【正文】 致命危險及有效的防止實驗室感染方法、用一般的微生物操作坊法能否防止實驗室感染、我國有否此種及曾否引起流行和人群免疫力等情況）。*2004 強毒微生物操作區(qū)是否與相鄰區(qū)域保持相對負壓，是否有獨立的空氣凈化系統(tǒng)，排出的空氣是否循環(huán)使用。2．有些活疫苗所采用的生產(chǎn)用菌、毒種的生物學特性相接近，且其生產(chǎn)工藝及所用培養(yǎng)基或細胞基質(zhì)相接近（例如麻疹、風疹、腮腺炎疫苗），需要在同一車間進行交替生產(chǎn)時，必須在一種活疫苗生產(chǎn)、灌封完成后，進行有效的消毒和清潔，清潔消毒效果經(jīng)驗證證明是徹底的、可靠的，然后才能在該生產(chǎn)車間進行后一種活疫苗的處理。1．不同種類的細菌活疫苗和不同種類的病毒活疫苗，不允許同時在同一生產(chǎn)車間進行生產(chǎn)。 生產(chǎn)用菌、毒種、與非生產(chǎn)用菌、毒種； 生產(chǎn)用細胞與非生產(chǎn)用細胞； 強毒與弱毒的菌、毒種； 死毒與活毒的細菌原液和病毒原液； 脫毒前與脫毒后的制品； 減毒活疫苗與滅活疫苗； 預防用生物制品、基因重組制品的種子三級批； 原液、半成品和成品2． 血液制品各工序中間品要專庫保存。血漿的分離提取要在低溫乙醇反應罐內(nèi)進行，細菌及病毒疫苗的純化宜在2~8攝氏度進行，重組產(chǎn)品的過濾、純化、提取應在2~8 攝氏度冷柜內(nèi)進行。生物制品的成品只有存放于上述規(guī)定的溫度下才能保持其固有生物活性，才能避免污染。[解釋說明]因為生物制品是采用天然或基因工程等人工改造手段而獲得的微生物細胞及各種動物和人源組織、液體為原材料制備的，這些材料與無機物不一樣，都是生物活性物質(zhì)，其成分含有豐富的蛋白質(zhì)、酶、血漿等營養(yǎng)物質(zhì)，因此菌種一般在2~8攝氏度保存；不同病毒的菌種，有的可在40攝氏度~70攝氏度保存，有的要在液氮存放；細胞要凍于130攝氏度以下；血液制品的原料血漿需在20攝氏度以下冰凍保存等等。由于血液制品使用人血漿作原料，可能存在經(jīng)血液傳播疾病的潛在危險性，從而影響其他產(chǎn)品，反之，其他各類制品也可能對血液制品有用現(xiàn)行的檢驗方法無法鑒別或檢出的潛在影響。6． 血液制品生產(chǎn)車間與疫苗、抗血清制品不能共用，其生產(chǎn)廠房必須為獨立的建筑物。毒素經(jīng)加入一定量甲醛或其他適宜脫毒劑，在規(guī)定溫度和時間內(nèi)，將毒素脫去毒性，變成為類毒素，類毒素失去羅勒毒素的致病性，但保存相應抗原性和免疫原性。第一階段，將產(chǎn)毒素菌株（如破傷風梭菌、白喉桿菌等）在其適宜條件下進行繁殖培養(yǎng)，使其生產(chǎn)出大量外毒素。5． 類毒素生產(chǎn)的有毒活素性階段與脫毒后脫去毒素性階段的兩個生產(chǎn)操作區(qū)域在車間布局及空調(diào)凈化系統(tǒng)等方面都是必須嚴格分開的，不允許在同一生產(chǎn)區(qū)域，既生產(chǎn)脫毒前制品，又生產(chǎn)脫毒后制品。制備出的細菌原液或病毒原液以及使用過 的培養(yǎng)設備和器材含有大量的活細菌或活病毒體，稱之為“活毒”(Live Microorganism)，這些活培養(yǎng)物具有致病性，必須在規(guī)定的相互獨立的潔凈區(qū)生產(chǎn)區(qū)進行制備。死毒與活毒是指用強毒的細菌或病毒株制備滅活疫苗的兩個生產(chǎn)階段。一般生產(chǎn)減毒活疫苗所用毒力弱的菌株及病毒株為弱毒株或減毒株（Attenuated Strain）。