【正文】 nrat（ 1956） （ 1） TMV的拆開(kāi)實(shí)驗(yàn) 苯酚 感染煙草 病斑煙葉 正常煙葉 HRV HRV MTV MTV 病毒的拆開(kāi)和重建實(shí)驗(yàn) 二、遺傳物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的存在部位和方式 ?真核微生物 ?原核微生物 ?核區(qū)：核基因組 ?核外遺傳物質(zhì) ——質(zhì)粒 三、原核生物的質(zhì)粒 質(zhì)粒 ( plasmid ) ： 是一類小型核外雙螺旋DNA分子，能獨(dú)立于細(xì)胞核進(jìn)行自主復(fù)制。 ? 游離態(tài) 附加體：整合到核基因組上 ?4. 質(zhì)粒的功能：多樣化，正常生長(zhǎng)非必須的，但賦予細(xì)菌某些性狀特征 ? ? （一）質(zhì)粒 (plasmid)的性質(zhì) 質(zhì)?？沙蔀榛蚬こ痰妮d體 （二）質(zhì)粒的類型 ※ 按照拷貝數(shù) 低拷貝數(shù)質(zhì)粒或嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒， 高拷貝數(shù)質(zhì)?；蛩沙谛唾|(zhì)粒 ※ 按照宿主范圍 窄宿主范圍質(zhì)粒 廣宿主范圍質(zhì)粒 ※ 按照編碼的功能 質(zhì)粒的類型 ? 1) 致育質(zhì)粒（ F因子）：與細(xì)菌有性生殖有關(guān) ? 2) 抗性質(zhì)粒（ R因子）： 與細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類抗性有關(guān) ? 3) 細(xì)菌素質(zhì)粒 （ Col因子）： 產(chǎn)生細(xì)菌素 ? 4) 毒力質(zhì)粒（ Vi質(zhì)粒）： 編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子 ? 5) 降解性質(zhì)粒：編碼降解有毒物質(zhì)酶的質(zhì)粒 ? 6） Ti質(zhì)粒：誘癌質(zhì)粒，合成冠癭堿類 ? 7） Ri質(zhì)粒：誘發(fā)植物產(chǎn)生毛狀根 ? 8）巨大質(zhì)粒（ mega質(zhì)粒） ? 9) 酵母的 2181。 ?鑒定： 電鏡觀察、電泳、密度梯度離心、限制性酶切圖譜等方法 第二節(jié) 基因突變與育種 ※ 突變（ mutation）：遺傳物質(zhì)突然發(fā)生可遺傳的變化。 第七章 微生物的遺傳變異與育種 ?突變體（ mutant）：發(fā)生了突變的微生物細(xì)胞或菌株 ?野生型（ wild type）：從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生突變前的原始菌株 一、基因突變的類型 堿基變化與遺傳信息的改變 同義突變（ samesense mutation） 錯(cuò)義突變（ missense mutation） 無(wú)義突變（ nonsense mutation） 移碼突變（ frameshift mutation） 堿基變化與遺傳信息的改變 原序列： 5180。 多肽 Met Pro Ser Arg Cys Gly Gln 5180。 多肽 Met Pro Ser Arg Cys Gly Gln 5180。 多肽 Met Pro Ser Gly Cys Gly Gln 5180。 多肽 Met Pro Ser Arg Stop Gly Gln 5180。 5180。 多肽 Met Pro Ser Ser Val Gly etc 同義突變 錯(cuò)義突變 無(wú)義突變 移碼突變 表型 變化 營(yíng)養(yǎng)缺陷型 ——一種缺乏合成其生存所必須的營(yíng)養(yǎng)物的突變型 ,必須從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營(yíng)養(yǎng)物 或其前體才能生長(zhǎng) . 抗性突變型 ——因突變而產(chǎn)生了對(duì)某種化學(xué)藥物或致死物理因子的抗性的突變類型。 ?自發(fā)性：突變可以在沒(méi)有人為誘變因素處理下自發(fā)地產(chǎn)生 。 ?獨(dú)立性：各種突變獨(dú)立發(fā)生 ， 不會(huì)互相影響 。 ?穩(wěn)定性：變異性狀穩(wěn)定可遺傳 。 ?