免疫組織化學(xué)技術(shù)研討-展示頁(yè)
2025-01-30 04:22本頁(yè)面
【正文】 腐敗，以保持組織細(xì)胞 的固有形態(tài)。 免疫組織化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué) 技術(shù)技術(shù)n 基本原理基本原理 通過免疫學(xué)中抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，用特異性抗體（通過免疫學(xué)中抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，用特異性抗體（單克隆或多克?。z測(cè)組織、細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原物質(zhì)，形單克隆或多克?。z測(cè)組織、細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原物質(zhì)，形成抗原成抗原 — 抗體復(fù)合物；此復(fù)合物上帶有事先標(biāo)記的標(biāo)記抗體復(fù)合物；此復(fù)合物上帶有事先標(biāo)記的標(biāo)記物，通過與標(biāo)記物相對(duì)應(yīng)的檢測(cè)系統(tǒng)，如酶底物顯色反應(yīng)物，通過與標(biāo)記物相對(duì)應(yīng)的檢測(cè)系統(tǒng)，如酶底物顯色反應(yīng)可使之呈現(xiàn)某種顏色，從而可檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的抗原，以可使之呈現(xiàn)某種顏色，從而可檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的抗原，以達(dá)到診斷、鑒別診斷和研究的目的。達(dá)到診斷、鑒別診斷和研究的目的。 （ 2） 使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖和酶等各種抗原成份轉(zhuǎn)變成不溶 性物質(zhì)，以保持它原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿。 （ 3） 使組織中的各種物質(zhì)沉淀和凝固起來而產(chǎn)生不同的折射率，造 成光學(xué)上的差異，以便染色后易于鑒別和觀察。 （ 5） 防止細(xì)胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu)。組織材料的固定n 固定液的選擇：(1)甲醛固定液： 10％福爾馬林， 10％中性福爾馬林， 10％中 性緩沖福爾馬林(2)4％多聚甲醛固定液(3)Bouin S液及改良 Bouin S液(4)Zenker S液(5)Zamboni S液 (6)PLP固定液：過碘酸 賴氨酸 多聚甲醛固定液。(7)PLPD固定液 取 PLP固定液 25ml，加入 %重鉻酸 25ml。(10)PEG液(11)%對(duì)苯醌(12)碳二亞酰胺 戊二醛（ ECGG）液(13)丙酮及醇類固定劑n 固定時(shí)間： 固定時(shí)間要視組織塊的厚薄，固定液的種類及濃度，溫度而定，原則上，組織塊大小與固定時(shí)間成正比，固定液的穿透力及濃度與固定時(shí)間成反比。n 小組織： 75％乙醇 30min， 85％乙醇 30min， 95％乙醇 Ⅰ1h 、 Ⅱ1h 、 Ⅲ 過夜或 2h，無水乙醇 Ⅰ 、 Ⅱ和 Ⅲ 各 30min，二甲苯 Ⅰ15min 、 Ⅱ10min 、 Ⅲ10min（肉眼觀察），石蠟 Ⅰ30min ，石蠟 Ⅱ30min ，石蠟Ⅲ1 ～ 2h。n 切片粘合劑的使用：（ 1）多聚賴氨酸（分子量 300KD）： %濃度。 （ 3）鉻礬明膠液：鉻礬 明膠 5g H2O2 1000ml （ 4）甲醛明膠液： 40％甲醛 明膠 H2O2 100mln 切片： 石蠟切片： (1)連續(xù)切片按序貼在玻片的下 1/3。 (3)切片厚 2～ 4μ m。 (2)冰凍切片后需涼干后立即固定 (3)冰凍切片固定后 80℃ 保存?zhèn)溆眉?xì)胞爬片制作n 將處理好的蓋玻片
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