【正文】 個(gè)藥物的注射劑均加有維生素c作用抗氧化劑，維生素c在243nm處有最大吸收，若在249nm處測定藥物含量，則維生素c有干擾。復(fù)習(xí)總結(jié)：磺胺類藥物結(jié)構(gòu)：具有芳氨基和磺酰胺基，多為兩性化合物，藥物具有一定酸性?；前粪奏ず突前芳讎f唑n1上的含氮雜環(huán)，具有堿性，可以和有機(jī)堿沉淀劑反應(yīng)生成沉淀?；前粪奏ず突前芳讎f唑都有此反應(yīng)。本類藥物的芳伯氨基可和芳醛（如對二甲氨基苯甲醛、香草醛、水楊醛等）在酸性溶液中縮合為有色的希夫氏堿?；前芳讎f唑：草綠色。如磺胺嘧啶可和碘化鉍鉀試液、碘碘化鉀試液生成紅棕色沉淀。滴定前加溴化鉀2g作為催化劑，可加快滴定反應(yīng)速度。永停法指示終點(diǎn)。復(fù)方磺胺甲噁唑片的含量測定：雙波長分光光度法。波長選擇的原則是：干擾組分在λ2和λ1處的吸收度應(yīng)相等。.復(fù)方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑的含量測定：測定波長（λ2）：257nm，在304nm波長附近（）選擇等吸收點(diǎn)波長作為參比波長（λ1），要求 δa=aλ1—aλ2=0。復(fù)方磺胺嘧啶片的含量測定：磺胺嘧啶(sd)的最大吸收波長為308nm，此波長處tmp無吸收，所以可直接測定sd的含量。美國藥典用高效液相色譜法測定。托烷類（硫酸阿托品和氫溴酸山莨菪堿）阿托品和山莨菪堿是由托烷衍生的醇（莨菪醇）和莨菪酸縮合而成，具有酯結(jié)構(gòu)。喹啉類（硫酸奎寧和硫酸奎尼?。┛鼘幒涂岫猷苌铮浣Y(jié)構(gòu)分為喹啉環(huán)和喹啉堿兩個(gè)部分，各含一個(gè)氮原子，喹啉環(huán)含芳香族氮，堿性較弱；喹啉堿微脂環(huán)氮，堿性強(qiáng)。吲哚類（硝酸士的寧和利血平）士的寧和利血平分子中含有兩個(gè)堿性強(qiáng)弱不同的氮原子，n1處于脂肪族碳鏈上，堿性較n2強(qiáng)，故士的寧堿基與一分子硝酸成鹽。鑒別試驗(yàn)：特征鑒別反應(yīng)。鹽酸麻黃堿和偽麻黃堿在堿性溶液中與硫酸銅反應(yīng)，cu2+與仲胺基形成紫堇色配位化合物，加入乙醚后，無水銅配位化合物及其有2個(gè)結(jié)晶水的銅配位化合物進(jìn)入醚層，呈紫紅色，具有4個(gè)結(jié)晶水的銅配位化合物則溶于水層呈藍(lán)色。硫酸阿托品和氫溴酸山莨菪堿等托烷類藥物均顯莨菪酸結(jié)構(gòu)反應(yīng)，與發(fā)煙硝酸共熱，即得黃色的三硝基（或二硝基）衍生物，冷后，加醇制氫氧化鉀少許，即顯深紫色。s反應(yīng)系嗎啡生物堿的特征反應(yīng)。反應(yīng)系嗎啡生物堿的特征反應(yīng)。系吲哚生物堿的特征反應(yīng)。與香草醛反應(yīng)。與對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)。系黃嘌呤類生物堿的特征反應(yīng)。系鹽酸嗎啡與磷酸可待因的區(qū)分反應(yīng)。本品水溶液加稀鐵氰化鉀試液，嗎啡被氧化生成偽嗎啡，而鐵氰化鉀被還原為亞鐵氰化鉀，再與試液中的三氯化鐵反應(yīng)生成普魯士藍(lán)。特殊雜質(zhì)檢查：利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異。因此規(guī)定：供試品置紫外光燈（365nm）下檢視，不得顯明顯熒光。利用吸附性質(zhì)的差異，采用硅膠g薄層進(jìn)行檢查。利用藥物和雜質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)上的差異。