20xx人教版高中生物選修一52多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段-展示頁
2024-12-21 14:55本頁面
【正文】 序列，就需要一定量的 DNA片段。 專題 5 DNA 與蛋白質(zhì)技術(shù) 課題 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增 DNA 片段 一、【 課題目標(biāo)】 （一）知識(shí)與技能 了解 PCR技術(shù)的基本操作 理解 PCR的原理 討論 PCR的應(yīng)用 （二）過程與方法 在多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增 DNA片段的實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)避免外源 DNA污染，嚴(yán)格控制溫度等反應(yīng)條件 （三）情感、態(tài)度與價(jià)值觀 通過對(duì) PCR實(shí)驗(yàn)的操作及結(jié)果分析，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和實(shí)事求是的科研精神 二、【 課題重點(diǎn)】 PCR的原理和 PCR的基本操作 三、【 課題難點(diǎn)】 PCR的原理 四、【 教學(xué) 方法】 啟發(fā)式教學(xué) 五、【 教學(xué)工具】 多媒體課件 六、【 教學(xué)過程】 （一）引入新課 在現(xiàn)代生物技術(shù)中， DNA技術(shù)可謂是尖端技術(shù)。人類基因組計(jì)劃、基因工程、基因診斷、基因檢測、古生物鑒定等都離不開對(duì) DNA分子堿基序列的分析。怎樣迅速獲得足夠量的 DNA片段呢？今天我們來研究學(xué)習(xí) DNA分子的擴(kuò)增技術(shù)―― PCR技術(shù)。 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的反向平行結(jié)構(gòu)： （ 2） DNA的復(fù)制過程 : 解 旋：解旋酶、 ATP， DNA兩條鏈打開，形成兩條 DNA單鏈。 DNA聚合酶結(jié)合： 子鏈合成： DNA聚合酶從引物 3’端開始，將配對(duì)的脫氧核苷酸連接起來。先導(dǎo)鏈，滯后鏈） 子鏈合成特點(diǎn)：不能從頭合成；合成方向?yàn)椤?5’→ 3’合成”。它在每引入一個(gè)核苷酸后都要復(fù)查一次，只有堿基配對(duì)無誤后才能繼續(xù)往下聚合，它不能從頭合成。 ［思考］ DNA分子能準(zhǔn)確復(fù)制的原因有哪些？ DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)提供模板；堿基互補(bǔ)配對(duì)； DNA聚合酶的復(fù)查功能。 1． 3DNA分子復(fù)制的人工控制 解開螺旋：在 80～ 100℃時(shí)， DNA雙螺旋打開 ，形成兩條 DNA單鏈，稱為變性。 復(fù)制條件： 緩沖液 ,DNA模板 ,四種脫氧核苷酸 ,熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 ,兩種引物。 ［思考］緩沖液相當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的什么成分？（核基質(zhì)） 4． PCR的反應(yīng)過程 變性：在 95℃時(shí) DNA解旋 復(fù)性：在 50℃時(shí)引物與 DNA單鏈結(jié)合 延伸：在 72℃時(shí)合成 DNA子鏈（兩個(gè)引物間的序列） 2．實(shí)驗(yàn)操作 2． 1 PCR反應(yīng)體系：緩沖液
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