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細(xì)胞工程制藥復(fù)習(xí)ppt課件-在線瀏覽

2025-02-25 05:22本頁(yè)面
  

【正文】 2)脈沖刺激后 30s 3) 50秒后 4) 5) 6分鐘后 6) 15分鐘后,原生質(zhì)體融合完成。 四、雜種細(xì)胞的篩選 ?同核體 ?異核體 ?多核體 ?異胞質(zhì)體 ?核質(zhì)體 1 植物細(xì)胞篩選方式 1) 遺傳互補(bǔ)篩選法 ? 如 親本 1: 葉綠體缺陷型 親本 2: 光致死型 融合細(xì)胞:正常 ?2) 抗性互補(bǔ)篩選法 ?如: 親本 1:放線菌素 D+, MS- 親本 2:放線菌素 D-, MS+ ?雜種細(xì)胞:放線菌素 D+, MS+ ?而親本和其它細(xì)胞死亡 3) 利用物理特性篩選法 親本 1:異硫氰酸熒光素( FITC)標(biāo)記 親本 2:堿性蕊香紅熒光素標(biāo)記 熒光顯微鏡下,親本 1:綠色,親本 2:紅色,雜種細(xì)胞可以區(qū)分 ?4) 利用生長(zhǎng)特性篩選法 ?如粉蘭煙草與朗氏煙草細(xì)胞:外源激素 ?融合細(xì)胞:內(nèi)源激素 動(dòng)物細(xì)胞的篩選方式: ?1) 利用抗藥性篩選系統(tǒng) ?親本 A: Amp-, Kan+ ?親本 B: Kan-, Amp+ ?雜種細(xì)胞: Amp+ , Kan+ ?2) 營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)篩選系統(tǒng) ?親本 A:色氨酸缺陷型 ?親本 B:蘇氨酸缺陷型 ?雜種細(xì)胞可以在不含色氨酸和蘇氨酸的培養(yǎng)基上培養(yǎng),親本細(xì)胞均死亡。 第二節(jié) 單克隆抗體 一、抗體的結(jié)構(gòu)與功能 二、單克隆抗體的制備和生產(chǎn) 三、單克隆抗體的改造和應(yīng)用 ?抗體 是由 B細(xì)胞受抗原刺激后所分泌的蛋白質(zhì)。 ?單克隆抗體 (monoclonal antibody,簡(jiǎn)稱 McAb): 單一類型 的 只針對(duì)某一特定抗原決定簇 的 抗體分子 。 ? 多用 BALB/C 小鼠的骨髓瘤細(xì)胞。 ? DNA合成途徑有兩種。 ? 含氨基喋呤培養(yǎng)基抑制了全合成途徑 。 ? 雜種細(xì)胞通過互補(bǔ)作用獲得 HRPT或 TK基因 ,可應(yīng)用培養(yǎng)基中次黃嘌呤及胸腺嘧啶核苷, 通過補(bǔ)救合成途徑合成 DNA。 2)特異性雜交瘤細(xì)胞的篩選 ? 可溶性抗原 :放射免疫、免
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