一般生產(chǎn)滅活疫苗所用毒力強的菌株及病毒株為強毒株（Strong Toxixity Strain）。強毒與弱毒是指用于生產(chǎn)的細菌或病毒株，為毒力和致病力截然不同的兩類菌、毒株。2． 如該疫苗生產(chǎn)車間或重組產(chǎn)品生產(chǎn)車間，需交替生產(chǎn)不同制品，必須進行有效清潔、消毒和驗證后，后一種制品生產(chǎn)用的菌種或毒種或生產(chǎn)用細胞才能進入車間。生產(chǎn)用菌、毒種和細胞須經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理部門批準，除此之外的其他菌、毒種及細胞，均為非生產(chǎn)用菌、毒種及細胞。*2201 生產(chǎn)用菌毒種與非生產(chǎn)用菌毒種、生產(chǎn)用細胞與非生產(chǎn)用細胞、強毒與弱毒、死毒與活毒、脫毒前與脫毒后的制品和活疫苗與滅活疫苗、人血液制品、預防制品等加工或灌裝是否同時在同一生產(chǎn)廠房內(nèi)進行。因此，對生物制品生產(chǎn)企業(yè)“全體人員”，特別是進入省查車間，有可能接觸感染材料的人員，必須進行相應生物安全防護教育和培訓，務必使進入生產(chǎn)車間或檢驗室的所有人員，了解什么地方有感染危險存在、接觸后如何消毒處理、如何處理突發(fā)事故（如：感染行為、生物傾斜、接觸人體、濺入眼內(nèi)等），以確保生產(chǎn)和人員安全。2．“全體人員”，除進行專業(yè)培訓外，還必須進行安全防護培訓。1．生物制品生產(chǎn)企業(yè)人員均進行專業(yè)培訓。實踐經(jīng)驗的多與少，也不能僅看從事工作的年限，關鍵在于學習和掌握的程度，學以致用，學習和掌握了相應專業(yè)知識是手段，最終目的是運用學習和掌握i的專業(yè)知識和實踐經(jīng)驗，確保在生產(chǎn)、質(zhì)量管理 中發(fā)現(xiàn)問題和解軍問題。2． 本項規(guī)定應具備的相應專業(yè)知識，也不可機械地局限到一個人所學的具體專業(yè)學科。生物制品是應用普通的或以基因工程（Genetic Engineering）、細胞工程（Cell Engineering）、蛋白質(zhì)工程（Protein Engineering）、發(fā)酵工程（Fermentation Engineering）等生物技術獲得的微生物（細菌、噬菌體、立克次體、病毒、寄生蟲等）、細胞及各種動物和人源的組織和體液等生物材料制備，其制備過程是生物學過程和無菌操作過程，并用于預防、治療、診斷疾病的藥品。1． 主管生物制品生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)和質(zhì)量管理的企業(yè)負責人應具備醫(yī)藥及生物學等方面的專業(yè)知識和實踐經(jīng)驗才能確保其在生產(chǎn)、質(zhì)量管理中履行職責。第一篇：藥品GMP檢查指南(生物制品)一．機構與人員[檢查要點]藥品生產(chǎn)和質(zhì)量管理的組織機構對做好藥品生產(chǎn)全過程監(jiān)控至關重要；適當?shù)慕M織機構及人員配備是保證藥品質(zhì)量的關鍵因素；人員的職責必需以文件形式明確規(guī)定；培訓是實施藥品GMP工作中的重要環(huán)節(jié)。0402 生物制品生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)和質(zhì)量管理負責人是否具有相應得專業(yè)知識（細菌學、病毒學、生物學、分子生物學、生物化學、免疫學、醫(yī)學、藥學等），并具有豐富的實踐經(jīng)驗以確保在其生產(chǎn)、質(zhì)量管理中履行其職責。