蛋白酶專一性酶切位點(diǎn)的影響因素分析-展示頁(yè)
2025-07-08 17:01本頁(yè)面
【正文】 個(gè)具有挑戰(zhàn)性的問(wèn)題是，在蛋白質(zhì)酶切過(guò)程中，會(huì)出現(xiàn)漏切位點(diǎn)和非專一性酶切位點(diǎn)，最終無(wú)法保證絕對(duì)把蛋白質(zhì)酶切為常規(guī)的肽段，造成許多不必要的產(chǎn)物生成。陳征松等（2007）建立了活性肽搜尋與蛋白模擬水解數(shù)據(jù)庫(kù)，實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)用單酶或者復(fù)酶的模擬水解。研究表明，具有特定生物活性的肽具有相似的結(jié)構(gòu)特征，而其活性與肽的理化性質(zhì)相關(guān)。迄今，獲得生物活性肽的大量研究主要集中在蛋白質(zhì)水解酶和蛋白質(zhì)的篩選以及酶解條件的優(yōu)化上，通過(guò)改善水解工藝，進(jìn)一步提高生物活性肽得率。生物活性肽具有促進(jìn)礦物質(zhì)吸收、抑制細(xì)菌、抗高血壓、抗氧化、抗疲勞、神經(jīng)調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)等生理活性，而這些功能是原蛋白質(zhì)或其組成氨基酸不具備的，且許多活性肽的組成氨基酸不一定是必需氨基酸，選擇合適蛋白酶水解把其有生物活性肽鏈片段釋放出來(lái)，從而制備出具有各種各樣生理功能的生物活性肽。重組DNA技術(shù)在基因的表達(dá)與產(chǎn)品回收上仍有問(wèn)題，同時(shí)該法生產(chǎn)的活性肽種類也有限制，不能生產(chǎn)酰胺肽，也不適合制備短鏈肽[3]。化學(xué)法合成仍有許多缺點(diǎn)，包括①消旋化現(xiàn)象；②側(cè)鏈官能團(tuán)需要保護(hù)；③整體效率低；④使用大量的有毒溶劑，且成本高昂。然而，這些制備方法存在一定的局限性?；瘜W(xué)合成法發(fā)展較早，也比較成熟。天然生物活性肽通常具有高效、低毒、無(wú)污染等特點(diǎn)[2]。目前，獲得生物活性肽的主要途徑有以下3種：①直接分離提取；②化學(xué)合成或重組DNA技術(shù)；③體外水解蛋白質(zhì)[1]。由于生物活性肽在藥物、保健品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景，因此對(duì)生物活性肽的研究與開(kāi)發(fā)具有重要意義。生物活性肽有的是天然存在的，如谷胱甘肽、催產(chǎn)素、加壓素、舒緩激肽、部分抗菌肽等，有的生物活性肽是以非活性的狀態(tài)存在于某些蛋白質(zhì)中，當(dāng)用特定的蛋白酶水解后被釋放出來(lái)，才成為有特定生理活性的肽。hydrolysis conditions。關(guān)鍵詞：生物活性肽；蛋白酶；水解條件；酶切位點(diǎn)Influencing Factors Analysis of Protease Specific Cleavage SitesAbstract: Bioactive peptides are fragments with specific amino acid sequences that exert a positive physiological influence on the body. Many reported Bioactive peptides are produced by enzymatic hydrolysis,but there are disadvantages of byproduct and low choice of protease and protein source is a key step,and many factors such as local conformation,tertiary structure, experimental conditions and causal interference can influence the protease article presents the influencing fators,temperature,pH values,temperature bined pH values and metal ions included,to provide theoretical basis for enzymatic law analysis and higher yield bioactive peptides production.Key words:bioactive peptides。蛋白酶和蛋白質(zhì)的選擇是關(guān)鍵步驟，局部構(gòu)象、三維結(jié)構(gòu)、實(shí)驗(yàn)條件以及其它偶然因素也會(huì)影響蛋白水解酶的酶切效果。蛋白酶專一性酶切位點(diǎn)的影響因素分析摘要：生物活性肽(bioactive peptides)是具有特殊生理功能的肽。酶法水解蛋白質(zhì)廣泛用于制備生物活性肽，但酶解法存在目標(biāo)肽得率低、副產(chǎn)物過(guò)多的缺點(diǎn)。本文綜述了溫度、pH值、溫度和pH值共同作用、金屬離子對(duì)酶切位點(diǎn)的影響，旨在為研究酶切規(guī)律、制備高得率活性肽提供理論基礎(chǔ)。protease。protease cleavage sites1. 前言生物活性肽(bioactive peptides)是具有特殊生理功能的肽，是氨基酸以不同組成和排列方式構(gòu)成的不同肽類的總稱（氨基酸數(shù)目一般小于100）。同種蛋白質(zhì)經(jīng)不同的蛋白酶酶解后，可以產(chǎn)生具有不同氨基酸序列、不同生理功能的生物活性肽，如大豆蛋白
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