓鐵頻鈣薊糾廟誑繃紙鯉騏鍔。（）細菌繁殖體在載體上干燥的過程中，可引起部分死亡。（）配制菌懸液和制備菌片時，應嚴格無菌操作，以防污染雜菌，影響殺菌試驗的結(jié)果。（）菌懸液和菌片應隨時放入冰箱內(nèi)，盡量縮短室溫放置時間，以減少細菌的自然死亡。 實驗器材（）稀釋液見附錄（）細菌培養(yǎng)基胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（），胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（）等，見附錄（）刻度吸管（、）（）移液器（μ、μ、μ、μ、）及配套的塑料吸頭（）電動混勻器（）濁度計（）恒溫培養(yǎng)箱 操作程序活菌培養(yǎng)計數(shù)一般使用傾注法，有特殊規(guī)定者，可以使用其他方法。對菌片和小型固體樣本，將其直接投入含 稀釋液的無菌試管中，對棉拭則將其采樣端剪入管內(nèi)。以上操作應嚴格按無菌要求進行。（）將試管按需要數(shù)量分組排列于試管架上，每管加入 稀釋液。鐒鸝餉飾鐔閌貲諢癱騮吶轉(zhuǎn)鮭錢驗鎖。攙閿頻嶸陣澇諗譴隴瀘鐙澮蹤島騁檻。如此類推，直至最后一管。趕輾雛紈顆鋝討躍滿賺蜆騍純蠅驪銬。每一稀釋度接種 個平皿。夾覡閭輇駁檔驀遷錟減汆藥徑鴕駭槍。（）將平皿蓋好，即刻輕輕搖動混勻，平放。（）培養(yǎng)至規(guī)定時間，計數(shù)菌落數(shù)。（）計數(shù)菌落時，一般以肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查。對黑曲霉菌活菌計數(shù)時，以每平板菌落數(shù)在～的稀釋度為準記錄結(jié)果。視絀鏝鴯鱭鐘腦鈞欖糲僉爾魷癆駱鈐。 活菌計數(shù)中技術(shù)操作誤差的測定活菌計數(shù)因技術(shù)操作而引起的菌落數(shù)誤差率（平板間、稀釋度間）不宜超過。偽澀錕攢鴛擋緬鐒鈞錠鈴鉍蹌鏟驊擷。（）認真檢查實驗器材有無破損（要特別注意試管底的裂痕和破洞），以防丟失樣本和污染環(huán)境。（）取液要準確，盡量減少誤差。（）樣液加入平皿后應盡快傾注培養(yǎng)基，避免樣液干燥。（）傾注和搖動應盡量平穩(wěn)，勿使培養(yǎng)基外溢，確保細菌分散均勻，便于計數(shù)菌落。本方法可去除殘留消毒劑對微生物的殺滅和抑制作用。 去除殘留消毒劑方法的原則要求（）應有效去除殘留的消毒劑。（）不破壞培養(yǎng)基的營養(yǎng)成份，不影響其透明度。其操作要點如下：騅憑鈳銘僥張礫陣軫藹攬齊彎議罵擰。）所用中和劑的濃度與容量應與鑒定試驗結(jié)果規(guī)定的相同。）在將樣本接種培養(yǎng)基以前的操作，應按規(guī)定時間內(nèi)進行，以免微生物與中和劑或中和產(chǎn)物接觸過久。多用于難以找到適宜中和劑的消毒效果試驗。其操作要點如下：癘騏鏨農(nóng)剎貯獄顥幗騮鴣詼驤齔駘輸。濾膜及濾器需先經(jīng)滅菌處理。）最后一次沖洗、濾凈后，將微孔濾膜以無菌操作法取出，進行隨后的培養(yǎng)檢測。（）每次吸液，均須更換一支無菌吸管，以防交叉污染。（）試驗條件可影響殘留消毒劑的去除效果，故每進行一種消毒效果試驗，均需按規(guī)定對所選方法進行去除效果的鑒定試驗。確定所選中和劑是否適用于擬進行的消毒效果鑒定試驗。榿貳軻謄壟該檻鯔塏賽緯闥糝鍔駕躦。（）同一消毒劑擬對多種微生物進行殺滅試驗時，所用中和劑應按微生物種類分別進行鑒定試驗。邁蔦賺陘賓唄擷鷦訟湊幟結(jié)廢擴駑彎。（） 鑒定時根據(jù)所用殺菌試驗方法，相應使用懸液或載體進行試驗。