20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—大鼠(rat)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vegf)-newa-展示頁(yè)
2024-11-17 22:21本頁(yè)面
【正文】 生長(zhǎng)因子（VEGF）呈正相關(guān)。樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。3. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。結(jié)果判斷 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn)，按曲線(xiàn)方程計(jì)算各樣本濃度值。2. 靈敏度： pg/mL。4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。6. 有效期：6個(gè)月免責(zé)聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor (VEGF) ELISA Kit instructionIntended useThis VEGF ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of VEGF in the sample, this VEGF ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus VEGF concentration. The concentration of VEGF in the samples is then
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