系列實驗ⅰ谷氨酸發(fā)酵-展示頁
2025-05-12 18:45本頁面
【正文】 鐘 。 二、發(fā)酵罐構造的熟悉及空氣管路的滅菌 谷氨酸發(fā)酵是有氧發(fā)酵，發(fā)酵罐由空氣管道、蒸汽管道、水管道和排污管道等組成。 擴大培養(yǎng) 斜面生長大約三天左右。 從冷凍的菌體中用接種針挑取一定的菌種 ， Z 字型接種到試管斜面上。 滅菌 將裝有瓊脂培養(yǎng)基的試管高壓滅菌鍋里面 121℃ ，高壓滅菌 20分鐘。系列實驗 Ⅰ 液體通氣發(fā)酵 —— 谷氨酸發(fā)酵 實驗目的 谷氨酸 (Glutamic acid)是最先成功地利用發(fā)酵法進行生產的氨基酸，谷氨酸發(fā)酵是典型的 代謝調控 發(fā)酵，因此，了解谷氨酸發(fā)酵機理，掌握其發(fā)酵工藝，將有助于對代謝調控發(fā)酵的理解，有助于對其它有氧發(fā)酵，特別是氨基酸發(fā)酵的理解和掌握。 谷氨酸發(fā)酵生理 谷氨酸發(fā)酵包括了谷氨酸的生物合成和產物的結累二個過程 EMP和 HMP TCA循環(huán) DCA循環(huán) CO2的固定 氨的導入 CO2 谷氨酸的生物合成途徑 實驗室谷氨酸發(fā)酵 一 、 谷氨酸菌種的制備 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基可直接用營養(yǎng)瓊脂，稱取一定量的營養(yǎng)瓊脂， 加熱溶解，分裝到試管中，不能超過試管體積的 1/3。 接種 試管傾斜放置等斜面凝固 超凈臺 開啟三十分鐘后，通風 5分鐘后方可進行操作。 注意事項 菌種的污染，勢必導致發(fā)酵的失敗，輕者產酸下降，嚴重的不積累產物，因此，在菌種制備的整個過程中，都要樹立起牢固的無菌 概念，工作力求細致、到位 一 、 谷氨酸菌種的制備 培養(yǎng) 將試管放入 28度 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天注意觀察記錄。菌種開始長出，然后接種到 250ml錐形瓶液體培養(yǎng)基中 ， 28℃ 150轉 搖床培養(yǎng)。 1. 方法：蒸汽滅菌法 ， 事先打開蒸汽發(fā)生器 蒸汽發(fā)生器使用注意：使用時保持進水； 一般保持 “ 自動 ”位置 2. 調節(jié)壓力 ， 并保壓 30分鐘 ， 在此過程中， 時刻注意觀察此壓力 。 三 、 發(fā)酵罐的空消 控制壓力 ~，保壓 30分鐘； 空消結束后，打開空氣，保壓 ~之間。 四、發(fā)酵培養(yǎng)基的配制 ? 按工藝要求配制培養(yǎng)基（課本 P88）和 40%的尿素。 ? 放入 pH、 OD電極（注意事先要校對） ? 空消后待罐溫度降低，手摸玻璃視窗不燙手，才可倒入培養(yǎng)基。 五、實消 （ 1）先打開進夾套的蒸汽閥和夾套下排水，開啟攪動，待溫度上升到 90度時，關閉夾套進汽閥，打開進發(fā)酵罐的蒸汽閥，繼續(xù)升溫到實驗要求。 （ 3）時間到后，關閉進氣閥，打開冷卻水進行冷卻；注意保持罐壓 ~ （ 4）溫度降至 40度左右時，加初尿，添加量為~1% 六、接種 緩慢降罐壓至 火焰封口法接種 七、發(fā)酵過程的控制 （ 1）長菌期： 0 ~12小時，最適溫度 30~32度，控制 pH不大于 。 八、放罐 谷氨酸的等電回收 發(fā)酵罐的清洗 系列實驗 Ⅱ 液體靜止發(fā)酵 —— 啤酒發(fā)酵 實驗目的 通過啤酒的實驗室發(fā)酵試驗，熟悉 無氧發(fā)酵 工藝的大致過程，了解啤酒的釀造特點，從而增強對啤酒發(fā)酵的感性認識，為有志于啤酒生產與科研的同學打下基礎。 啤酒發(fā)酵生理學 ? 啤酒的化學組成 ? 啤酒發(fā)酵過程 一 、 啤酒的化學組
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