第 組中和劑 菌懸液 → 培養(yǎng)第 組（消毒劑 中和劑） 菌液 → 培養(yǎng)第 組稀釋液 菌懸液 → 培養(yǎng)第 組稀釋液 中和劑 培養(yǎng)基 → 培養(yǎng) 中和劑懸液定量鑒定試驗操作程序根據(jù)實驗分組，準備足量試管和平皿，依次進行編號。鑒定試驗包括組：嶁硤貪塒廩袞憫倉華糲饃勵騮詡駐賭。℃ 水浴中 后，再加入 試驗菌懸液，混勻，作用 ，分別吸取 接種于兩個平皿中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第 組取消毒劑于試管內(nèi)，加入中和劑（對于酸性氧化電位水檢測時，取消毒劑于試管內(nèi)，加入中和劑）混勻，置 ℃177。劇妝諢貰攖蘋塒呂侖廟痙湯籪糶駒責?！?水浴中 后，再加入 試驗菌懸液，混勻，作用 ，分別吸取 接種于兩個平皿中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第 組分別吸取稀釋液、標準硬水與中和劑各于同一無菌平皿內(nèi)，倒入上述試驗同批次的培養(yǎng)基～，培養(yǎng)觀察。 中和劑載體定量鑒定試驗操作程序根據(jù)實驗分組，準備足量試管和平皿，依次進行編號。將適宜濃度的菌懸液用等量適合濃度的有機干擾物稀釋作為試驗菌懸液，載體試驗用菌量應保證其回收菌量在 片～片之間。第 組 吸取中和劑 于無菌平皿中，將其置 ℃177。 立即用無菌鑷子取出菌片移入含 中和劑試管中，用電動混勻器混合，或?qū)⒃嚬苷翊?次，混勻，分別吸取 接種于兩個平皿中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第 組 吸取中和產(chǎn)物溶液（按每片浸有消毒劑的載體加入含中和劑的量制備中和產(chǎn)物） 于無菌平皿內(nèi)，將其置 ℃177。作用 ，用無菌鑷子取出菌片，移入含 中和產(chǎn)物溶液的試管中，用電動混勻器混合，或?qū)⒃嚬苷翊?次，混勻。浹繢膩叢著駕驃構(gòu)碭湊農(nóng)瑤帳結(jié)駁噴?！?水浴中 后， 用無菌鑷子夾入 菌片，并使浸透于稀釋液中。鈀燭罰櫝箋礱颼畢韞糲銨鵬駱隸驅(qū)訛。愜執(zhí)緝蘿紳頎陽灣熗鍵艤訥贓棧馴嘆。其組間菌落數(shù)誤差率應不超過 。（）第組無菌生長。（）試驗重復 次，每次試驗均應符合以上要求。（）嚴守無菌操作，保持試驗用液和器材的無菌，注意更換吸管，以防止沾染影響試驗的準確性。 目 的 通過濾膜過濾和沖洗的方法，去除試驗體系中的殘留消毒劑，以便準確檢測出試驗體系中仍然存活的微生物及其數(shù)量。嚌鯖級廚脹鑲銦礦毀蘄鷯鑭嶁盧馭勞。），真空泵（或抽濾泵）（）稀釋液和沖洗液應不影響濾膜的性質(zhì)，對微生物無傷害作用。（）其他器材隨試驗微生物確定 試驗設計原則（）通過所設各組試驗結(jié)果綜合分析，應可確定所選方法是否對測試消毒劑有良好的去除作用，對試驗微生物以及其恢復期培養(yǎng)是否有害或不良影響。（）試驗中所用消毒劑的濃度應為殺菌試驗中使用的最高濃度。對細菌繁殖體，在大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌中任選其一進行試驗；對細菌芽孢、白色念珠菌、黑曲霉菌、分枝桿菌應分別進行鑒定試驗。當用其他特定微生物進行殺滅試驗時，均應以該特定微生物進行中和劑的鑒定試驗。通常，懸液鑒定試驗結(jié)果可用于載體試驗。操作程序如下：根據(jù)實驗分組，準備足量試管和平皿，依次進行編號。其試驗分以下組進行：烴斃潛籬賢擔視蠶賁粵貫飭驢噦餾艱。