蛋白質(zhì)的通性、純化與表征-展示頁
2025-05-10 18:07本頁面
【正文】 組織和細胞破碎 動物組織和細胞：電動搗碎機、勻漿器、超聲波處理 植物組織和細胞：石英砂 +提取液、研磨、纖維素酶處理 細菌：超聲波震蕩、與砂研磨、高壓擠壓、溶菌酶處理 ②收集細胞的某一組分：差速離心法 ③如果提取膜蛋白：超聲波或去污劑使膜解聚，然后用適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)提取。 ⑤ 加熱變性沉淀： 將接近于等電點附近的蛋白質(zhì)溶液加熱 ，熱穩(wěn)定性差的蛋白質(zhì)將發(fā)生變性而凝固沉淀 。 生物堿試劑：是指能引起生物堿沉淀的一類試劑 ， 單寧酸 、 苦味酸 、 鎢酸 。 蛋白質(zhì)不變性 。 例如酒精消毒滅菌就是如此 。 使用較多的有機溶劑是乙醇 、 甲醇等 。 重金屬沉淀的蛋白質(zhì)常是變性的 。② 靜電排斥 ： 蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)與沉淀 一旦電荷被中和或水化膜被破壞，在蛋白質(zhì)的疏水作用下，蛋白質(zhì)顆粒聚集，便從溶液中析出沉淀。 ?由于 ① 蛋白質(zhì)表面極性基團形成的水化膜 ， ② 非等電狀態(tài)時 ，同種電荷的互相排斥 ， ③ 質(zhì)點大小在 1100nm， 故 蛋白質(zhì)水溶液是膠體溶液 。 ?蛋白質(zhì)的等電點和它所含的酸性氨基酸殘基和堿性氨基酸殘基的比例有關(guān)。第 03章 蛋白質(zhì)的性質(zhì)和分離純化 Properties and Purification of Protein 生 物 化 學(xué) Biochemistry 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 陳吉寶 ?蛋白質(zhì)是一種兩性電解質(zhì) 蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì) pH=6 ?蛋白質(zhì)份子表面分布著不同的電荷。 ?蛋白質(zhì)等電點 ：使某特定蛋白質(zhì)分子上所帶正負電荷相等時溶液的 pH值為蛋白質(zhì)的等電點（ pI）。 蛋白質(zhì)溶液處于等電點時，溶解度最小。 ?穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體溶液的主要因素 ① 水化層 (hydration shell)。 ?蛋白質(zhì)沉淀 (precipitation)的方法 ③ 重金屬鹽沉淀法： pH大于等電點時 ， 蛋白質(zhì)帶負電荷 ， 可與重金屬離子結(jié)成不溶性沉淀 （ Ca 2+、 Mg 2＋ 、 Ba 2+、 Pb 2+與羧基結(jié)合； Mn 2＋ 、 Zn 2＋ 、 Fe 2+、 Cu 2+、 Co 2+、 Ni 2+與羧基 、 含氮化合物及雜環(huán)化合物結(jié)合； Ag+、 Hg 2
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