鹽度脅迫對黃鰭鯛抗氧化酶和atp酶影響的研究技術(shù)總結(jié)-在線瀏覽
2025-02-21 14:28本頁面
【正文】 取樣前 22h停止投喂。 ? 實(shí)驗(yàn)方法 ? 設(shè) 4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，其中以自然海水組（鹽度 20)為對照組，再設(shè)鹽度分別為 1 5和淡水的 4個(gè)處理組，每組 3個(gè)平行，每平行放養(yǎng) 30尾魚，起始為自然海水養(yǎng)殖。鹽度 5和淡水過渡過程為：采用逐級降低鹽度的方法，設(shè)置每 48h降低一級（鹽度由 20→10→5→ 淡水共 4級），按淡水、 10的順序，每組間隔 48h，按 48 h鹽度下降一級的速度分別將鹽度降至淡水、 5和 10，當(dāng)達(dá)到各組相對應(yīng)的鹽度時(shí)開始計(jì)時(shí)，當(dāng)各組分別實(shí)驗(yàn)至 2 4 7 96和 120h 時(shí)，各組隨機(jī)抽取 6尾幼魚用于生化測定。 ? 酶活力測定 ? 用 MS222 (200 mg/ L) 將黃鰭鯛幼魚麻醉后，將實(shí)驗(yàn)魚置于冰盤上解剖，取出鰓、肝臟和腎臟后，用預(yù)冷 % 生理鹽水快速沖洗，并用吸水紙小心吸干。min1離心 10min。 ? 酶活力采用南京建成試劑盒檢測，相應(yīng)操作參照說明書進(jìn)行。小時(shí) [μmol Pi/(mg prot ? 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)方法 ? 生化測定所得數(shù)據(jù)采用 中的一元方差分析 (Oneway analysis of variance)和 Duncan法進(jìn)行多重比較，分析各實(shí)驗(yàn)組與對照組之間及同一組不同時(shí)間相鄰兩組間的差異， P，所有的數(shù)據(jù)均以平均值 177。 )來表示。淡水組實(shí)驗(yàn)開始后的第一天能攝食，但攝食量明顯下降，后不攝食，在 96h內(nèi)死亡率為 34%； 120h淡水組在 96h內(nèi)沒有死亡。 *****0123456789100h 24h 48h 72h 96h 120h時(shí)間Na+/K+ATP酶濃度對照組 15 10 5 淡水 120 h淡水淡圖 Na+/K+ATP酶活力 注：圖標(biāo)上方有 “ *” ，表示與同一時(shí)間對照組存在顯著性差異 (P)，下同。 ? 鹽度下降速度對黃鰭鯛幼魚鰓 Ca2+/Mg2+ATP酶活力的影響 ? 實(shí)驗(yàn)開始前幼魚鰓 Ca2+/Mg2+ATP酶活力經(jīng)檢驗(yàn)沒有顯著差異 (P)，由圖2可見隨時(shí)間的不斷延長，各組鰓 Ca2+/Mg2+ATP酶活力變化趨勢為：鹽度 15和 10組沒有顯著變化，與對照組沒有顯著差異 (P)；鹽度 5組先升高后降到比對照組略高一些的水平，僅 24h顯著高于對照組 (P)；淡水組沒有顯著變化； 120h淡水組先升高后降到對照組水平，在 24 h顯著高于對照組(P)。 ? 鹽度下降速度對黃鰭鯛幼魚肝臟 CAT活力的影響 ? 實(shí)驗(yàn)開始前幼魚肝臟 CAT活力經(jīng)檢驗(yàn)沒有顯著差異 (P)，由圖 4可見隨時(shí)間的不斷延長，各實(shí)驗(yàn)組黃鰭鯛幼魚肝臟 CAT活力變化趨勢為：鹽度 15與對照組沒有顯著差異 (P)；鹽度 10組先下降后在 72h達(dá)到最高后再下降到對照組的水平， 24h顯著低于對照組 (P)；鹽度 5組先下降后在 72h達(dá)到最高后逐漸恢復(fù)到在對照組的水平，在 24h顯著低于對照組 (P)；淡水組下降后對照組的水平附近波動(dòng)， 48h顯著低于對照組 (P)； 120h淡水組下降后一直在低位波動(dòng)，在 24和 72h顯著低于對照組 (P)。淡水組先升高后下降， 2 48和 96h顯著高于對照組 (P)。淡水組呈波動(dòng)性變化， 24和 96h顯著高于對照組 (P)。魚類對鹽度的適應(yīng)過程分為 2個(gè)階段 : 一是在短期內(nèi)，鹽度變化刺激魚體滲透調(diào)節(jié)生理機(jī)制的改變 。 ? 本實(shí)驗(yàn)中的對照組、鹽度 1 和 5組在 120 h的實(shí)驗(yàn)過程中均未出現(xiàn)反常
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