放線菌素d誘導細胞凋亡形態(tài)學-展示頁
2025-03-31 04:24本頁面
【正文】 的主動過程，由于受到嚴格的遺傳機制決定的程序性調(diào)控，所以也被稱為細胞程序性死亡 (programmed cell death， PCD）。 ? 誘導細胞發(fā)生凋亡的外在因子包括物理性因子（如紫外線、 γ 射線等）和化學性因子（如超氧自由基、羥自由基、視黃酸、環(huán)己亞胺、放線菌素 D等）。 ? 凋亡細胞的核 DNA的斷裂發(fā)生在核小體之間，因此產(chǎn)生的斷裂 DNA在電泳時會呈現(xiàn)180～ 200bp整數(shù)倍大小的階梯狀條帶（ ladders），這是識別凋亡細胞的可靠生化特征。但由于凋亡細胞的染色質(zhì)凝縮和凋亡小體的形成，因此呈致密濃染，而正常細胞則發(fā)出均勻熒光，由此可以將凋亡細胞和正常細胞區(qū)分開來。 ? 加入 2ml PBS懸浮細胞 ， 離心去上清；再加入 液懸浮和固定細胞 10分鐘 。 ? 在載玻片上滴一滴封片液 ， 將蓋玻片有細胞的一面封蓋在液滴上 ， 不要產(chǎn)生氣泡 ， 用濾紙吸去多余的封片液 。 （ 染色時看上次結果 ） 【 觀察與結果 】 ? Hela細胞經(jīng)過放線菌素 D誘導后，可產(chǎn)生不同程度的細胞凋亡。 顯示 細胞色素 c誘導的凋亡細胞 DNA電泳圖 1．細胞色素 c誘導 0 h 2．細胞色素 c誘導 1 h 3．細胞色素 c誘導 2 h 4．細胞色素 c誘導 3 h 5．細胞色素 c誘導 4 h 6．陰性對照 7． Marker （ 自趙允、翟中和） DNA鑒定（不作 ） ? 長成致密單層細胞誘導后收集細胞 , 用PBS 洗 3 次。 細胞凋亡 (Apoptosis) ● 細胞凋亡的概念及其生物學意義 ● 細胞凋亡的形態(tài)學和生物化學特征 ● 細胞凋亡的分子調(diào)控機理 一、細胞凋亡的概念及其生物學意義 ● 概念： 細胞凋亡是一個主動的由基因決定的自動結束生命的 過程 ， 所以也常常被稱為細胞編程死亡 （ programmed cell death, PCD） 。 ● 生物學意義： 細胞凋亡對于多細胞生物個體發(fā)育的正常進行 ， 自穩(wěn)平衡的保持以及抵御外界各種因素的干擾方面都起著非 常關鍵的作用 ： 蝌蚪尾的消失 ， 骨髓和腸的細胞凋亡 ， 脊椎動物的神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育 ， 發(fā)育過程中手和足的成形過程 。整個過程中，細胞質(zhì)膜的整合性保持良好，死亡細胞的內(nèi)容物不會逸散到胞外環(huán)境中去，因而不引發(fā)炎癥反應。細胞表面產(chǎn)生了許多 泡狀或芽狀突起 ， 逐漸形成單個的凋亡小體
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