【正文】 ................................ 9 催芽 .......................................................................................................... 9 染毒 .......................................................................................................... 9 固定 .......................................................................................................... 9 解離 .......................................................................................................... 9 染色 .......................................................................................................... 9 制片 .......................................................................................................... 9 鏡檢計(jì)數(shù) ................................................................................................. 10 照相 ........................................................................................................ 10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) .......................................................................................................... 10 3 結(jié)果與分析 ............................................................................................................ 12 磷在錳的脅迫下對蠶豆根尖細(xì)胞分裂指數(shù)與染色體畸變率的影響 ...................... 12 蠶豆根尖的細(xì)胞染色體畸變的主要形態(tài) ............................................................. 16 4 總結(jié)與展望 ............................................................................................................ 18 磷在錳的脅迫下對蠶豆根尖細(xì)胞分裂指數(shù)的影響 ................................................ 18 磷在錳的脅迫下對蠶豆根尖細(xì)胞染色體畸變率的影響 ........................................ 18 展望 ................................................................................................................. 18 參考文獻(xiàn) ...................................................................................................................... 20 附錄 A：圖版 ............................................................................................................... 22 附錄 B： 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) ...................................................................................................... 25 致謝 .............................................................................................................................. 28 攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 緒論 1 1 緒 論 課題背景 引言 攀枝花是一個(gè)以攀鋼集團(tuán)為龍頭企業(yè)的重工業(yè)城市，近年來由于重工業(yè)的不斷發(fā)展雖然帶來了可觀的經(jīng)濟(jì)效益，但是同時(shí)也帶來了嚴(yán)重的環(huán)境污染，而錳、鎘、汞等重金屬則是造成環(huán)境污染最重要的因素之一。說明在該實(shí)驗(yàn)條件下，有絲分裂指數(shù)和染色體畸變率與該復(fù)合 培養(yǎng)液有明顯的劑量 —— 效應(yīng)關(guān)系。用一定的錳濃度與 不同濃度的磷復(fù)合處理蠶豆根尖，然后鏡檢觀察蠶豆根尖細(xì)胞染色體畸變情況。 攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 磷在錳的脅迫下 對蠶豆根尖有絲分裂的影響 院（系）： 生物與化學(xué)工程學(xué)院 年級(jí)專業(yè)： 20xx 級(jí)生物工程班 二〇一三年六月 攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 摘要 II 摘 要 本課題為探究磷在錳的脅迫下對蠶豆根尖有絲分裂的影響。分別由氯化錳和磷酸二氫鉀提供錳素與磷素。 結(jié)果表明當(dāng)用 2mmol/L 的錳分別與 13mmol/L、 、 、 ，在該實(shí)驗(yàn)條件下蠶豆根尖細(xì)胞平均有絲分裂指數(shù)呈現(xiàn)先增后減的趨勢，在磷濃度為‰ ；而平均染色體畸變率呈現(xiàn)先減后增的趨勢，磷濃度為 ％。 