生物制品是藥品的一大類別。我國目前生產(chǎn)和使用的生物制品有200多種，各生物制品生產(chǎn)企業(yè)所生產(chǎn)的品種各不相同，基于生物制品起始原輔材料、生產(chǎn)制備過程及質(zhì)量控制等的固有特性，細菌類或病毒類疫苗（包括毒素、類菌素、抗毒素及抗血清等）生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)和質(zhì)量管理負責人應具備細菌學或病毒學、生物化學、分子生物學、免疫學、流行病學等方面的專業(yè)知識；細胞因子及其他活性生物制劑生產(chǎn)企業(yè)，應具備生物化學、免疫學、分子生物等方面的專業(yè)知識；DNA產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)，應具備現(xiàn)代生物技術、分子生物學、遺傳學、免疫學等方面的專業(yè)知識；體內(nèi)及體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)應具備生物學、免疫學、生物化學等方面的專業(yè)知識；血液制品生產(chǎn)企業(yè)，應具備生物化學、分析生物學、病毒學等方面的專業(yè)知識。例如：醫(yī)學、藥學、生物學專業(yè)的，通過學習和培訓可以過得和掌握分子生物學、細菌學、病毒學、免疫學等方面的專業(yè)知識和實踐經(jīng)驗；化學或其他學科專業(yè)的通過學習和培訓同樣可以獲得和掌握生物學、分子生物學和微生物學等專業(yè)知識和實踐經(jīng)驗。0702 從事生產(chǎn)制品制造的全體人員（包括清潔人員、維修人員）是否根據(jù)其生產(chǎn)的制品和所從事的生產(chǎn)操作進行專業(yè)（衛(wèi)生學、微生物學等）和安全防護培訓?！叭w人員” 不僅包括所有從事制品生產(chǎn)和質(zhì)量檢驗操作的生產(chǎn)、質(zhì)量檢驗人員，也包括進入車間和在實驗室從事清潔及維修工作的所有清潔、維修人員和其他輔助人員，還包括進入車間和實驗室調(diào)查、監(jiān)督及處理問題的企業(yè)領導及其相應部門管理人員，以上人員都必須接受培訓，了解和熟悉該企業(yè)所生產(chǎn)制品的基本特性和注意事項。有些生物制品是采用天然的或人工改造的微生物（包括細菌、病毒等）或動物及人源組織、體液為起始材料，這些生物活性材料，如不按規(guī)定進行特定操作和處理，對接觸者有一定的感染危險性，甚至危及其生命健康，還可能污染環(huán)境，嚴重的可造成重大的災難性事故。二．廠房與設施[檢查要點]藥品生產(chǎn)的廠房與設施是實施藥品GMP的先決條件，其設計布局和建造應能有效避免交叉污染和差錯事故，便于清潔及日常維護。本項所舉的生物制品生產(chǎn)中涉及到的專業(yè)術語均有特定含義，而且又是關系到高危致病因子的安全生產(chǎn)和防護的重大問題，必須明確該項規(guī)定的具體要求：1． 凡用于疫苗、毒素、類毒素、抗毒素、抗血清、DNA重組產(chǎn)品等生產(chǎn)用菌種、毒種、工程菌種、細胞、工程細胞均為生產(chǎn)用菌、毒種和細胞。為了確保生產(chǎn)的安全、有效，只有經(jīng)檢定符合要求并經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理部門批準的上述生產(chǎn)用菌、毒種及細胞才能進入生產(chǎn)車間，其他非生產(chǎn)用菌、毒種及細胞一律不得進入生產(chǎn)車間。