【正文】 號表達(dá)。在這個(gè)研究中我們表明了不斷用MVDN30來治療沉癮癌細(xì)胞會使其具有抗性的原因是MET基因的大量復(fù)制和MET的過度表達(dá)超過了MVDN30對其有效下調(diào)并使其失去活性的的能力。 這促進(jìn)了MET介導(dǎo)的生物活性的抑制作用。它的誘導(dǎo)、再結(jié)合、達(dá)到MET脫落閾值的能力使其有抑制活性，剩余的跨膜片段通過蛋白酶體降解途徑處理掉。然而，關(guān)于對MET的單克隆抗體的再次具有抗性一無所知。在活體和動(dòng)物模型進(jìn)行的研究已經(jīng)表明用TKIs長期治療會導(dǎo)致機(jī)體的治療耐受性。除此之外，還表明細(xì)胞顯示大量復(fù)制（超過8張）和隨之而來的過度表達(dá)和獨(dú)立配體的激活都是沉溺于這種致癌基因和抗MET藥物的應(yīng)答中。在腫瘤組織中，浸潤性生長的增進(jìn)可以迫使腫瘤細(xì)胞從腫瘤組織中分解下來侵蝕基底膜，滲入基質(zhì)中，甚至定居于新的組織中來實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。最近，一種作為癌癥治療目標(biāo)的RTK受到關(guān)注，這種RTK是由致癌基因編碼的在肝細(xì)胞生長因子上的酪氨酸激酶受體。在癌癥治療中的可以抗癌的RTKs單克隆抗體已經(jīng)被批準(zhǔn)在乳腺癌和結(jié)腸癌中使用(分別針對HER2和表皮生長因子受體) 并可作為抗血管增生的藥物（針對血管內(nèi)皮生長因子受體）。單克隆抗體已被廣泛用于臨床并取得了可觀的成果。酪氨酸激酶抑制劑是一種可以抑制靶蛋白酶活性的小分子物質(zhì)。 Gschwind等人，2004）。癌基因和人類癌癥密切相關(guān)，酪氨酸激酶起著決定性作用。盡管靶向治療在一部分癌癥患者中取得了較優(yōu)異的效果，還有重要的一點(diǎn)就是部分癌癥病人對藥物的選擇表達(dá)沒有起到治療作用（原發(fā)性），除此之外，幾乎總是一開始患者反應(yīng)變成后來對治療的抵抗和復(fù)發(fā)（繼發(fā)性）。這就意味著單個(gè)基因的抑制或死亡是由于它們的沉癮，或者至少抑制它們的生長（溫斯坦,2002）。與主要?dú)⑺罃U(kuò)散細(xì)胞為主的傳統(tǒng)化療不同的是靶向藥物對腫瘤細(xì)胞采取一種更具體的治療方式。結(jié)果表明一種不連續(xù)的通過抗體和化學(xué)激酶抑制劑聯(lián)合治療可能會使靶向治療的臨床反應(yīng)和對MET抗體治療旁路的抗性增加。除此之外，抗體抗性細(xì)胞還具有藥物依賴性,MVDN30的去處導(dǎo)致它們死亡是由于它們的過度信號表達(dá)。這種過度表達(dá)可以使單克隆抗體的“脫落”活動(dòng)達(dá)到飽和，并且能夠防止表面的MET受體的有效的下調(diào)和抑制劑的活化作用。EBC1型肺癌細(xì)胞是MET基因擴(kuò)增的結(jié)果，并且這種細(xì)胞對MET抑制劑非常敏感，包括MET單克隆抗體的單機(jī)形式在內(nèi)。MET基因復(fù)制數(shù)量的增加賦予單克隆抵抗體抗MET的能力并且建立藥物依賴性關(guān)鍵詞：MET ，MVNV30單克隆抗體，酪氨酸激酶抑制劑，抗性，藥物依賴性【摘要】：被MEI原癌基因編碼的酪氨酸激酶受體領(lǐng)導(dǎo)了具體抑制劑的發(fā)展并在癌癥中起很重要的作用，其中現(xiàn)在一些正處于前進(jìn)的臨床試驗(yàn)階段就以前的經(jīng)驗(yàn)表明對大多數(shù)靶向治療最主要的限制是抗性的出現(xiàn)。在對MET單克隆抗體抗性和抗體對化學(xué)抑制劑旁路抗性（反之亦然）一無所知時(shí)，酪氨酸激酶抑制劑對MET的抗性機(jī)制就已經(jīng)被提出。