食品化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法-展示頁(yè)
2024-08-20 17:49本頁(yè)面
【正文】 取出。五、思考 蛋白質(zhì)的沉淀作用還有哪些方法?’哪些變性了?哪些沒(méi)有變性實(shí)驗(yàn)三： 馬鈴薯淀粉的制備馬鈴薯可溶性淀粉探究實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)步驟第一次：用同種、不同濃度的酸在不同溫度下水解不同時(shí)間，探討上述因素對(duì)可溶性淀粉的影響。生物堿試劑能和蛋白質(zhì)結(jié)合生成沉淀，可能因蛋白質(zhì)和生物堿含有相似的含氮基團(tuán)。植物體內(nèi)具有顯著生理作用的含氮堿性化合物稱為生物堿。取試管1支加蛋白質(zhì)溶液2ml，滴加1％CuSO4溶液，至有沉淀生成。3．重金屬鹽沉淀蛋白質(zhì)。取蛋白質(zhì)濾液1ml，加晶體NaCl少許（加速沉淀并使沉淀完全）。(2)、將析出卵清球蛋白后的濾液放人試管中，再加人固體硫酸銨使之達(dá)飽和，觀察有無(wú)沉淀產(chǎn)生，若有沉淀，則過(guò)濾之，濾出的沉淀卻為卵清白蛋白。3．95％乙醇，1％CuSO4，飽和苦味酸，NaCl,4．試管，三角漏斗、玻棒，濾紙，試管架酒精燈，移液管。三、實(shí)驗(yàn)材料 1．新鮮蛋清或血清，蛋白質(zhì)溶液。分子量大的蛋白質(zhì)(如球蛋白)比分子量小的(如白蛋白)易于析出。經(jīng)透析或用水稀釋時(shí)又可溶解，故蛋白質(zhì)的鹽析作用是可逆過(guò)程。用大量中性鹽使蛋白質(zhì)從溶液中析出的過(guò)程稱為蛋白質(zhì)的鹽析作用?；瘜W(xué)因素有強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、尿素、胍鹽、去污劑、重金屬鹽（如Hg2+、Ag+、Pb2+等）三氯乙酸，濃乙醇等。變性作用并不引起蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞，而是二級(jí)結(jié)構(gòu)以上的高級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞，變性后的蛋白質(zhì)稱為變性蛋白。2．進(jìn)一步掌握蛋白質(zhì)的有關(guān)性質(zhì)。最后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量：葉綠素的含量（mg/g）= [葉綠素的濃度提取液體積稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重（或干重）。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=－；Cb=－。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。3. 取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤(rùn)，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過(guò)濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?. ，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95％乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨至組織變白。（三）試劑：96％乙醇（或80％丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。二、材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。今欲測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。葉綠素含量的測(cè)定一、 原理根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A＝αCL式中：α比例常數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過(guò)測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。這就是吸光度的加和性。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰。（二）儀器設(shè)備：1. 分光光度計(jì)；2. 電子頂載天平（）；3. 研缽；4. 棕色容量瓶；5. 小漏斗；6. 定量濾紙；7. 吸水紙；8. 擦境紙；9. 滴管。三、實(shí)驗(yàn)步驟1. 取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去掉中脈），混勻。靜置3～5min。4. 用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。最后用乙醇定容至25ml，搖勻。以95％乙醇為空白，在波長(zhǎng)665nm、649nm下測(cè)定吸光度。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca、Cb：mg/L），二者之和為總?cè)~綠素的濃度。實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)的沉淀及變性發(fā)布時(shí)間：20101223 瀏覽次數(shù)：3395 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?．熟悉蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)。二、實(shí)驗(yàn)原理 蛋白質(zhì)因受某些物理或化學(xué)因素的影響，分子的空間構(gòu)象被破壞，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)發(fā)生改變并失去原有的生物學(xué)活性的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。引起蛋白質(zhì)變性的因素很多，物理因素有高溫、紫外線、X射線、超聲波、高壓、劇烈的攪拌、震蕩等。不同蛋白質(zhì)對(duì)各種因素的敏感程度不同。蛋白質(zhì)是親水膠體，在高濃度的中性鹽影響下脫去水化層，同時(shí)，蛋白質(zhì)分子所帶的電荷被中和，結(jié)果蛋白質(zhì)的膠體穩(wěn)定性遭到破壞而沉淀析出。鹽析不同的蛋白質(zhì)所需中性鹽濃度與蛋白質(zhì)種類及p
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