利用其它生物堿堿性弱于阿托品的性質(zhì)，取供試品的鹽酸水溶液，加入氨試液，立即游離，發(fā)生渾濁。⑴氫鹵酸鹽的滴定在滴定生物堿的氫鹵酸鹽時(shí)，一般均預(yù)先在冰醋酸中加入醋酸汞的冰醋酸溶液，使氫鹵酸生成在冰醋酸中難解離的鹵化汞，從而消除氫鹵酸對滴定反應(yīng)的不良影響。⑵硫酸鹽的測定硫酸為二元酸，在水溶液中能完成二級電離，生成so42，但在冰醋酸介質(zhì)中，只能離解為hso4，不再發(fā)生二級離解。硫酸阿托品的含量測定。至溶液顯純藍(lán)色。1摩爾的硫酸奎寧可消耗3摩爾的高氯酸。硫酸奎寧經(jīng)強(qiáng)堿溶液堿化，生成奎寧游離堿，在與高氯酸反應(yīng)，因此1摩爾的硫酸奎寧可消耗4摩爾的高氯酸。如硝酸士的寧。磷酸可待因。堿化、提取、滴定。②將有機(jī)溶劑蒸干，于殘?jiān)屑由倭恐行砸掖际谷芙猓魏斡盟岬味ㄒ褐苯拥味?。測定條件的選擇能使生物堿游離的堿化試劑有氨水、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鈣和氧化鎂等。②含酚結(jié)構(gòu)的藥物，如嗎啡，可與強(qiáng)堿形成酚鹽而溶于水，難以被有機(jī)溶劑提取。因此氨水為最常用的堿化試劑。②與生物堿或堿化試劑不起任何反應(yīng)。提取溶劑的用量 通常應(yīng)提取4次，第一次用量至少應(yīng)為水液體積的一半，以后幾次所用溶劑的體積應(yīng)各為第一次的一半。提取終點(diǎn)的確定，置小試管中，加鹽酸或硫酸（）1ml，放水浴上將有機(jī)溶劑蒸去，放冷，滴加生物堿沉淀劑（如碘化鉍鉀試液等）1滴，無沉淀產(chǎn)生，即為提取已完全。離子對被合適的有機(jī)溶劑提取后，形成有色溶液，可供比色測定。一般用的有甲基橙、溴麝香草酚藍(lán)（btb）和溴甲酚綠等。通常有機(jī)溶劑與離子對形成氫鍵的能力強(qiáng)，則提取效率高，如氯仿和二氯甲烷等具有中等程度的提取率，并且提取的選擇性也較好，為最常用的有機(jī)溶劑。：一般賦形劑，重型、酸性乙基弱堿性的物質(zhì)均不干擾測定，強(qiáng)酸可改變?nèi)玖先芤夯蚓彌_液的ph，因而對測定有干擾。應(yīng)用與實(shí)例 硫酸阿托品片劑 紫外分光光度法利血平含量測定，注意避光操作。鑒別試驗(yàn)：糖類用直火加熱，先熔融膨脹，后燃燒并發(fā)生焦糖臭，遺留多量的炭。g反應(yīng)單糖或含有半縮醛基的雙糖分子結(jié)構(gòu)中，均有醛基或酮基，都具有還原性。葡萄糖的鑒別可用此反應(yīng)（無水葡萄糖、葡萄糖注射液、葡萄糖氯化鈉注射液和莪術(shù)油葡萄糖均用fehling反應(yīng)）蔗糖的鑒別：加硫酸煮沸，用氫氧化鈉中和，再加堿性酒石酸銅試液，加熱，生成氧化亞銅的紅色沉淀。葡萄糖注射液中5羥基糠醛的測定：紫外分光光度法。原料藥的含量測定：葡萄糖、乳糖和蔗糖不規(guī)定含量測定，規(guī)定比旋度的范圍。測定中加入氨試液的作用：由于藥用葡萄糖是d葡萄糖，而d葡萄糖有α和β兩種互變異構(gòu)體，因而藥用葡萄糖是他們的混合物，比旋度相差甚遠(yuǎn)，而在水溶液中逐漸平衡，稱作變旋。： 換算為含稅葡萄糖濃度（c’）時(shí)，則應(yīng)為：葡萄糖氯化鈉注射液含量測定：硝酸銀滴定法，每1ml硝酸銀滴定液（）。加硼砂溶液是為了增加ph值，因?yàn)楸酒穚h值過低，則五沉淀出現(xiàn)。苷類藥物苷類為糖的衍生物（如氨基糖、糖醛酸等）與另一非糖有機(jī)化合物通過糖的端基碳原子連接而成的化合物。具有較大的活潑性，由α去氧糖與苷元結(jié)合的生成物（即苷類）容易水解。