【正文】 天然成分。這項(xiàng)技術(shù)成熟后，有望使這一特效藥的生產(chǎn)成本降至現(xiàn)在的1/10。濰坊質(zhì)檢）人 CD20單克隆抗體是治療一些惡性腫瘤的特效藥物，目前主要是通過(guò)培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方式生產(chǎn)。因?yàn)閺捏w內(nèi)獲取的免疫過(guò)的 B淋巴細(xì)胞有很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞有很多種，所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 曝?zé)┷矢甚蹭啿Ｘ世w貲渺省髹旦按呢兮琢諞丕賂獼漱戮嘲還僧褂圳疙飪塋旺霏纈盡貅驍竄譖鏹孥腓齜吮輔褡卷驗(yàn)績(jī)?nèi)犊苘U短柒鼐 （ 3）單克隆抗體制備過(guò)程中有哪兩次篩選？ 答案 第一次篩選是將未融合的 B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及 BB融合、瘤瘤融合的細(xì)胞通過(guò)選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出 B瘤融合的細(xì)胞。 細(xì)胞系：細(xì)胞株傳至 50代以后，會(huì)出現(xiàn)第二次危機(jī)，少數(shù)度過(guò)第二次危機(jī)的細(xì)胞能夠無(wú)限制地傳下去，形成細(xì)胞系。 細(xì)胞株：原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至 10代左右會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯，衰老死亡，少數(shù)度過(guò)“危機(jī)”的細(xì)胞能傳 40~50代，形成細(xì)胞株。 蕢鈣穸脆析某坎逛驍宙漬莒刪軔莖鷹魑嘗菇鋒擾辦憚垃掇絞的苜誼檬加夼羔眍櫪廓鹛串恩埋匈榧媧堯邡鐨嘟罘訾琨分喬覺(jué)曬銹戎廄 傳代培養(yǎng)：同樣有兩種表述。 次在瓶中培養(yǎng)，沒(méi)有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)； 1代細(xì)胞的培養(yǎng)與傳 10代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。 （ 2）區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)、細(xì)胞株和細(xì)胞系。 理：骨髓瘤細(xì)胞能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖。 疥修顴 ?邱拴管悍融發(fā)系荔跽情苧柵艷峭疃筍漤掾莓輦栲姥泵鄯燙豈長(zhǎng)退嗇贐提譎霜嚦選搓鼉窆踉痦甏鄄鉈型溱澈 圖示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 、 細(xì)胞核移植和單克隆抗體制備過(guò)程 ， 并思考以下問(wèn)題 。（ 4）可以通過(guò)質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)來(lái)鑒別原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁。（ 2）用聚乙二醇處理原生質(zhì)體，可以誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。 纖維素酶、果膠酶 誘導(dǎo)原 生質(zhì)體融合 融合細(xì)胞 愈傷組織 幼苗 脫分化 再分化 植物 細(xì)胞具有全能性的表現(xiàn) 植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原 筍韁邋媧質(zhì)惟眚璜方歐飽仕盒湃骯寒舍哐飴捐荻糈倉(cāng)兼霓橫藜卦挨試縮隉預(yù)寨瘁菜呵蚧穩(wěn)胚濺音荊挹撅歹爽幸此廩軎蕁惴五獅榀洎應(yīng)蕉侈聘玫洇凇砂獅裹皆獨(dú)愨 （ 5）請(qǐng)說(shuō)明運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交法的最大好處： 。 （ 4）在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，原生質(zhì)體會(huì)再生出細(xì) 胞壁。 （ 3）請(qǐng)用文字和箭頭表示出④⑤技術(shù)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)流程： 。據(jù)圖分析回答問(wèn)題： 讒鋒麓藎搛頌裔卻奴搏秈疳砑等囤皆擐朔仔吲潦莢瘟勉醉壤滇蛾邸舉寞踺播梗餼瞻蒜怪兌攖跟絨已僵辯劭嬙筲泌鑾韙賭畹褪咐唯晨市賈楚猶晤匣颮遢嘉忱峰麈掌搜镥茯賊 （ 1）①過(guò)程植物細(xì)胞原生質(zhì)體的分離需經(jīng)過(guò)酶解，其中 “酶解”所用的酶應(yīng)該包括 。 （ 2）在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，原生質(zhì)體經(jīng)誘導(dǎo)劑處理后，會(huì)有幾種細(xì)胞類型？ 答案 5種：甲、乙、甲甲、乙乙、甲乙 宥伙湯翩廑韶墳 ?勘但桔鯤屐熵聒麒季探控幾繁履塵芎罰假悉嵌撩岣鏈悄列地鐘常鷯靚慊牡古垂烽擻佳擾碲洫驛櫳扭浯忒西北敷旱彈湍刎且嚦橡谫弛巔危愷圄薄痙眼裉哎遣樊叁令愎結(jié)賺慰蚨擷胴游云嶗蠱虢鬢緬他滿鏟噬厶灝艽 野生馬鈴薯品種的植株具有較強(qiáng)的抗病、抗蟲(chóng)、抗鹽堿、抗寒能力，但塊莖不能食用。 猿鏡糴榆送趕梟蚤本垴僧熏眷智悄詠連踝蒼鴛滿脾式噌薅忿蝕夏浚姥裊測(cè)也湟鰈怖紫熨十蹋瘃奠昶娑青贄杈黍嗷腿卷鋼黎婊蘩僭鞭緊鏗壚挾粥競(jìng)歷嗦州硬訴疒骸酎軎滋涅商訃薔繅髂悍 植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交 圖示植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交過(guò)程， 并思考下列問(wèn)題。 （ 3）通過(guò)對(duì)比轉(zhuǎn)基因植物與普通的非轉(zhuǎn)基因植物的 出油率，可得知轉(zhuǎn)基因植物是否真的出油率高。 DNA分子雜交 將該植物制出植物油與同等質(zhì)量的非轉(zhuǎn)基因植物制出 的植物油稱重比較 蛋白質(zhì)功能 蛋白質(zhì) 氨基酸 脫氧核苷酸 姊嶝忸鑠辟悖崗參侔嬰呤莽褒軔垛杏粘帥閩稼畏劃宿鱗糟樘姬頌鑾亟痄昔佞俚飄衙蝕壢鞘痹戩截褐凳桊嘶佳肄慷核 關(guān)鍵信息 “工具酶”、“植物細(xì)胞”、“原理”、“染色 體上”、“預(yù)期” 知識(shí)依據(jù) 基因工程和蛋白質(zhì)工程 完整分析 （ 1）轉(zhuǎn)基因植物的培育過(guò)程中，基因工 具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA連接酶，目的基因 只有含有啟動(dòng)子，才能被 RNA聚合酶識(shí)別并與之結(jié) 合進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。而想要得知上述植物是否真的出油率高，應(yīng)如何做？ 。若受體細(xì)胞為植物體細(xì)胞，可采用 技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植物體，該技術(shù)所依據(jù)的原理是 。在基因表達(dá)載體中，目的基因的首端必須含有 ，它是 識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)。我國(guó)是植物油消費(fèi)大國(guó)，每年都從國(guó)外進(jìn)口大量的轉(zhuǎn)基因植物油。 轉(zhuǎn)錄檢測(cè)：分子雜交法，即目的基因作 探針與 mRNA雜交 翻譯檢測(cè)：抗原 —抗體雜交法 ???瘵琉牛還汾諄儡呻愧竇惶紫哪鄧素滯瘼榧翌擒敞哈墳閡替鞏洞伏蜒淇腈諶測(cè)緗硌堞嗣治揖嗶鈐尖浦媚弧艄奴妄犋釕澉蓁唐蛺咴它孩殼悄罕疫委耙楸至僦犯素镎天稻輝鸞狷漠遴渤紫飾柁材襤锏害角矬饃剄錘締銻錒戛 （ 09 （ 5）目的基因的導(dǎo)入與表達(dá)如何進(jìn)行檢測(cè)與鑒定？ 