核增生李斯特氏菌檢測概述(1)-展示頁
2025-01-30 15:21本頁面
【正文】 工 MBP 30℃ ， 1824h EB 30℃ ， 24/48h MMA/ OXA （ 35℃ ， 2448h） 藍色菌落；典型運動；過氧化氫酶；革蘭氏染色；溶血試驗；尿素酶試驗；硝酸鹽還原； MRVP；三糖鐵；糖發(fā)酵；動力試驗；協(xié)同溶血 *；血清學檢驗 *；小鼠毒力試驗 * 無 未加工 EB （ 30℃ ， 24/48h） GB/T 2022 EB （ 30177。 LEB和 BLEB ? 只有選擇性沒有區(qū)別性 ? LEB是在 TSBYE的基礎上加入 鹽酸吖啶黃 、萘啶酮酸 和 放線菌酮 等選擇性因子；加入的 丙酮酸鈉 ，有助于受損細胞的恢復；不含七葉靈和檸檬酸鐵銨，無顏色反應 ? BLEB是在 LEB基礎上加入緩沖體系：磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉 檢測程序 分離 ? 分離培養(yǎng)基有： OXA、 PALCOM、 LPM、 MOX等，但首選仍然是 OXA。 ? 半量 Fraser肉湯與 Fraser肉湯所用的添加劑一樣 半量 Fraser肉湯：萘啶酮酸 10mg/L，吖啶黃 Fraser肉湯：萘啶酮酸 20mg/L，吖啶黃的 25mg/L UVM ? UVM只有選擇性沒有區(qū)別性 ? 加入 萘啶酮酸 和 鹽酸吖啶黃 ，作為選擇性因子。李斯特氏菌可以水解七葉靈，與培養(yǎng)基中的鐵離子反應，使培養(yǎng)基變黑，可直觀的從培養(yǎng)液的顏色就可以判斷是否有單核李斯特氏菌的生長。 檢測程序 增菌 目前常用的單核增生李斯特氏菌檢測增菌肉湯主要有 半量 Fraser肉湯 、 Fraser肉湯 （ FB）、 UVM（ Modified University of Vermont broth，也叫 UVM1）、 LEB（ Listeria enrichment broth）和 BLEB（ buffered Listeria enrichment broth） 半量 Fraser肉湯和 Fraser肉湯 ? 具有 選擇性 和 區(qū)別性 。 注意事項 ? 生物安全 2級 ，操作時應有相應的防污染設施，在進行可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時，應在生物安全柜內(nèi)完成； ? 在直接接觸有感染性的材料時，必須穿著實驗服，戴手套和護目鏡； ? 懷孕的婦女 應避免接觸傳染物。 致病機理 ? 單增李氏菌的抗原結(jié)構(gòu)與毒力無關(guān)，它的致病性與毒力機理如下： 寄生物介導的細胞內(nèi)增生，使它附著及進入腸細胞與巨噬細胞； 抗活化的巨噬細胞，單增李氏菌有細菌性過氧化物歧化酶，使它能抗活化巨噬細胞內(nèi)的過氧物（為殺菌的毒性游離基團）分解； 溶血素 ，即李氏桿菌素 O，可以從培養(yǎng)物上清液中獲得，有 α和 β兩種，為毒力因子。 感染人群 ? 感染劑量未知，但與該菌的毒力和易感人群的年齡、免疫狀態(tài)有關(guān)。 ? 由該菌造成的腦膜炎的致死率可高達 70%，敗血癥的死亡率達 50%，圍產(chǎn)期或新生兒感染的死亡率超過 80%，懷孕期婦女的感染，母親通常能存活下來。約有 8590%的病例是由被污染的食品引起的。 流行病學 ? 分布 ：廣泛存在于自然界中，土壤、地表水、污水、廢水、青儲飼料、動植物及其食品中均有該菌存在，所以動物很容易食入該菌，并通過口腔 糞便的途徑進行傳播 ? 寄主范圍 ：哺乳動物、鳥類、魚類、甲殼類和昆蟲 流行病學 ? 據(jù)報道，有 110%的人類腸道中存在單核增生李斯特氏菌， 48%的水產(chǎn)品、 510%的奶及其產(chǎn)品、 30%以上的肉制品及 15%以上的家禽均被該菌污染。 ? 致病菌株的血清型一般為 1/2b、 1/2c、 3a、3b、 3c、 4a、 1/2a和 4b,后兩型尤多。 ? 不利用枸櫞酸鹽， 40%膽汁不溶解，吲哚、硫化氫、尿素、明膠液化、硝酸鹽還原、賴氨酸、鳥氨酸均陰性， VP、甲基紅試驗和精氨酸水解陽性。 生物學特性 生化反應 ? 觸酶 陽性， 氧化酶 陰性。 ? 在 %酵母浸膏胰酪大豆瓊脂 (TSAYE)瓊脂上，用 45176。 生物學特性 培養(yǎng)特性 ? 在固體培養(yǎng)基上，菌落初始很小，透明，邊緣整齊，呈露滴狀，但隨著菌落的增大，變得不透明。 ? 生長溫度范圍為 242℃ （也有報道在 0℃ 能緩慢生長），最適培養(yǎng)溫度為 3537℃ 。m， 在有些培養(yǎng)基中稍彎，兩端鈍圓，單個、成短鏈、細胞彼此連成 V形，或成群的細胞沿長軸方向平行排列，在較老的或生長不良的培養(yǎng)物中，可能形成絲狀； ? 2025℃ 以 4根周生 鞭毛 運動，在 37℃ 只有較少的鞭毛或 1根鞭毛； ? 無芽孢、無莢膜。因此，李斯特氏菌中最有檢測意義的是單核增生李斯特氏菌。單核增生李斯特氏菌 檢測概述 張惠媛 2022年 6月 內(nèi)容 ? 簡介李斯特氏菌屬 ? 單核增生李斯特氏菌生物學特性 ? 流行病學 ? 致病性 ? 實驗室危害及其預防 ? 檢測程序 ? 快速檢測方法 李斯特氏菌屬 李斯特氏菌屬（ Listeria ）普遍存在于環(huán)境中，最新的分類學研究表明，其分為六個種： ? 單核增生李斯特氏菌（ Listeria monocytogenes） ? 伊氏李斯特氏菌（ Listeria ivanovii） ? 無害李斯特氏菌（ Listeria innocua） ? 斯氏李斯特氏菌（ Listeria seeligeri）
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