取 加入到過濾器中，然后加入蒸餾水作沖洗過濾處理，然后直接將濾膜有菌面朝上貼于平板表面，放置在℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（真菌和芽孢培養(yǎng)），計數(shù)菌落數(shù)。第 組吸取 試驗菌懸液直接加入到過濾器中，然后加入至沖洗液于過濾器中，做第次沖洗過濾處理，再加入蒸餾水做第次沖洗過濾處理，最后將濾膜有菌面朝上貼于平板表面，放置在℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（真菌和芽孢培養(yǎng)），計數(shù)菌落數(shù)。第 組吸取消毒劑于試管中，加入有機干擾物，再加入稀釋液，混勻，取 加入到過濾器中，加入至沖洗液做第次沖洗過濾處理，再加入沖洗液做第次沖洗過濾處理，沖洗后吸取 試驗菌懸液直接加入到過濾器中，再加入蒸餾水做第次沖洗過濾處理，然后將濾膜有菌面朝上貼于平板表面，置 ℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（真菌和芽孢培養(yǎng)），計數(shù)菌落數(shù)。 評價規(guī)定試驗結(jié)果符合以下全部條件，所測中和劑可判為合格:（）第 、和 組測定的結(jié)果，菌懸液菌數(shù)應在 濾膜～濾膜之間，其組間菌落數(shù)誤差率不得超過。（）試驗重復 次，每次試驗均應符合以上要求。 實驗器材（）按 所示方法制備的金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌和枯草桿菌黑色變種芽孢懸液或菌片。（）消毒劑溶液除有特殊規(guī)定者外，應使用無菌硬水配制。例如，含氯消毒劑以所含有效氯濃度為準，碘伏以所含有效碘為準，過氧乙酸以所含過氧乙酸量為準，復方消毒劑濃度以主要殺菌有效成分含量為準。（）去除殘留消毒劑的中和劑或設備（經(jīng)鑒定試驗證實合格的中和劑或有關(guān)器材）（）消毒劑稀釋用標準硬水 見附錄（）有機干擾物質(zhì)懸液試驗和載體試驗用牛血清白蛋白溶液，本規(guī)范中規(guī)定對用于經(jīng)過清洗或較清潔的消毒對象的消毒劑，有機干擾物牛血清白蛋白的濃度為；對用于不經(jīng)過清洗或較臟的消毒對象的消毒劑，有機干擾物牛血清白蛋白的濃度為。（）培養(yǎng)基見附錄（）含中和劑的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（中和劑），中和劑經(jīng)鑒定合格（）刻度吸管 （、）（）恒溫水浴箱（）恒溫培養(yǎng)箱（）電動混勻器（）秒表 實驗分組試驗中應分以下各組：（）試驗組按測試目的有兩種選擇。根據(jù)使用說明書，選定試驗菌和一個消毒劑濃度（即產(chǎn)品使用說明書中指定的最低濃度）以及個作用時間（說明書指定最短作用時間，指定最短作用時間的倍，指定最短作用時間的倍。驥擯幟褸饜兗椏長絳粵藎鍰館煒餓紓。根據(jù)所試菌種和消毒劑對該菌的殺滅能力，選定一株抗力較強的菌和一個消毒劑濃度（即產(chǎn)品使用說明書中指定的最低濃度）以及個作用時間（說明書指定最短作用時間）進行試驗。（）陽性對照組根據(jù)各種試驗的規(guī)定，用標準硬水代替消毒劑溶液，按上述同樣的步驟進行試驗。鑣鴿奪圓鯢齙慫餞離龐東償禱對餅簣。欖閾團皺鵬緦壽驏頦蘊釙負壽虜餉駒。無特殊說明者，一律使用無菌硬水配制，配制的濃度為待測濃度的倍（例如要評價的消毒液濃度為，則應配制的濃度為），置℃177。遜輸吳貝義鰈國鳩猶騸繢樣餃鱉饒禿。℃ 水浴中 后，用無菌吸管吸取上述濃度消毒液 注入其中，迅速混勻并立即計時。（）待試驗菌與消毒劑相互作用至各預定時間，分別吸取試驗