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2025-03-03 11:25本頁面
【正文】 c c：溶液的濃度，單位 gg１ (2) 摩爾吸收系數(shù) ε在數(shù)值上等于濃度為 1 mol （ 1）吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的 特征常數(shù) ； （ 2） 不隨濃度 c和光程長度 b的改變而改變 。在最大吸收波長 λmax處的摩爾吸收系數(shù) κmax表明了該 吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力 ，也反映了光度法測定該物質(zhì)可能達到的最大靈敏度 。 ε 105：超高靈敏； ε = (6～ 10） 104 ：高靈敏； ε = 104～ 103 ：中等靈敏； ε 103 ：不靈敏。L液層厚度為 1cm時該溶液在某一波長下的吸光度。 定義：單位截面積光程內(nèi)所能檢測出的吸光物質(zhì)的最低含量，即 S=Cminb 不同波長下 的 S不同，在最大波長 λ max下的桑德爾靈敏度能反映測定某物質(zhì)所能達到的最大靈敏度。M 103 106 S=M/ε(ug/cm2) 分光光度計及吸收光譜 光源 單色器 比色皿 檢測器 顯示裝置 分光光度計 1. 光源 在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。 紫外區(qū)： 氫、氘燈。 2. 單色器 將光源發(fā)射的復合光分解成單色光并可從中選出一任意波長單色光的光學系統(tǒng)。棱鏡或光柵 3. 樣品室 樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應的池架附件。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。光電檢測器。 (1)光電管 (2)光電二極管陣列 電容器再次充電的電量與每個二極管檢測到的光子數(shù)目成正比，而光子數(shù)又與光強成正比。 電容器 充電 電容器 放電 光照射 再次充電 測量周期 吸收光譜 分子結構的復雜性使其對不同波長光的吸收程度不同。吸光度最大處對應的波長稱為 最大吸收波長 λmax。而對于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和 λmax則不同。 （ 4） 不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長下吸光度 A 有差異，在 λmax處吸光度 A 的差異 最大 ,所以測定最靈敏 ， 選擇入射光波長的重要依據(jù)。 （ 5） 吸收光譜的作用： 選擇 λmax為測定波長。 2 .參比溶液的選擇 為什么需要使用參比溶液？ 測得的的吸光度要能真正反映待測溶液吸光強度。 配制參比溶液，測定其吸光度，使 A參比 =Ar， 則 A試樣 = A溶液 A參比 若人為將參比的吸光度調(diào)節(jié)為零， A試樣 可以直接讀出。 (5) 改變加入試劑的順序，使被測組分不發(fā)生顯色反應，作 為參比溶液消除干擾。 2 顯色劑 無機顯色劑 ： 硫氰酸鹽、鉬酸銨等。偶氮胂 III、 PAR等。 例 : TiEDTAH2O2三元配合物的穩(wěn)定性 ， 比 TiEDTA和 TiH2O2二元配合物的穩(wěn)定性 ， 分別增強約 1000倍和 100倍 。 選擇曲線變化平坦處 。 如果 λmax處有 共存組分干擾 時， 則應考慮選擇 靈敏度稍低 但能 避免干 擾的入射光波長。 測量波長的選擇 : “吸收最大，干擾最小 ” 原則 2. 標準曲線的制作 （ 1）根據(jù) A=ε bc配制一系列不同濃度的標準溶液 。 （ 3）在選定的波長條件下 。 （ 5）測定吸光度 ， （ 6）以濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標 ， （ 7）繪制通過 原點 的標準曲線。 引起偏離的因素（兩大類） （ 1）物理性因素， 即儀器的非理想引起的； （ 2）化學性因素。 分光光度計只能獲得近乎單色的狹窄光帶。 非單色光、雜散光、非平行入射光都會引起對朗伯 — 比耳定律的偏離， 最主要的是非單色光作為入射光引起的偏離。10 0t0t?? A總 = lg（ Ｉ 0總 /Ｉ t總 ) = lg[(I01 +Ｉ 02)/(Ｉ t1 +Ｉ t2 ） ] = lg[(I01 +Ｉ o2)/(Ｉ 01 10 ε1bc +Ｉ 02 10 ε2bc ） ] 令： ε1 ε2
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