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抗體制藥ppt課件-在線瀏覽

2025-02-22 10:51本頁(yè)面
  

【正文】 單克隆抗體 單克隆抗體是由一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞和一個(gè)具有分泌抗體能力的 B淋巴細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞,通過(guò)無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系 而獲得的 這個(gè)細(xì)胞系的每個(gè)細(xì)胞均具有相同的特性且高度均一,這一細(xì)胞系分泌的抗體均一性極高,活性、亞基、親合力均相同 單克隆抗體的特點(diǎn) 抗體結(jié)構(gòu)高度均一 。 抗體分子在結(jié)構(gòu)上高度均一 , 甚至在氨基酸的序列和空間結(jié)構(gòu)上都相同 高度特異性 。 產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是可以無(wú)性繁殖的細(xì)胞系 第三節(jié) 雜交瘤細(xì)胞系的建立 一、免疫 B淋巴細(xì)胞的制備 1. 抗原 凡是能具有抗原性質(zhì)的物質(zhì)均可制備單克隆抗體 , 抗原可以是全病毒 、 亞單位或純化分子 , 也可以是蛋白質(zhì) 、 多糖 、脂類等 用于制備單克隆抗體的抗原在理論上講 ,純度要求就可以不高 , 也可以使混合抗原 2. 免疫 動(dòng)物的選擇 目前常用的骨髓瘤細(xì)胞系來(lái)自 BALB/c小鼠和 Lou大鼠 免疫方法 A. 體內(nèi)免疫法 B. 脾內(nèi)免疫法 C. 體外免疫法 二、 骨髓瘤細(xì)胞的選擇 在 B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)中 , 主要是用多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞作為親本細(xì)胞 , 這種細(xì)胞是來(lái)自骨髓造血細(xì)胞的一種腫瘤 , 分泌單一抗體的漿細(xì)胞 , 并且衰變成不表達(dá)自身抗體或部分表達(dá) 常見(jiàn)的骨髓瘤親本細(xì)胞系有 Sp2/0, NS1,Y3, YB2 三、 免疫脾細(xì)胞的制備 經(jīng)免疫的 BABL/c小鼠或 Lou大鼠,摘眼球、斷頸等方法處死后,無(wú)菌摘取脾臟,研磨制取 B淋巴細(xì)胞懸液,經(jīng)氯化銨破碎紅細(xì)胞后,洗滌并調(diào)整到( 1~ 5) X107個(gè)/ ml濃度備用 四、 細(xì)胞融合 將免疫脾 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞按照( 5~ 10): 1混合后離心取上清,緩慢加入分子量在 4000~ 6000的 50%
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