3． 強毒細菌及病毒株與弱毒細菌及病毒株，決不允許混放在一起，亦不允許同時在同一實驗室內(nèi)進行檢定實驗，更不允許在同一生產(chǎn)車間內(nèi)進行強毒和弱毒的疫苗生產(chǎn)制備。例如：用于生產(chǎn)乙型腦炎滅活疫苗是采用從自然界分離的毒力強、能使人致病、抗原性好的乙型腦炎病毒株制備，經(jīng)甲醛或其他滅活劑殺死活病毒制成滅活疫苗。乙型腦炎減毒活疫苗，是采用人工減毒，并證明其殘留致病力很* 2202低，毒力穩(wěn)定并保留自然相應免疫原性的乙型腦炎減毒疫苗株來制備生產(chǎn)疫苗。4． 疫苗生產(chǎn)的活生物體階段與滅活后死生物體階段的生產(chǎn)操作區(qū)在車間布局時必須嚴格分開，決不允許在同一生產(chǎn)區(qū)域既生產(chǎn)“活毒”，又生產(chǎn)“死毒”。滅活疫苗生產(chǎn)時，第一階段是采用從自然界分離的毒力強、抗原性好的強毒細菌菌株或病毒株進行大規(guī)模培養(yǎng)制備。在第二階段，細菌原液或病毒原液收獲后加入一定量甲醛或其他適宜滅活劑，在規(guī)定溫度和時間內(nèi)將活細菌或活病毒全部殺死，變成對人體安全、不含活生物體的死菌液或死病毒液，稱之為“死毒”（Inactive Microorganism）。脫毒前和脫毒后是指類毒素的不同生產(chǎn)階段。毒素對人體是有致病性的，這一生產(chǎn)階段稱之為“脫毒前”。對人體安全的類毒素稱之為“脫毒后”。血液制品（Blood Products）是由健康人血漿或特異免疫人血漿分離、提取得血漿蛋白組分或血細胞組分制品，有人血白蛋白、人血免疫球蛋白、人凝血因子（天然或重組的）、紅細胞濃縮物等。生產(chǎn)用菌毒種與非生產(chǎn)用菌毒種、生產(chǎn)用細胞與非生產(chǎn)用細胞、強毒與弱毒、死毒與或毒、脫毒前與脫毒后的制品和活疫苗與滅活疫苗、人血液制品、預防制品等貯存是否嚴格分開。不同生物制品的中間體（包括原液及半成品），血液制品的不同組成都分別規(guī)定有其適宜存放溫度。在生物制品生產(chǎn)過程中，除細菌、病毒和細胞培養(yǎng)一般需要在35~37攝氏度外，其余操作制備過程，各種制品還有各自規(guī)定的最適的溫度。1． 為確保生物制品生產(chǎn)的安全有效性，避免造成差錯或重大事故，要求以下各項貯存要嚴格分開，不允許混合貯存。* 2203 不同種類的活疫苗的處理，灌裝是否彼此分開。無論是細菌類減毒活疫苗（如：卡介苗、鼠疫活疫苗、炭疽活疫苗等），還是病毒類減毒活疫苗（如：麻疹活疫苗、脊髓灰質(zhì)炎活疫苗、風疹活疫苗等），在 生產(chǎn)制備全過程中（生產(chǎn)用菌種或毒種啟開復蘇擴增培養(yǎng)發(fā)酵罐培養(yǎng)或轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)菌液或病毒液收集細菌原液或病毒原液配制貯存灌封真空冷凍干燥等）都是處于活生物體狀態(tài)（即都含有大量的活細菌或病毒），并且這些活疫苗在規(guī)模化生產(chǎn)制備過程中，所生產(chǎn)出的減毒活細菌數(shù)量或病毒數(shù)量是極其巨大的，因此，不允許同時在同一生產(chǎn)車間進行生產(chǎn)。3．本項中所說“活疫苗處理”的“處理”，是指各種類減毒活疫苗、菌苗的生產(chǎn)制備全過程。1．“強毒微生物”是指在我國衛(wèi)生部頒布的《中國醫(yī)學微生物菌種保藏管理辦法》中規(guī)定的“一類、二類”菌種和毒種。