產(chǎn)微生物絮凝劑菌株的篩選及產(chǎn)絮凝劑發(fā)酵條件的研究-在線瀏覽
2025-05-25 03:11本頁面
【正文】 ivity, after rescreening after a strain of the highest flocculating activity of C1. Flocculants produced by the strain settlement rate, flocculation rate, shows the practical application of microbial flocculants good prospects. The study shows that its growth curve, C1 strain of flocculating activity and cell biomass was positively correlated 24h culture can achieve the highest flocculating activity.Key words Microbial flocculants。 Optimization1 / 100 引言目前國內(nèi)外用于提高水質(zhì)處理效率的一種既經(jīng)濟又簡便的水處理技術(shù)之一就是添加適宜的絮凝劑 ，絮凝劑被廣泛應(yīng)用于廢水處理、食品加工和化工等工業(yè)過程。前2種絮凝劑不易降解，且其可能是神經(jīng)毒劑和致癌、致突變因子，現(xiàn)在許多領(lǐng)域已禁止或限量使用。MBF的研制正成為當(dāng)今世界絮凝劑研究的重要課題絮凝在給水和排水中均發(fā)揮著不可缺少的重要作用，所應(yīng)用的絮凝劑主要有傳統(tǒng)的無機、有機絮凝劑及生物絮凝劑，前者由于具有價格低廉，絮凝效果好等優(yōu)點，因而被廣泛使用，但由于其對人類健康所形成的隱患使其應(yīng)用越來越受到限制。同時，由于能產(chǎn)生絮凝作用的微生物種類多、生長快、易于采取生物工程手段實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化 ，因此，研究和開發(fā)微生物絮凝劑具有深遠的現(xiàn)實意義和廣闊的應(yīng)用前景。1 材料與方法 材 料 菌 種 來 源以取自武漢生物工程學(xué)院柳園餐廳的生活污水以及餐廳旁的活性污泥作為菌種來源。本實驗中，富集培養(yǎng)時選用上述培養(yǎng)基的液體培養(yǎng)基，分離、保藏菌株時則采用相應(yīng)的固體培養(yǎng)基 [23]。7H2O ， KCl 0．15g，KH 2PO4 ，ZnSO 4H2O ，蒸餾水1 000mL，pH值自然。2 / 10 富 集 培 養(yǎng)分別在不加瓊脂的PDA培養(yǎng)基，高氏一號培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入1mL的土壤懸液，均富集培養(yǎng)兩天，編號并注明日期。用移液管移取1mL 的細菌富集培養(yǎng)液于一裝有9mL無菌水的試管中，混勻，再用另一支移液管移取此稀釋液1mL于另一裝有9mI無菌水的試管中，依次類推將富集培養(yǎng)液逐漸稀釋制成10 2～10 6各種梯度的培養(yǎng)液。(2)平板劃線。放線菌，霉菌，真菌以同樣的方法操作，于28℃ 倒置培養(yǎng)5～7天。 將 透 明 圈 比 較 大 的 菌 落 進 行 編 號 ， 分 別 接 種 于 各 自 的 斜 面 培 養(yǎng) 基 中 培養(yǎng) [5]。將初篩菌株分別接種于裝有150mL培養(yǎng)基的 250mL三角瓶中，30℃、150r／min 振蕩培養(yǎng)，于24h、48h、72h取樣，測定培養(yǎng)液在不離心和3000r ／rain離心30min兩種情況下，菌株發(fā)酵液對高嶺土懸濁液的絮凝活性，進行復(fù)篩 [67]。、 的CaCl 2及2mL純化培養(yǎng)的培養(yǎng)液，加蒸餾水至100mL 。靜置10min，取比色管中75mL處的上清液并以蒸餾水為參比溶液，于波長為 550nm處測其吸光度。2 結(jié)果與討論 菌 株 分 離 及 初 篩 結(jié) 果本實驗共分離菌株36株，每種培養(yǎng)基9株，分別命名為PP… …P9(PDA培 養(yǎng) 基 )，NN2 、… …N9(牛 肉 膏 蛋 白 胨 培 養(yǎng) 基 )， CC… …C9（ 查 氏 培 養(yǎng) 基 ） ，GG2 、… …G9（ 高 氏 培 養(yǎng) 基 ） [1213]。3 / 10 復(fù) 篩 結(jié) 果復(fù)篩結(jié)果如表1所示。將這三株菌株重新接種培養(yǎng)，對培養(yǎng)液的發(fā)酵活性進行比較，結(jié)果顯示C1菌株沉降速度最快，絮凝率最高，且菌株懸液濃度較低，表明該菌株產(chǎn)微生物絮凝劑能力強，且培養(yǎng)液絮凝活性好。表1 不同菌株絮凝活性菌株 N2 G2 G4 G5 C1 C2 C3 C5 C7 C8絮凝率 培 養(yǎng) 條 件 的 優(yōu) 化 培 養(yǎng) 溫 度 對 絮 凝 劑 絮 凝 率 的 影 響表2 培養(yǎng)溫度對絮凝劑絮凝率的影響培養(yǎng)溫度（℃ ） 23 25 27 30 33 35 37絮凝率 由表2可知，當(dāng)溫度為30℃ 時。這是因為溫度過低或過高時，微生物生長過慢或過快，均不利于絮凝劑的積累 [15]。 培 養(yǎng) 基 初 始 pH 值 對 絮 凝 劑 產(chǎn) 生 速 率 的 影 響表3 初始pH值對絮凝劑絮凝率的影響pH 值 4 5 6 7 8 9絮 凝 率 pH值對微生物的生長和代謝具有很大的影響。由表 3可以看出，～，都有較高的絮凝活性，最佳pH ，此時絮凝率達到 ％。發(fā)酵液的絮凝率在12h之前均為負數(shù)，可能因為在培養(yǎng)初期，絮凝劑產(chǎn)生菌尚未產(chǎn)生絮凝劑，相反在發(fā)酵液或高嶺土中某些成分使吸光度增大，導(dǎo)致絮凝率為負值 [17]。表4 生長周期對絮凝劑絮凝率的影響生長周期 12h 24h 36h 48h 60h 72h 84h 96h 108h絮凝率 4 / 10 不 同 接 種 量 對 菌 體 產(chǎn) 絮 凝 劑 的 影 響在發(fā)酵培養(yǎng)基中分別以1％、2％、3％、4％、5％、6％的接種量接入種子液，經(jīng)搖床培養(yǎng)72h
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