化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)ppt課件-在線瀏覽
2025-03-03 09:28本頁(yè)面
【正文】 + AMP+ O2 + CO2 + 化學(xué)發(fā)光 ? 機(jī)制： 某些化合物可以利用化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的能 量使其產(chǎn)物分子或反應(yīng)中間態(tài)分子上升至電子 激發(fā)態(tài)。 ? 化學(xué)發(fā)光劑或發(fā)光底物： 在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中參 與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)射光子的形式釋放能量 的化合物。 化學(xué)發(fā)光劑應(yīng)符合以下幾個(gè)條件 返回 ? 是指經(jīng)酶的降解作用而發(fā)出光的一類(lèi)發(fā)光底物。 HPA H2O2 HRP +熒 光 C O O HH O C HC O O HH O C H 22氧化二聚體 AMPPD ? AMPPD在堿性條件下，被 AP酶解生成相當(dāng)穩(wěn)定的 AMPD陰離子，其有 2～ 30min的分解半衰期，發(fā) 出波長(zhǎng)為 470nm的持續(xù)性光，在 15min時(shí)其強(qiáng)度 達(dá)到高峰， 15～ 60min內(nèi)光強(qiáng)度保持相對(duì)穩(wěn)定。 熒光 AP 4MUP 4MU 360nm 激發(fā)光 H3PO4 + 特點(diǎn)： 不需催化劑，只需改變?nèi)芤旱?pH等條件 就能發(fā)光的物質(zhì)。 常用試劑： 吖啶酯（ acridinium， AE） + CO2+ 光 NC H 3C OORH O+2NC H 3C OORONC H 3C OOO ? 是指通過(guò)在電極表面進(jìn)行電化學(xué)反應(yīng)而發(fā)出 光的物質(zhì)。只是最后一 步酶反應(yīng)所用底物為發(fā)光劑，通過(guò)發(fā)光反應(yīng) 發(fā)出的光在特定的儀器上進(jìn)行測(cè)定。 化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定技術(shù)反應(yīng)原理圖 EEEEE 洗滌 棄上清 E堿性磷酸酶 標(biāo)記抗體抗體包被塑料微珠樣本抗原 AMPPDEA M P P D 發(fā)光 是利用酶對(duì)發(fā)光底物催化作用而直接發(fā)光， 通過(guò)光強(qiáng)度的測(cè)定而直接進(jìn)行定量。 加入 4MUP，酶標(biāo)抗體上 AP將 4MUP分解，形成 4MU，它在 360nm激發(fā)光的照 射下，發(fā)出 448nm的熒光，經(jīng)熒光儀記錄，放大， 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線由電腦計(jì)算出所測(cè)物質(zhì)的含量 ： 用抗原或抗體包被磁顆粒 ,與標(biāo)
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1