依其危險程度的大小，我國的菌種分為四類。如：鼠疫耶爾森氏菌，霍亂弧菌（包括EItor弧菌）；天花病毒、黃熱病毒（野毒株）、新疆出血熱（克里米亞剛果出血熱）病毒、東、西方馬腦炎病毒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒、拉沙熱（Lassa）病毒、馬堡（Marburg）病毒、埃波拉（Ebola）病毒、猴皰疹病毒（猴B病毒）；粗球孢子菌、莢膜組織胞漿菌、杜波氏組織胞漿菌。如：土拉弗朗西絲氏菌、布氏菌、炭？芽胞菌、肉毒梭菌、鼻疽假單胞菌、類鼻疽假單胞菌、麻風分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌；狂犬病病毒（街菌），森林腦炎病毒，流行性出血熱病毒，國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)病人，在國外引起腦脊髓炎及出血熱的俄其他蟲媒體病毒，登革熱病毒，甲、乙型肝炎病毒；各種立克次體（包括斑疹傷寒、Q熱）；鸚鵡熱、鳥疫衣原體、淋巴肉芽腫衣原體；馬納青霉菌、北美芽生菌、副球孢子菌、新型隱球菌、巴西芽生菌、煙曲霉，著色霉菌。如：腦膜炎奈瑟氏菌、肺炎鏈球菌、葡萄狀球菌、鏈球菌、淋病奈瑟氏菌及其他致病性奈瑟氏菌，百日咳博特氏菌、白喉棒桿菌及其他致病性棒桿菌、流感嗜血桿菌、沙門氏菌，志賀氏菌、致病性大腸埃希氏菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌、空腸彎曲菌、副溶血性弧菌、變形桿菌，李斯特氏菌、銅綠色綠膿假單胞菌氣腫疽梭菌、生產(chǎn)莢膜梭菌、破傷風梭菌及其他致病梭菌；鉤瑞螺旋體、梅毒螺旋體，雅司螺旋體；乙型腦炎病毒、腦心肌炎病毒、淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒以及未列入一、二類的其他蟲媒病毒、辛德畢斯（Sindbis）病毒、濾泡性口炎病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、腺病毒、柯薩基（A及B組）病毒、艾柯（ECHO）病毒及其他腸道病毒、皰疹類病毒（包括單純皰疹、巨細胞、EB病毒、水痘病毒）、狂犬病固定毒、風疹病毒；致病性支原體；黃曲毒，雜色曲毒，梨孢鐮刀菌、蛙類霉毒、放線菌屬、奴卡氏菌屬、石膏樣毛癬菌（粉型）、孢子絲菌。（5）對通過分子生物學方法生產(chǎn)的新菌株，應按其原始親本中的最高類別對待。2．第一類和二類“強毒微生物”，實驗室感染機會多，感染后發(fā)病的可能性大癥狀重，并可能危及生命名，是對人群危害性較大的傳染病的菌、毒種。（1）該操作實驗室可與其他用途房屋設在一棟建筑物中，但必須自成一區(qū)；該區(qū)通過適當措施與公共走廊或公共部分隔離。（3）生產(chǎn)一類及二類強毒的操作間安裝II級或II級以上生物安全柜，一類及二類強毒微生物操作在上午安全柜內(nèi)進行。（5）如需送至生物安全防護區(qū)外進行焚燒的污物和廢棄物須放置于密封袋，并裝入密閉容器內(nèi)直接送至焚燒爐內(nèi)焚燒。（7）生物安全防護操作區(qū)的通風空調(diào)系統(tǒng)應為直排系統(tǒng)，不得采用部分回風循環(huán)系統(tǒng)。（9）操作區(qū)送風應經(jīng)過初、中、高三級過濾。（11）生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾或滅活處理的空氣可通過系統(tǒng)排風管直接排至大氣中。*