突變率也可以用每一單位群體在每一世代中產(chǎn)生突變株（ mutant，即突變型）的數(shù)目來(lái)表示。ck 根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理，設(shè)計(jì)了的實(shí)驗(yàn)。 溴化乙啶 移碼突變劑 Ames test——檢測(cè)化學(xué)誘變劑 Ames test的基本依據(jù)是什么？ “生物化學(xué)統(tǒng)一性 ”法則： 人和細(xì)菌在 DNA的結(jié)構(gòu)及特性方面是一致的，能使微生物發(fā)生突變的誘變劑必然也會(huì)作用于人的 DNA，使其發(fā)生突變，最后造成癌變或其他不良的后果 誘變劑與致癌物質(zhì) ——Ames試驗(yàn) 所有生物的 DNA在結(jié)構(gòu)及特性上具有一致性 讓細(xì)菌代人受過(guò)！ 證明 Ames試驗(yàn)重要性的應(yīng)用實(shí)例： 國(guó)外曾開(kāi)發(fā)了一種降低婦女妊娠反應(yīng)的藥物 “ 反應(yīng)停 ” ，由于其 藥效顯著，在 6070年代十分流行， 但隨后人們就發(fā)現(xiàn)畸形兒的出生率明顯增高，而且生產(chǎn)畸形兒的 婦女大多曾服用 “ 反應(yīng)停 ” ，后來(lái)采用 Ames試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)這種物質(zhì)的確 具有很強(qiáng)的致突變作用，因此這種藥物被禁止使用 但如果能在這種藥物上市之前就進(jìn)行 Ames試驗(yàn)檢測(cè)，那么這種大 量出生畸形兒的悲劇完全可以避免。 ： 由于一般的微生物中都存在著光復(fù)活作用，所以進(jìn)行紫外線誘變育種時(shí)，只能在紅光下照射及處理照射后的菌液。 ? 誘變育種具有極其重要的實(shí)踐意義 。 誘變育種 誘變育種的基本步驟 出發(fā)菌株 出發(fā)菌株的純化 單孢子或單細(xì)胞懸液的制備 誘變處理 突變株的分離和篩選 誘變育種中的幾個(gè)原則 ?選擇簡(jiǎn)便有效的 誘變劑 ?挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株 ?處理單孢子或單細(xì)胞懸液 ?選用合適的誘變劑量 ?充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng) ?設(shè)計(jì)高效篩選方案 選擇合適的誘變劑 ? 根據(jù)菌種的特性和遺傳穩(wěn)定性來(lái)選擇誘變劑 ? 遺傳性能穩(wěn)定的菌株 ——突變譜廣，誘變效率高、強(qiáng)誘變劑 ? 遺傳性能不穩(wěn)定的菌株 ——溫和誘變劑 ? 參考出發(fā)菌株原有的誘變譜系來(lái)確定誘變劑 ? 在選用理化因子作誘變劑時(shí) ， 在同樣效果下 ， 應(yīng)選用 最方便 的因素；而在同樣方便的情況下 ， 則應(yīng)選擇 最高效 的因素 。 出發(fā)菌株的選擇 ?出發(fā)菌株應(yīng)具備： ①具有特定生產(chǎn)性狀的能力或潛力； ②每次誘變或均有一些表型改變的菌株 ③有其他一些優(yōu)良性狀： ?出發(fā)菌株的來(lái)源： ①自然界直接分離到的野生型菌株 ②歷經(jīng)生產(chǎn)考驗(yàn)的菌株 ③已經(jīng)歷多次育種處理的菌株 要求： ①菌體處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 ②細(xì)胞分散且為單細(xì)胞（單孢子） 方法： ① 玻璃珠打散 1015min。 制備 ： 物理誘變劑 ——生理鹽水 （ %NaCl) 化學(xué)誘變劑 ——緩沖液 濃度： 細(xì)菌、放線菌 108個(gè) /ml 霉菌、酵母菌 106個(gè) /ml 制備單細(xì)胞（單孢子）懸液 確定合適的誘變劑量 ? 誘變劑劑量： 一般指強(qiáng)度與作用時(shí)間的乘積。在育種實(shí)踐中，常以殺菌率來(lái)作誘變劑的相對(duì)劑量 。 確定合適的誘變劑量 ? 在一定的劑量范圍內(nèi)，突變率往往隨劑量的增高而提高，但正變較多出現(xiàn)在偏低的劑量中，而負(fù)變則較多出現(xiàn)在偏高的劑量中；。 ?復(fù)篩 ：確認(rèn)符合要求的菌株； ——復(fù)篩以質(zhì)為主，應(yīng)精確測(cè)定每個(gè)菌