兩液層交界面處顯棕色（甲地高辛顯紫色）；醋酸層顯藍(lán)色或藍(lán)綠色，放置1h后顯靛藍(lán)色。甾體強(qiáng)心苷元的c17上常有αβ或βγ的不飽和內(nèi)酯，即丁烯內(nèi)酯，在堿性水溶液中易與芳香硝基化合物形成有色的絡(luò)合陰離子。加乙醇溶解后加二硝基苯甲酸試液與乙醇制氫氧化鉀試液各10滴，搖勻后，溶液即顯紅紫色。所得絡(luò)合物在可見光去具有特征的最大吸收峰（λmax為485～495nm）。地高辛片含量，含量均勻度（限度為20%），溶出度（限度為65%，轉(zhuǎn)籃，100r/min,60min）甲地高辛溶出度測定與地高辛一樣，限度規(guī)定相同。復(fù)習(xí)總結(jié)：腎上腺素類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)本類藥物具烴氨基側(cè)鏈，顯弱酸性，游離堿溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水；分子中具有鄰苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)的藥物可與重金屬離子絡(luò)合呈色，露置空氣中或遇光易氧化，色漸變深，在堿性溶液中更易變色；多數(shù)藥物分子中有手性碳原子，具有光學(xué)活性；苯環(huán)上的取代基也各具特性均可供分析用。鑒別：三氯化鐵反應(yīng)。重酒石酸去甲腎上腺素：翠綠色，加碳酸氫鈉試液，顯藍(lán)色→紅色。鹽酸異丙腎上腺素：深綠色，滴加新制的5%碳酸氫鈉試液，顯藍(lán)色→紅色。重酒石酸去甲腎上腺素：在上述條件下比較穩(wěn)定，幾乎不被碘氧化，需在酒石酸氫鉀的飽和溶液（）中被碘氧化，溶液為五色或僅顯微紅色或淡紫色。甲醛硫酸反應(yīng)：重酒石酸去甲腎上腺素：橙色→暗紫色。去氧腎上腺素：污紫色。腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素和鹽酸異丙腎上腺素均需檢查酮體。酮體在310nm處有最大吸收，而藥物本身在此波長處幾乎沒有吸收。含量測定：非水溶液滴定法。溴量法：鹽酸去氧腎上腺素及其注射液采用此方法測定含量。操作要點(diǎn)：⑴游離溴及碘極易揮散，操作過程中必須防止逸失。⑶為了校正操作中溴及碘的可能逸失，應(yīng)按平行條件進(jìn)行空白試驗(yàn)。初顯黃色，隨即變成橙紅色；滴加水，即成白色乳濁液。本品水溶液遇酸易水解，生成水溶性很小的二苯基甲醇，分散在水層，呈白色乳濁，加熱煮沸數(shù)分鐘，聚集呈油狀液體，放冷，凝成白色蠟狀。紫外特吸收和紅外特征吸收光譜。鹽酸苯海拉明原料藥為鹽酸鹽，在冰醋酸中加醋酸汞后，可定量地與高氯酸生成苯海拉明該氯酸鹽。主要用于鹽酸苯海拉明片劑的含量測定及片劑溶出度的測定。用于鹽酸苯海拉明注射液的含量測定。溶劑：水、氯仿、稀硫酸，指示液：二甲基黃溶劑藍(lán)19混合指示液，滴定液：磺基丁二酸鈉二辛酯試液。片劑含量及溶出度：酸性染料比色法。復(fù)習(xí)總結(jié)：維生素a醋酸酯等吸收法：在λ1的左右各選一點(diǎn)為λ2和λ3,使aλ2=aλ3=6/7aλ1。③雜質(zhì)吸收：對維生素a的測定有影響的雜質(zhì)主要有：維生素a2和維生素a3；維生素a的氧化產(chǎn)物（環(huán)氧化物、維生素a醛和維生素a酸）；維生素a在光照下產(chǎn)生的無生物活性的聚合物鯨醇；維生素a的異構(gòu)體；合成時(shí)產(chǎn)生的中間體。然后在300、31323360nm五個(gè)波長處分別測定吸收值，確定最大吸收波長（應(yīng)為328nm）。計(jì)算：，吸收系數(shù)＝a/cl。