關(guān)鍵詞： 蠶豆、細(xì)胞分裂指數(shù)、染色體畸變率、 KH2PO MnCl2 攀枝花學(xué)院本科畢 業(yè)設(shè)計(jì)（論文） ABSTRACT III ABSTRACT This paper explores the phosphorus mitogenic in manganese stress effects on mitosis of Vicia faba root tip. By Mn2Cl﹒ 4H2O and KH2PO4 with manganese and phosphorus. Manganese concentration with different concentrations of phosphorus pound treatment of Vicia faba root tip, and observing the chromosome aberration in root tip cells of Vicia faba by microscope. The result shows that, when using the 2mmol/L manganese phosphorus concentration pound treatment with 13mmol/L, , , , , obtained by three parallel experiment: Under the experimental conditions， the average mitotic index of Vicia faba root tip cell increased firstly and then decreased, the phosphorus concentration for ‰ was highest。而環(huán)境中的重金屬，特別是錳的含量越來越高，其毒 性已引起人們的普遍重視。重金屬錳進(jìn)入環(huán)境后不能被微生物降解，大部分累積于土壤中，在很長一段時(shí)間內(nèi)可以被植物吸收。大量的錳可對植物產(chǎn)生毒害作用，它能阻礙植物的生長，降低光合作用，減少蒸騰作用和水分的吸收，還能引起銅的缺乏。 重金屬污染將導(dǎo)致一定程度的生 態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。目前已有的幾類重金屬污染的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)方法 ： 包括概念模型法、數(shù)學(xué)模型法、指數(shù)法、形態(tài)分析法、植物培養(yǎng)法等。 重金屬污染與修復(fù)的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展 重金屬污染是指重金屬對環(huán)境造成的污染。由于不同的重金屬具有各種不同的性質(zhì)，以及不同的密度形態(tài) [2]，因此不同的重金屬對環(huán)境的污染程度是不同的。最近幾十年來，隨著工業(yè)與農(nóng)業(yè)的不斷發(fā)展帶來社會(huì)經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展的同時(shí)，大量不同種類的重金屬也依靠地表徑流、大氣沉降、垃圾轉(zhuǎn)移等各種不同的途徑進(jìn)入河流與湖泊，累計(jì)到土壤等， 分別對生態(tài)環(huán)境造成了不同程度的毒害。因此怎樣才能有效的減少與緩解重金屬的污染、以及重金屬對生態(tài)環(huán)境與生物體的危害，成為了當(dāng)今環(huán)境難題之一 [3]。但是隨著現(xiàn)在目前城市化的快速發(fā)展，也形成了許多特有的污染來源 [4]。主要通過以下三個(gè)途徑來污染環(huán)境。而農(nóng)藥中則含有大量的重金屬，大面積的使用不只是導(dǎo)致農(nóng)藥殘留物的積累，同時(shí)也引起土壤中大量重金屬污染的問題；其次則是運(yùn)用污水灌溉農(nóng)田。雖然帶來了一些效益，但是同時(shí)也造成了一定的環(huán)境污染。雖然污泥中的大量營養(yǎng)元素得到了充分的利用，但是其中的重金屬也帶來了嚴(yán)重的環(huán)境問題。總之，重金屬通過各種各樣的方式不斷的積累，最終導(dǎo)致嚴(yán)重的環(huán)境問題?；瘜W(xué)修復(fù)就是通過加入一些化學(xué)材料，利用其與重金屬發(fā)生沉淀反應(yīng)等的特點(diǎn)來緩解重金屬污染的方法。目前這方面的研究在國內(nèi)外均有報(bào)道，李培軍等人 [5]等人利用菌根來吸收與固定重金屬 Mn、 Fe、 Zn、 Cu 已經(jīng)取得了較好的效果；熱處理法就是利用熱處理技術(shù)將重金屬從土壤中解吸處理的一門修復(fù)技術(shù)，這主要應(yīng)用于Hg 的處理；淋洗絡(luò)合法就是運(yùn)用淋洗劑將土壤中的固相重金屬變?yōu)橐合?，進(jìn)而達(dá)到修復(fù)的目的。生物修復(fù)則是通過某些特定的微生物或者是植物來吸收或者是轉(zhuǎn)化重金屬的一種修復(fù)技術(shù)。 錳污染現(xiàn)狀 錳是一種化學(xué)元素，錳的英文名為 Manganese。 錳廣泛的分布在地殼中，而很早就被人們熟知和利用的則是軟錳礦，因此錳礦的開采已有很久的歷史。在目前隨著工業(yè)的快速發(fā)展，這方面的問題更是嚴(yán)重，急需一個(gè)攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 緒論 3 解決問題的辦法。人體中的錳有多種渠道來源，認(rèn)真考慮到錳對人體的健康可能造成的危害以及對環(huán)境污染的嚴(yán)重性和普遍性，其研究已經(jīng)成為了一個(gè)重點(diǎn)。錳在空氣中達(dá)到 500ug/m3就可能引起錳中毒。 攀枝花屬長江水系，是其上游的第一城，金沙江水系與雅礱江水系在此交匯。在礦山企業(yè)快速發(fā)展的今天，同時(shí)也帶來 了大量的污染。另外佟洪金等 人 [8]還 選擇了攀枝花地區(qū)蘭家壩火山礦與尖山壩的排土場、采礦區(qū)以及西區(qū)西沙的堆渣場與馬家田尾礦庫作為研究對象，分析了排土場、采礦區(qū)與尾礦庫的土壤中 Mn、 Cu、 Zn、 Cd、Pb、 Ni、 Cr 重金屬含量，并且對該地區(qū)的土壤污染程度做出了評(píng)價(jià)。 而變異系數(shù)的大小則反應(yīng)了其人為干擾因數(shù)的大小，越大則說明人為干擾越是強(qiáng)烈。 進(jìn)幾年來隨著錳產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，帶來的污染也是越來越嚴(yán)重。其電解錳帶來的高毒性，高污染以及難以處理和衰變的錳屎就像他的產(chǎn)業(yè)一樣吸引人的注意。在 20xx年因其產(chǎn)生對三地周邊環(huán)境的污染問題極度的嚴(yán)重，曾經(jīng)引起了國家高層領(lǐng)導(dǎo)的高度重視。當(dāng)時(shí)錳工業(yè)污染問題成為了高層關(guān)注的話題。汪明華等人 [10]也對錢塘江的錳污染的形成原因進(jìn)行過相關(guān)的調(diào)查，認(rèn)為造成錢塘江水域錳污染的主要原因?yàn)槠髽I(yè)污水以及污水處理廠的污水排放。葉綠體在光合作用的過程當(dāng)中，錳可 也在快速的發(fā)展，與此同時(shí)，可能隨之帶來大量的環(huán)境問題。 錳在植物體內(nèi)的生理作用以及對其毒害的研究現(xiàn)狀 在植物體維持正常的生命活動(dòng)方面，錳是一種必不可少的微量元素，因此錳也是植物體的生命元素之一。因此錳在植物體內(nèi)必須維持一個(gè)正常量，過低則導(dǎo)致低錳脅迫、過高則導(dǎo)致高猛脅迫，都會(huì)對植物體產(chǎn)生毒害作用。 錳作為酶的一種活化劑，很少有特異性，只有在少數(shù)酶活化對于 Mn 離子具有高度的專一性，因此錳通常被其他的二價(jià)離子或者是錳離子代替 [12]。如果是植物體內(nèi)的錳過多，則光氧化所產(chǎn)生 Mn3 + 較多，將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的成分氧化過度而出現(xiàn)相應(yīng)的缺綠癥狀；錳在植物體的光合作用中