[研究生入學(xué)考試]吸光光度法-在線瀏覽
2025-04-10 12:41本頁面
【正文】 022/3/13 19 167。 2022/3/13 20 167。 ? 而對(duì)于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和 λmax則不同。 吸光光度法基本原理 ? ③ 吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)。 ? 吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長的重要依據(jù) . 2022/3/13 22 167。 2022/3/13 23 167。 2022/3/13 24 167。 2022/3/13 25 167。 吸光光度法基本原理 ? 比耳定律 ? (1)朗伯定律 ? 光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。 ? A ∝ b 2022/3/13 27 167。 吸光光度法基本原理 ? (2)比爾定律 : ? 1852年 比爾 (Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物濃度之間也具有類似的關(guān)系。 吸光光度法基本原理 2022/3/13 30 167。L1； g 吸光光度法基本原理 ? 同一待測組分，若顯色反應(yīng)形成的吸光物質(zhì)不同， ε 具有不同的值。mol1cm1 2022/3/13 32 167。 吸光光度法基本原理 ? 吸光度的加合性 多組分體系：當(dāng)體系中各種吸光物質(zhì)對(duì)某特定波長的光有吸收，且各組分間彼此不發(fā)生作用時(shí)，體系對(duì)該波長單色光的總吸收等于各組分的吸光度之和： ? A總 ＝ A1＋ A2＋ A3＋ +К nbCn 2022/3/13 34 167。 ? （ 2）不隨濃度 c 和光程長度 b 的改變而改變 ?？勺鳛槎ㄐ澡b定的參數(shù)。 吸光光度法基本原理 ? （ 4） εmax越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。mol1mol1mol1 吸光光度法基本原理 ? 偏離比爾定律的原因 ? 由朗伯 比耳定律，吸光度 A與濃度 c呈線性關(guān)系 . 2022/3/13 37 167。 ? 如圖所示。 吸光光度法基本原理 ? 偏離比爾定律的原因： ? 引起偏離的因素（兩大類）： ? 一類是物理性因素，即儀器的非理想引起的；另一類是化學(xué)性因素。 ? 難以獲得真正意義上的純單色光。 吸光光度法基本原理 ? 單色光的獲得： ? 濾光片；光柵；棱鏡。 ?復(fù)合光可導(dǎo)致對(duì)朗伯 比耳定律的： 正或負(fù)偏離。 吸光光度法基本原理 ? ? 朗 比耳定律的 假定 ： ? 所有吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生相互作用 ? 當(dāng)溶液中存在著 ： 離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成 等化學(xué)平衡時(shí)， ? 使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化，影響吸光度。 吸光光度法基本原理 ? （ 1）平衡效應(yīng)： ? 有些有色物質(zhì)在溶液中發(fā)生締合、離解，同溶劑反應(yīng)，產(chǎn)生互變異構(gòu)體，光化分解等平衡效應(yīng)改變了吸收曲線的形狀 λmax ，吸收強(qiáng)度等發(fā)生了變化，從而導(dǎo)致偏離。 吸光光度法基本原理 ? 例如 :亞甲基藍(lán)單體在 660 nm有最大吸收，隨著濃度的增大， 單體聚合形成二聚體 ，二聚體在 610 nm有一個(gè)最大的吸收峰。 2022/3/13 43 167。 吸光光度法基本原理 ? （ 2）酸效應(yīng)、溶劑效應(yīng)引起偏離 例：碘在 CCl4 呈 紫色 在乙醇中呈 棕色 。 2022/3/13 45 167。 光度計(jì)及其基本部件 167。 光度計(jì)及其基本部件 ? 比色法和吸光光度法 ? 目視比色法是： ? 用眼睛辨別顏色深淺，以確定待測組分含量的方法。 2022/3/13 48 167。 光度計(jì)及其基本部件 ? 方法的特點(diǎn) ? a 利用自然光，無需特殊儀器 。 ? c 目測，方法簡便，靈敏度高 。 ? e 不可分辨多組分。 光度計(jì)及其基本部件 ? （分光光度法） ? 利用儀器測量有色物質(zhì)溶液的吸光度（ A），進(jìn)行分析測定的方法。 光度計(jì)及其基本部件 ? 分光光度法特點(diǎn)： ? a. 適合微量或痕量組份的分析 ? b. 靈敏度高。 ? 檢測下限： ? 10－ 5～ 10－ 6； 10－ 8mol/L ? c. 準(zhǔn)確度高。 ? 。 光度計(jì)及其基本部件 ? 分光光度計(jì) ? 光度計(jì)基本組成 ? 單波長單光束分光光度計(jì) ： 2022/3/13 53 167。 光度計(jì)及其基本部件 ? 單波長雙光束分光光度計(jì) 2022/3/13 55 167。 光度計(jì)及其基本部件 ? 1. 光源 ? 可見光區(qū)：鎢燈作為光源， ? 波長范圍在 320～ 2500 nm。 ? 185～ 400 nm的連續(xù)光譜。 光度計(jì)及其基本部件 ? 2. 單色器 ? 將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出任一波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。 光度計(jì)及其基本部件 ? 3. 樣品室 （吸收池） ? 樣品室放置各種類型的吸收池：（比色皿） 。2cm。 ? 吸收池主要有石英池和玻璃池兩種 ? 在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。 光度計(jì)及其基本部件 ? 4. 檢測器 ? 利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號(hào)變成可測的電信號(hào)，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。 光度計(jì)及其基本部件 ? 5. 結(jié)果顯示記錄系統(tǒng) ? 檢流計(jì)、數(shù)字顯示、微機(jī)進(jìn)行儀器自動(dòng)控制和結(jié)果處理。 光度計(jì)及其基本部件 ? 商品化儀器 2022/3/13 62 167。 光度計(jì)及其基本部件 2022/3/13 64 167。 顯色反應(yīng)及顯色條件的選擇 ? 1
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