選修3專題1、4基因工程、生物技術(shù)的安全性和倫理問題-在線瀏覽
2025-02-25 12:53本頁面
【正文】 性。 (2)作用特點 ①主要切割外源 DNA，而對自身的 DNA 不起作用，達到 保護自身的目的。 (3)作用結(jié)果 ——形成 DNA 片段末端 ① 黏性末端：錯位切，切下后的兩端形成單鏈末端。 (4)作用實質(zhì)：使特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 斷開。 (2)常用種類及作用 ① E ②利用它在宿主細胞內(nèi)對目的基因進行 大量復制。 ② 有多個限制酶切位點，以便與目的基因連接。 (3)種類 ① 細菌質(zhì)粒：細菌擬核 DNA 以外的小型環(huán)狀 DNA。 幾種酶的作用部位 (1)作用于 ① 部位的酶：限制酶、 DNA 連接酶、 DNA 聚合 酶、 Taq 酶。 限制酶 BamH Ⅰ EcoRⅠ PstⅠ 識別序列和 切割位點 ↓ GGATCC CCTAGG ↑ ↓ GAATTC CTTAAG ↑ ↓ CTGCAG GACGTC ↑ 【 典例 1】 (2022年浙江聯(lián)考 )下表為幾種限制性核酸內(nèi)切酶識別的序列和切割的位點 。 現(xiàn)用 BamHⅠ 和 EcoRⅠ 兩種酶同時切割該 DNA片段 (假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開 )， 下列各種酶切位點情況中 ， 可以防止酶切后單個含目的基因的 DNA片段自身連接成環(huán)狀的是 ( ) A． 1 為 BamH Ⅰ ， 2 為 EcoR Ⅰ ， 3 為 BamH Ⅰ ， 4 為 Pst Ⅰ B． 1 為 EcoR Ⅰ ， 2 為 BamH Ⅰ ， 3 為 BamH Ⅰ ， 4 為 Pst Ⅰ C． 1 為 Pst Ⅰ ， 2 為 EcoR Ⅰ ， 3 為 EcoR Ⅰ ， 4 為 BamH Ⅰ D． 1 為 BamH Ⅰ ， 2為 EcoR Ⅰ ， 3 為 Pst Ⅰ ， 4 為 EcoR Ⅰ [解題思路 ]第一步 提取隱含信息： ① 酶切后單個含目 的 基因的 DNA 片段的兩 個黏性末端如果是相同的，則能自身連 接成環(huán)狀； ② 要切下單個含目的基因的 DNA 片段，必須在 3 位點上切割。 [答案 ]A ?考點對應(yīng)練 1． (2022 年寧波統(tǒng)考 )下列關(guān)于 DNA 連接酶和 DNA 聚合 酶的敘述中，正確的是 ( ) A A．兩者催化同一種化學鍵形成 B．兩者催化同一種化學鍵斷裂 C．兩者都參與目的基因與載體的結(jié)合 D．兩者都參與遺傳信息的表達 解析： DNA 連接酶和 DNA 聚合酶都作用于磷酸二酯鍵， 前者是使 DNA 片段連接，后者是使單個核苷酸連接成 DNA 子 鏈。 ①從自然界已有的物種中分離：從基 因文庫或 cDNA 文庫中獲取 ②人工合成：反轉(zhuǎn)錄法、化學合成法 ③ 利用 PCR 技術(shù)擴增 【 說明 】 基因文庫就相當于某種生物的基因倉庫，儲備著 大量該物種的基因。 ② 用作載體的質(zhì)粒的插入部位前須有啟動子，后須有終止 子。 方法 主要適用范圍 受體細胞 植物細胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 雙子葉植物、 裸子植物 體細胞 花粉管通道法 抗蟲棉 受精卵 基因槍法 單子葉植物 體細胞 動物細胞 顯微注射法 動物 受精卵 病毒侵染法 微生物細胞 轉(zhuǎn)化法 (CaCl2) 原核生物 大腸桿菌等 3． 目 的基因?qū)胧荏w細胞的方法 (1)導入檢測： DNA 分子雜交法 (使用 DNA 探針 )檢測目的 基因。 ② 翻譯檢測：免疫法，提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗 原－抗體雜交。 ① 如果來自動物的目的基因含有內(nèi)含子，就不能直接用于 轉(zhuǎn)基因植物，只能用該基因的 cDNA(mRNA 反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的互補 DNA 片段 )。 【 典例 2】 (2022 年四川 )北極比目魚中有抗凍基因，其編碼 的抗凍蛋白具有 11 個氨基酸的重復序列，該序列重復次數(shù)越 多，抗凍能 力越強，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示 意圖，有關(guān)敘述正確的是 ( ) A．過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基 因組測序 B．多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達的新基因，不 能得到抗凍性增強 的抗凍蛋白 C．過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿 菌才能進行篩選 D．應(yīng)用 DNA 探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中 目的基因的存在及其完全表達 [解題
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