第三章酶的生產(chǎn)-展示頁(yè)
2025-01-12 13:41本頁(yè)面
【正文】 生物，確保酶生產(chǎn)和應(yīng)用的安全。 1949年細(xì)菌發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶 上個(gè)世紀(jì) 70年代以來(lái)利用植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)酶。退出Enzyme Engineering酶工程退出第三章 酶的生產(chǎn)制備 酶的生產(chǎn)方式 : 植物、動(dòng)物、微生物退出退出生物合成法： 利用植物、動(dòng)物、微生物細(xì)胞合成。 上個(gè)世紀(jì) 50年代起利用微生物生產(chǎn)酶。 木瓜細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)木瓜蛋白酶和木瓜凝乳蛋白酶 人黑色素瘤細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)血纖維蛋白溶酶原激活劑退出動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)的特殊性： 細(xì)胞比微生物細(xì)胞大得多，體積大幾千倍，對(duì)剪切力敏感，動(dòng)物細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁更甚生長(zhǎng)速率比微生物低，生長(zhǎng)倍增時(shí)間和發(fā)酵周期均更長(zhǎng)，對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求較微生物復(fù)雜，動(dòng)物細(xì)胞往往需要添加血清和其他營(yíng)養(yǎng)成分退出酶的發(fā)酵生產(chǎn)經(jīng)過(guò)預(yù)先設(shè)計(jì)，通過(guò)人工操作控制，利用細(xì)胞的生命活動(dòng)，產(chǎn)生人們所需要的酶的過(guò)程，稱為酶的發(fā)酵生產(chǎn)。 （ 2）能在便宜的底物上生長(zhǎng)良好，繁殖快，產(chǎn)酶量高，有利于縮短生周期（ 3）產(chǎn)酶性能穩(wěn)定，菌株不易退化，不易受噬菌體侵襲。（ 5）除蛋白酶生產(chǎn)菌種外，其他產(chǎn)酶菌種的產(chǎn)蛋白酶活力應(yīng)該很低，防止目標(biāo)酶的水解。 4)初篩：選出產(chǎn)酶菌種，以多為主。 ?淀粉酶的篩選蛋白酶產(chǎn)生菌的獲得方法應(yīng)用含酪蛋白的培養(yǎng)基退出第二節(jié) 酶的發(fā)酵技術(shù)一、培養(yǎng)基 C/N: 產(chǎn)酶促進(jìn)劑 : 誘導(dǎo)物 表面活性劑二、發(fā)酵條件對(duì)產(chǎn)酶的影響 溫度、 pH值、通風(fēng)量退出三、發(fā)酵方法固體培養(yǎng)發(fā)酵：培養(yǎng)基以麩皮、米糠等為主要原料加入其它營(yíng)養(yǎng)成分，經(jīng)滅菌、接產(chǎn)酶菌株，在一定條件下發(fā)酵，目的獲得淀粉酶和蛋白酶，如酒曲生產(chǎn)。 固定化細(xì)胞發(fā)酵退出第三節(jié) 提高酶產(chǎn)量的方法一、酶合成的調(diào)節(jié)機(jī)制調(diào)節(jié)基因： 阻遏蛋白 輔阻遏物退出v誘導(dǎo)和阻遏v誘導(dǎo)： 誘導(dǎo)物的加入后，酶才大量合成， 參與分解代謝的酶：淀粉酶、纖維素酶阻遏： 末端代謝物阻遏： 反饋?zhàn)瓒?，合成代謝中的關(guān)鍵酶 分解代謝物阻遏： 1. 酶合成的誘導(dǎo)酶合成的誘導(dǎo)加進(jìn)某種物質(zhì)，使酶生物合成開始或加速進(jìn)行。 酶合成誘導(dǎo)的現(xiàn)象： 已知分解利用乳糖的酶有： 半乳糖苷酶； ?半乳糖苷透過(guò)酶；硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙酰酶 。調(diào)節(jié)基因操縱基因乳糖結(jié)構(gòu)基因P LacZ LacY LacamRNA 阻遏蛋白（有活性）基 因 關(guān) 閉啟動(dòng)子ORP LacZ LacY Laca調(diào)節(jié)基因操縱基因乳糖結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)子ORmRNAZ mRNAY mRNAa 阻遏蛋白（無(wú)活性） 基 因 表達(dá)mRNAA、乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)B、乳糖酶的誘導(dǎo) 乳糖 阻遏蛋白（有活性）誘導(dǎo) 由某代謝途徑末端產(chǎn)物的過(guò)量累積引起的阻遏 。（ 1）大腸桿菌生長(zhǎng)在無(wú)機(jī)鹽和葡萄糖的培養(yǎng)基上時(shí)， （ 2）在上述培養(yǎng)基中加入色氨酸，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)色氨酸合成酶的活性降低，直至消失。（ 3）表明色氨酸的存在阻止了色氨酸合成酶的合成，體現(xiàn)了菌體生長(zhǎng)的經(jīng)濟(jì)原則 :不需要就不合成 。n 分解代謝物的阻遏作用，并非由于快速利用的甲碳源本身直接作用的結(jié)果，而是通過(guò)甲碳源（或氮源等）在其分解過(guò)程中所產(chǎn)生的中間代謝物所引起的阻遏作用。待葡萄糖耗盡后才開始利用乳糖，產(chǎn)生了兩個(gè)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中間隔開一個(gè)生長(zhǎng)延滯期的
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