標(biāo)示量%＝（ad1900w）/（w100l標(biāo)示量）1u= 1u= 第二法（適用于維生素a醇）說明：⑴維生素a醋酸酯的吸收度校正公式是用直線方程法（即代數(shù)法）推導(dǎo)出來的；維生素a醇的吸收度校正公式是用相似三角形法（幾何法或成6/7定位法）推倒出來。維生素e 維生素e（消旋α生育酚醋酸酯）有天然片和合成品之分，天然品為右旋體（dα）；合成品為消旋體（dlα）。他主要有α、β、γ、δ四種異構(gòu)體，其中以α異構(gòu)體的生理作用最強(qiáng)。具有紫外吸收。在堿性條件下加熱，這種氧化作用更易發(fā)生。⑵水解后氧化反應(yīng)：取本品約10mg，加醇制氫氧化鉀試液2ml，煮沸5min，放冷，加水4ml與乙醚10ml，振搖、靜置使分層，取乙醚液2ml，加2,2’聯(lián)吡啶的乙醇溶液（→100）數(shù)滴和三氯化鐵的乙醇溶液（→100）數(shù)滴，應(yīng)顯血紅色。⑷薄層色譜法。利用游離維生素e的還原性，用硫酸鈰滴定液（）滴定，以二苯胺為指示劑，%。內(nèi)標(biāo)：正三十二烷。維生素b1 結(jié)構(gòu)：維生素b1（鹽酸硫胺）是由氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過央甲基連接而成的季銨化合物，噻唑環(huán)上季銨及嘧啶環(huán)上氨基，為兩個(gè)堿性基團(tuán)，可與酸成鹽。在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。在堿性中遇氧化劑，如鐵氰化鉀，可被氧化為具有熒光的硫色素，后者溶液正丁醇中呈藍(lán)色熒光。鑒別試驗(yàn) ⑴硫色素反應(yīng)方法：取本品約5mg，強(qiáng)力振搖2min，放置使分層，上面的醇層顯強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。再加堿使成堿性，熒光又顯出。硫色素溶于正丁醇（或異丁醇等）中，顯藍(lán)色熒光。中國藥典收載紫外分光光度法 維生素c 結(jié)構(gòu)：維生素c分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇結(jié)構(gòu)和內(nèi)酯環(huán)，且有二個(gè)手性碳原子（cc5），因此不僅使維生素c性質(zhì)極為活潑，且具旋光性。結(jié)構(gòu)遇糖類相似，也具糖的性質(zhì)。c3oh由于受共軛效應(yīng)的影響，酸性較強(qiáng)；c2oh的酸性極弱，故維生素c一般表現(xiàn)為一元酸，能與碳酸氫鈉作用生成鈉鹽。維生素c和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解，因雙鍵使內(nèi)酯環(huán)變得較穩(wěn)定；但在強(qiáng)堿中，內(nèi)酯環(huán)可水解，生成酮酸鹽。鑒別試驗(yàn)： ⑴與硝酸反應(yīng)方法：，加水10ml溶解。原理：維生素c分子中有二烯醇基，具強(qiáng)還原性，可被硝酸銀氧化為去氫維生素c,同時(shí)可產(chǎn)生黑色銀沉淀。取該溶液5ml，加2,6二氯靛酚試液1～2滴，試液的顏色即消失。與抗壞血酸作用后生成還原型的物色的酚亞胺。⑷利用維生素c具糖類性質(zhì)的反應(yīng)維生素c可在三氯醋酸或鹽酸存在下水解、脫羧，生成戊糖，再失水，轉(zhuǎn)變?yōu)榭啡?，加入吡咯，加熱?0℃產(chǎn)生藍(lán)色。含量測定：碘量法：溶劑：水和稀醋酸，指示劑：淀粉。