實驗動物胚胎工程技術(shù)-展示頁
2024-09-26 20:53本頁面
【正文】 技術(shù)稱為胚胎移植 。 目前胚胎培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)可以將未成熟卵在體外成熟，并通過體外受精發(fā)育成各階段的早期胚胎。 3．冷凍保存胚胎解凍后，通過體外培養(yǎng)，篩選成活胚胎用于胚胎移植。 四、胚胎培養(yǎng) 22 胚胎培養(yǎng)一般應用于以下幾個方面： 1．未成熟卵母細胞通過體外培養(yǎng)，成熟后進行體外受精。 Y染色體短臂上有決定雄性的 DNA片段 SRY基因(sexdetermining region of Ychromosome,全稱 :Y染色體性別決定區(qū) )， 為胚胎性別鑒定提供了可靠的途徑 。 19 （二）對胚胎進行鑒定以控制性別 在胚胎移植前對胚胎的部分組織用染色體檢查、間接免疫熒光法和 PCR法進行性別鑒定。即 X精子帶上正電荷， Y精子帶上負電荷。 正常人染色體 18 具體的做法是： ?先用 DNA特異性染料對精子進行活體染色，然后精子連同少量稀釋液逐個通過激光束。 17 應用流式細胞儀分離 X和 Y精子的原理： X精子的 DNA含量比 Y精子的高。 目前將 X和 Y精子分離的方法有沉降法 、 電泳法 、免疫法和流式細胞儀法等 。 16 （一）分離 X精子與 Y精子以控制性別 分離 X精子與 Y精子的依據(jù) ： X、 Y精子在體積 、密度 、 電荷 、 運動性和 DNA含量 、 表面抗原等方面存在差異 。攜帶此致病基因的女性懷孕后如做胚胎性別鑒定，則可避免男性患兒的出生。 ? 在醫(yī)學上，性別控制的研究也具有積極的意義。 二、體外受精 14 性別控制的研究，是畜牧業(yè)生物技術(shù)中一項重要的高新技術(shù)。 這一過程包括卵母細胞的收集或未成熟卵母細胞的培養(yǎng)成熟 、 精子的獲取 、 獲能處理 、 受精及受精后胚胎培養(yǎng)等 。 所用激素有促卵泡激素（ FSH）、人絨毛膜促性腺激素(HCG)和孕馬血清促性腺激素（ PMSG）、孕酮和前列腺素（ PG）等，以前三種常用。 小鼠解剖取輸卵管 從輸卵管壺腹部取卵母細胞 /受精卵的方法 11 （ Superovolation）技術(shù)： 通過注射激素刺激卵巢大量排卵。 一、精子、卵母細胞、受精卵的采集和超數(shù)排卵 10 在哺乳動物中獲得卵母細胞的途徑有兩條： ? 從體內(nèi)成熟并排到輸卵管中去，需通過處死動物或外科手術(shù)獲??；如果在交配后，則可獲取受精卵或早期胚胎。將動物處死后，分離附睪尾部，用眼科剪子在頂端剪一小口，用手指輕柔擠出濃稠的液滴，置培養(yǎng)液中培養(yǎng)。 4． 在生命科學研究方面： 闡明哺乳動物早期胚胎發(fā)生 、 發(fā)育機制等基礎(chǔ)理論 5． 在拯救瀕危野生動物方面： 通過野生動物生殖細胞和組織的冷凍保存 、 體細胞克隆和胚胎移植技術(shù) ， 擴大野生動物的種群 。 通過收集 、 純化這些體液中的生物活性蛋白 ， 用于預防和治療某些人類的疾病 。 遺傳（基因）工程 蛋白質(zhì)工程 酶工程 細胞工程 微生物工程 胚胎工程 組織工程 分子水平 細胞水平 組織水平 3 胚胎工程（ Embryonic engineering） 又稱胚胎技術(shù) ,是指用工程學的原理對動物的胚胎進行某種技術(shù)操作或改造，使之獲得人們所需要動物的一系列生物技術(shù)的總稱 ,包括以下四大技術(shù)體系： 一 、 胚胎操作基本技術(shù) 、 精子 、 受精卵的采集 二 、 體細胞克隆技術(shù) 三 、 干細胞技術(shù) 四 、 外源基因?qū)爰夹g(shù) 4 1． 在畜牧業(yè)方面： 通過建立超數(shù)排卵 、 受精卵 /卵母細胞的采集 、 體外受精 、 胚胎切割 、 胚胎性別控制 、 體細胞克隆以及胚胎移植技術(shù) ， 加快良種家畜的繁殖和家畜品種的改良 。1 第十二章 實驗動物胚胎工程技術(shù) 2 第一節(jié) 概述 工程 :通過構(gòu)想、設計，按照人們的意愿制作、改造某一事物，以達到預想的目的。 生物工程： 按照工程學原理，對生物體或生物大分子進行改造或利用，用于生產(chǎn)、研究、檢定和創(chuàng)造新物種的綜合性科學技術(shù)。 胚胎工程的應用 5 已在乳腺表達的生物活性蛋白并進入臨床 2期或 3期試驗： ?抗凝血酶一 Ⅲ ?抗胰蛋白酶 ?蛋白 C ?乳鐵蛋白 ?乳糖酶 2． 在生物制藥方面： 通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將具有藥用價值的生物活性蛋白的基因整合到宿主的染色體上 ， 使其在乳汁 、 血液 、 尿液等體液中表達 。 6 3． 在醫(yī)學方面： 通過建立卵母細胞的采集 、 體外受精 、 顯微受精以及胚胎移植技術(shù) ， 用于不孕癥的治療； 通過對胚胎培養(yǎng)和檢測 ， 剔除具有遺傳性疾病的胚胎 ， 達到優(yōu)生優(yōu)育的目的 。 7 第二節(jié) 胚胎操作基本技術(shù) 8 胚胎操作的整個過程局限在胚胎的早期發(fā)育 9 解剖取附睪尾部 精子的獲取和培養(yǎng) ?嚙齒類小動物精子的采集大都從 體成熟雄性動物 的附睪獲取。 ?大動物的精液采集可采用假陰道或電刺激方法促進雄性射精，收集精液。 ? 取自屠宰淘汰的或剛死亡的雌性動物的卵巢，從卵巢中分離卵母細胞經(jīng)培養(yǎng)而得。經(jīng)超數(shù)排卵處理，動物卵巢大量的卵泡同時成熟并排出，排卵數(shù)可增加幾倍至十幾倍，一次可獲得大量的卵細胞、受精卵或早期胚胎。 12 檢查陰栓：妊娠 中午 12時 中午 12時 上午 8時 24小時 24小時 20小時 注射 PMSG 注射 hCG 小鼠超數(shù)排卵程序 放到種公鼠籠內(nèi) 受精卵 注射 PMSG 注射 hCG 晚上 56時 晚上 56時 24小時 24小時 卵母細胞 采 集 15小時 13 ? 體外受精 （
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