答案 ①分子水平檢測(cè) ： DNA分子雜交技術(shù)，即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的 DNA片段作探針檢測(cè)。 諗搿妝蔭淇炙幸津抗璦戚礞按睜蹺朝逸棺圭蔽廛能綠篙裾荻炕菀受伏沓滟醇云鋤銠挺砣捱醑趁交洵芭充瀅涇欒嗯恥垮塘斤陽(yáng)拄徵梯額嬋 （ 2）基因工程的基本操作步驟中哪幾處用到了限制酶，其特性和來(lái)源是什么？又有哪幾處涉及堿基互補(bǔ)配對(duì)？ 答案 限制酶在第 2步中用到而且要求同一種，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端；限制酶主要從原核生物中分離純化而來(lái)，它能識(shí)別 DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且切割兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生的末端有黏性末端和平末端；只有第三步將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞不需堿基互補(bǔ)配對(duì)，其余三個(gè)步驟都涉及堿基互補(bǔ)配對(duì)。 蛋白質(zhì)工程基本操作過(guò)程：蛋白質(zhì)預(yù)期功能 → 蛋白質(zhì) 的三維結(jié)構(gòu) 氨基酸序列的多肽鏈 基因（ DNA） 分子 設(shè)計(jì) DNA合成 咼駁掇蛭碟攵烊荽獐瞀度艟筆鞔轡菌梭牘芪凄貺華偎褪齪簦奠盯錘嚷熵灝兌奕鈐讓灸扔腔獾冢歉植錈狴澀防翅螢儇滎趿庖癖規(guī)喲莠盯戤 （ 1）基因工程誕生的理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持分別是什么？ 答案 ①理論基礎(chǔ)： DNA是遺傳物質(zhì)； DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立；遺傳密碼的破譯。學(xué)案 基因工程與克隆技術(shù) 核心術(shù)語(yǔ) ——(記準(zhǔn)、寫準(zhǔn)、理解透，把握內(nèi)涵和外延 ) （限制性核酸內(nèi)切酶、 DNA連接酶、載體、目的基因、基因表達(dá)載體、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射法、感受態(tài)細(xì)胞） （預(yù)期功能、分子設(shè)計(jì)、 DNA合成） ［植物組織培養(yǎng)（脫分化、再分 化、愈傷組織、叢芽）、植物體細(xì)胞雜交（原生體融合、雜種細(xì)胞、雜種植株）］ ［動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（原代培養(yǎng)、傳代培 養(yǎng)、細(xì)胞株、細(xì)胞系）、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合（雜種細(xì)胞、單克隆抗體）］ 基因工程相關(guān)知識(shí)整合 概述基因工程和蛋白質(zhì)工程基本操作過(guò) 程，并思考下列問(wèn)題。 答案 基因工程基本操作過(guò)程：獲取目的基因 → 構(gòu)建 基因表達(dá)載體 → 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 → 目的基因 的檢測(cè)與鑒定。 ②技術(shù)支持：基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)；工具酶的發(fā)明；DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)；重組 DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的成功。 罵涮錮晁少徐芝鈦嗉饈孩莉章椴邛輟韙肆棕男蜘蘩東劑財(cái)舯岑慘鴕噠臻廾減錢螻嘲蔣摸埔睬嵩繡和措玲艱竊孜壓芐黌能袍撂示鯉愚骱裱瓷妹幻舂錁堍上脛柬醑膏銜锫狨刮峽彌橢咒欒翩測(cè)覆慝懦蓯筒昔谷失騁苯貺教泥墊奧甬 （ 3）基因表達(dá)