我們培養(yǎng)生成抵抗抗體的細(xì)胞發(fā)現(xiàn)這種抗性是由于MET基因大量復(fù)制擴(kuò)增和它的受體顯著表達(dá)而來。值得注意的是MVDN30抗體的抗性細(xì)胞是MET耐受細(xì)胞對MET酪氨酸激酶抑制劑也很敏感。在實(shí)驗(yàn)中，對MET酪氨酸激酶抑制劑存在抗性的細(xì)胞仍然對MVDN30抗體的作用敏感?？s略語：MVDN30單價(jià)DN30，TKEs—酪氨酸激酶抑制劑，HGF—肝細(xì)胞生長因子，MAPK—有絲分裂原活化蛋白激酶可以抑制一個(gè)特定的目標(biāo)分子化合物的靶向治療法開辟了治療癌癥的新道路。靶向治療依賴于“癌基因沉癮”的概念。臨床試驗(yàn)中的特定抑制劑的發(fā)展給腫瘤細(xì)胞的“Achille’s heel”的識別提供支持（溫斯坦和喬，2006）。因此，最關(guān)鍵的就是要發(fā)現(xiàn)對治療抵抗的機(jī)制并且找到繞過它們的方法。這個(gè)觀察發(fā)現(xiàn)許多腫瘤沉溺其中使得蛋白激酶成為了治療癌癥的理想目標(biāo)（巴塞爾加，2006。在臨床診斷中主要使用一種較小的激酶抑制劑和單克隆抗體來抑制酪氨酸激酶。它們能有效地瞄準(zhǔn)膜結(jié)合位點(diǎn)和細(xì)胞內(nèi)的激酶并且很容易在體內(nèi)擴(kuò)散。這些分子的優(yōu)點(diǎn)在于它們具有很高的特異性。除此之外，很多針對于其他目標(biāo)的單克隆抗體正處與發(fā)展和試驗(yàn)階段。在和肝細(xì)胞生長因子結(jié)合后，MET活化并啟動(dòng)一個(gè)復(fù)雜的生化程序，這個(gè)過程被稱作“浸潤性上長”。很多研究結(jié)果表明MET在人類的許多腫瘤中具有活性，并且它與對直接激酶療法的持續(xù)抗性密切相關(guān)。在前期設(shè)置得到的基本結(jié)果，幾種特定的多目標(biāo)的酪氨酸激酶抑制劑和直接針對于MET或者HGF的抗體已經(jīng)進(jìn)入了臨床試驗(yàn)階段。對MET TKIs的抗性可能是由于一些機(jī)制，比如MET基因擴(kuò)增，過度表達(dá)，MET點(diǎn)突變，MET平行路徑的激活和KRAS基因的擴(kuò)增機(jī)制。我們以前報(bào)道過主要針對細(xì)胞外的部分MET的抑制性單克隆抗體的研究進(jìn)展。因此，DN30結(jié)合到MET后的結(jié)果是使其變成可溶性的誘餌MET并且蛋白水解酶會講解MET激酶。設(shè)計(jì)了這樣一個(gè)過程就是因?yàn)镈N30的結(jié)合使得MET激酶部分活化并且導(dǎo)致抗體介導(dǎo)的受體同源二聚體化和單價(jià)Fab片段失去競爭活性的一個(gè)過程。值得注意的是，MVDN30抗性細(xì)胞還會一直對MET TKIs產(chǎn)生耐受性和敏感性。我們還表明對MET TKIs 有抗性的細(xì)胞也對MVDN30敏感，所以，MVDN30和MET TKIs 對腫瘤細(xì)胞的作用是相互促進(jìn)的。 GTL16 是一種實(shí)驗(yàn)室里的克隆胃癌細(xì)胞系。對MVDN30有抗性的EBC1細(xì)胞可以通過一個(gè)逐步的方法培養(yǎng)得到，由Sigma Tau Ramp。親代細(xì)胞用10 mg/ml 的MVDN30治療約一個(gè)月，直到生成的R10細(xì)胞開始產(chǎn)生抗性為止，R10抗性細(xì)胞又用逐步增加濃度的MVDN30治療。大約兩個(gè)月可以分離到R20抗體抗性細(xì)胞，四個(gè)月可以分離到R80抗體耐受細(xì)胞。該細(xì)胞系的遺傳身份通