elisa知識(shí)簡(jiǎn)介-展示頁(yè)
2025-07-24 22:50本頁(yè)面
【正文】 物； ②：樣品； ③：特異性 IgG； ④：生物素化抗小鼠 IgG （ Biotin）； ⑤：辣根過(guò)氧化物酶 HRP酶標(biāo)鏈親和素（ Avidin）； ⑥： DAB顯色液； ⑦：顯色； 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 3. ELISA的試劑 (A、 B、 C三部分 ) ELISA中有三個(gè)必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物。用抗人 IgM抗體包被固相，以捕獲血清標(biāo)本中的 IgM（其中包括針對(duì)抗原的特異性IgM抗體和非特異性的 IgM）。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體 當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特異性抗體。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 間接法測(cè)抗體 傳染病的診斷。乙肝標(biāo)志物中抗 HBsAg的檢測(cè)常采用本法。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 雙抗原夾心法測(cè)抗體 用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 雙抗體夾心法測(cè)抗原 此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如 HBsAg、HBeAg、 AFP等。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑： （ 1）固相的抗原或抗體，即 免疫吸附劑 （ immunosorbent） ； （ 2）酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為 結(jié)合物 （ conjugate） ； （ 3）酶反應(yīng)的底物。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 免疫測(cè)定在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用 由于各種抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體，利用此抗體作為試劑就可檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原，因此免疫測(cè)定的應(yīng)用范圍極廣。 測(cè)定某一特定的物質(zhì)，而不需先分離待檢物。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 特異性 抗原抗體的結(jié)合發(fā)生在抗原的決定簇與抗體的結(jié)合位點(diǎn)之間。 高親和力抗體的抗原結(jié)合點(diǎn)與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合，兩者結(jié)合牢固，不易解離。Ab]／ [Ag][Ab] ,Ag 酶免疫技術(shù) 酶免疫組化 酶免疫測(cè)定 均相酶免疫測(cè)定 非均相酶免疫測(cè)定 固相酶免疫測(cè)定 液相酶免疫測(cè)定 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 抗原抗體反應(yīng) 可逆性 抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡，其反應(yīng)式為： Ag+Ab→Ag 加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，由此進(jìn)行定性或定量分析。ELISA 知識(shí)簡(jiǎn)介 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 1. ELISA的原理 2. ELISA的類型 3. 試劑準(zhǔn)備 ： 免疫吸附劑 結(jié)合物 酶底物的準(zhǔn)備 4. 對(duì)照設(shè)定 5. 標(biāo)本的采取和保存 6. 結(jié)果判斷 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 ELISA是一種免疫測(cè)定（ immunoassay， IA） ?；A(chǔ) :抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。 1. ELISA的原理 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 酶免疫測(cè)定類型 這種固相酶免疫測(cè)定方法在 1971年最初建立時(shí)稱為酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（ Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay），簡(jiǎn)稱 ELISA。Ab 抗體的親和力（ affinity），可以用平衡常數(shù) K表示：K=[AgAb的解離程度與 K值有關(guān)。 解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性?；瘜W(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型互補(bǔ)關(guān)系，具有高度的特異性。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 最適比例 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 敏感性 化學(xué)比色法的敏感度為 mg/ml水平 酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為 510μg/ml 免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法和濁度法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿 標(biāo)記的免疫敏感度可提高數(shù)千倍，達(dá) ng/ml水平 例如， HBsAg，其敏感度可達(dá) 。 原理 類型 試劑準(zhǔn)備 對(duì)照 標(biāo)本 結(jié)果 2 EL
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