細(xì)胞工程制藥復(fù)習(xí)ppt課件-閱讀頁(yè)
2025-01-23 05:22本頁(yè)面
【正文】 疫酶標(biāo)測(cè)定等 ? 細(xì)胞抗原 :免疫熒光、被動(dòng)血凝實(shí)驗(yàn)、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒等 利用培養(yǎng)基對(duì)單抗進(jìn)行鑒定的過程 一種制備人腫瘤單克隆抗體的方案 ? 方法有 有限稀釋法、軟瓊脂培養(yǎng)法、顯微操作法、流式細(xì)胞儀 等。 ? 3）如果在 96孔板內(nèi)每孔加 ，其機(jī)率將為每孔內(nèi)落入一個(gè)細(xì)胞。 ? 5）根據(jù)檢測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果再次進(jìn)行克隆化。待細(xì)胞長(zhǎng)成集落后，用毛細(xì)管吸出移種于含飼養(yǎng)細(xì)胞的 96孔板內(nèi)。 ? 用 同位素標(biāo)記的單抗 在特定的組織中成象的技術(shù)可以用于腫瘤、心血管畸形的 體內(nèi)診斷 。 ? 利用氧化劑把藥物分子上的糖基氧化成羰基。 ? 這樣的靶向制劑保留一定的藥物活性，并具有一定的選擇性。 ? 小分子交聯(lián)劑：如 同型雙功能試劑 ，包括戊二醛、順烏頭酸酐、馬來酸酐、戊二酐；異型雙功能試劑 ： N－琥珀酰胺基－ 3－丙酸和寡肽等。 ?總之，利用單抗試劑合可以作為靶向藥物，針對(duì)腫瘤、自身免疫系統(tǒng)疾病、各種病原體病等。 ? Fc片段 ? 利用人源的 Fc區(qū)域的 DNA片段替換鼠源單抗的 Fc的 DNA片段。 人源單克隆抗體 ? 方法 1：分離人 B細(xì)胞，使之與熒光標(biāo)記的抗原相結(jié)合，通過熒光標(biāo)記選擇能產(chǎn)生特殊抗體的 B細(xì)胞，并用 Epstein－ Barr病毒轉(zhuǎn)化，得到少量的單抗。 ? 方法 3：將改造過的人的抗體基因?qū)胧笈咛ブ?，能在免疫后得到產(chǎn)生人抗體的轉(zhuǎn)基因鼠 抗體融合蛋白 ?將抗體的可變區(qū)與一非抗體蛋白融合起來，使融合蛋白繼承有抗體分子的結(jié)合特異性。 抗體酶 ? 一種對(duì)酶促反應(yīng)過渡態(tài)特異的抗體結(jié)合了酶與抗體的優(yōu)點(diǎn)，既可以起 酶促催化作用 ，又可以 起抗體的選擇性和專一性結(jié)合抗原的作用 。 ? 單鏈 FV片段 :抗體體積小、免疫原性較低，滲透性好，用于實(shí)體腫瘤的診斷和治療。 ? 雙功能抗體片段： 兩個(gè)抗原結(jié)合特異性不同的 Fab或 Fv片段通過二硫鍵連接起來，如一個(gè)結(jié)合腫瘤特異性抗原，一個(gè)結(jié)合殺傷性 T細(xì)胞，這樣識(shí)別和消滅腫瘤細(xì)胞的功能可以統(tǒng)一在一個(gè)單鏈抗體分子
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