在酸性介質(zhì)中維生素c受空氣中氧的氧化作用減慢，但樣品溶于稀酸后仍需立即進(jìn)行滴定。如片劑，溶解后應(yīng)濾過，取續(xù)濾液測定；注射液測定時(shí)要加2ml丙酮，以消除注射液內(nèi)含有的抗氧劑亞硫酸氫鈉對測定的影響?；窘Y(jié)構(gòu)：分子中都有一個(gè)游離羧基和酰胺側(cè)鏈。其堿金屬鹽易溶于水，而有機(jī)堿鹽難溶于水，易溶于甲醇等有機(jī)溶劑。紫外吸收特性青霉素分子中的母核部分無紫外吸收，但出側(cè)鏈酰胺基上r如具苯環(huán)共軛系統(tǒng)，則有紫外吸收特性。β內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性β內(nèi)酰胺環(huán)是青霉素族結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定的地方，如與酸、堿、青霉素酶、羥胺及某些金屬離子（銅、鉛、汞和銀）等作用時(shí)，易發(fā)生水解和分子重排，導(dǎo)致β內(nèi)酰胺環(huán)的破壞而失去活性。頭孢哌酮：紅棕色；氨芐西林：紫紅色；頭孢氨芐：紅褐～褐色；頭孢噻吩鈉：紅褐色；普魯卡因青霉素：紫紅色；頭孢唑啉鈉：紅棕色。頭孢噻吩鈉：紅棕色；頭孢氨芐：黃色；頭孢噻肟鈉：亮黃色。④與斐林試劑反應(yīng)：本類藥物具有類似肽鍵結(jié)構(gòu)，可產(chǎn)生雙縮脲反應(yīng)。阿莫西林、氨芐西林鈉可采用本法鑒別。⑥與重氮苯磺酸呈色反應(yīng)：頭孢菌素族7位側(cè)鏈含有酚羥基基團(tuán)時(shí)，能與重氮苯磺酸試液產(chǎn)生偶合反應(yīng)，顯橙黃色。⑶沉淀反應(yīng)①在稀酸中生成白色沉淀：青霉素鉀和青霉素鈉加水溶解后，加稀鹽酸2滴，即析出難溶于水的游離基白色沉淀。②有機(jī)胺鹽的特殊反應(yīng) 重氮化偶合反應(yīng)：普魯卡因青霉素水溶液酸化后，顯普魯卡因芳伯氨基的重氮化偶合反應(yīng)，生成偶氮染料紅色沉淀。⑷光譜法①紫外分光光度法 最大吸收波長鑒定法水解產(chǎn)物的最大吸收波長鑒定法 ②紅外吸收光譜 ③核磁共振光譜 ⑸色譜法 ①薄層色譜法 ②高效液相色譜法 含量測定⑴碘量法（芐星青霉素）青霉素或頭孢菌素分子不消耗碘，其降解產(chǎn)物消耗碘。因此試驗(yàn)過程中要嚴(yán)格控制溫度，同時(shí)采用與青霉素標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定，則可抵消上述可變因素的影響。1摩爾青霉素能吸收8摩爾的碘,故本法的靈敏度較高。⑵汞量法（青霉素鈉、青霉素鉀）青霉素分子不與汞鹽反應(yīng)，而其堿性水解產(chǎn)物青霉噻唑酸及繼續(xù)水解生成的青霉胺都能與汞鹽定量反應(yīng)，根據(jù)消耗的汞鹽量可以計(jì)算青霉素的含量。滴定液：硝酸汞。總青霉素的百分含量與降解產(chǎn)物的百分含量之差值即為青霉素的含量。⑶酸堿滴定法（苯唑西林鈉）⑷紫外可見分光光度法 ⑸高效液相色譜法 氨基糖苷類抗生素 雜環(huán)藥物 吡啶類藥物異煙肼的鑒別試驗(yàn)：還原反應(yīng)。加氨制硝酸銀試液1ml，即產(chǎn)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡。異煙肼的酰肼基可以和含羰基的試劑（如芳醛）發(fā)生縮合反應(yīng)。沉淀反應(yīng)。異煙肼和氯化汞可生成白色沉淀。尼克剎米的鑒別：戊烯二醛反應(yīng)。尼克剎米分子中的吡啶環(huán)與溴化氰反應(yīng)，開環(huán)形成戊烯二醛的衍生物，再與苯胺縮合，形成黃色的希夫氏堿。與苯胺縮合形成