[經(jīng)濟(jì)學(xué)]第五章毛細(xì)管電泳-展示頁
2025-01-25 05:38本頁面
【正文】 移動(dòng)，這種液體相對于固體表面的移動(dòng)的現(xiàn)象叫 電滲現(xiàn)象 。 淌度 μ ：單位電場強(qiáng)度下的平均電泳速度。 高效毛細(xì)管電泳 (HPCE)基本原理 電泳是指帶電離子在電場中的定向移動(dòng)，不同離子具有不同的遷移速度， 遷移速度與哪些因素有關(guān)？ 當(dāng)帶電離子以速度 ν 在電場中移動(dòng)時(shí)，受到大小相等、方向相反的電場推動(dòng)力和平動(dòng)摩擦阻力的作用。 ? 電壓： 0～ 30kV； ? 分離柱不涂敷任何固定液； ? 紫外或激光誘導(dǎo)熒光檢測器； （ 可檢測到： 1019～ 1021 mol/L） 高效毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)（書 P144有 6點(diǎn)） 、易自動(dòng)化 電源、毛細(xì)管、檢測器、溶液瓶 、分離效率高 在 36種無機(jī)及有機(jī)陰離子， 24種陽離子；分離柱效： 105～ 107/m理論塔板數(shù)； 、消耗少，成本低 進(jìn)樣量極少，水介質(zhì)中進(jìn)行； 有機(jī)物、無機(jī)物、生物、中性分子；生物大分子等； 分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、材料等； 高靈敏度。 ? 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā) ， 大大減小了溫度效應(yīng) ， 使電場電壓可以很高 。 1981年， Jenson和 Luckas， 用 75μm內(nèi)徑石英毛細(xì)管進(jìn)行電泳分析，柱效高達(dá) 40萬 /m， 促進(jìn)電泳技術(shù)發(fā)生了根本變革，迅速發(fā)展成為可與 GC、 HPLC相媲美的嶄新的分離分析技術(shù) —— 高效毛細(xì)管電泳 。 1937年， Tiselius(瑞典 )將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳， 第一次 將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋白和 α 、 β 、 γ 球蛋白； 發(fā)現(xiàn) 樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定； 第一次 的 自由溶液電泳； 第一臺(tái)電泳儀 ； 1948年， 獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)； 概 述 經(jīng)典電泳分析 利用 電泳 現(xiàn)象對某些化學(xué)或生物物質(zhì)進(jìn)行分離分析的方法和技術(shù)叫電泳法或電泳技術(shù)。第五章 毛細(xì)管電泳 主要內(nèi)容 High performance capillary electrophoresis,HPCE 毛細(xì)管電泳的基本原理 毛細(xì)管電泳儀 毛細(xì)管電泳的分離模式 影響分辨率的因素及操作條件選擇 毛細(xì)管電泳的應(yīng)用 毛細(xì)管電泳的基本原理 在電解質(zhì)溶液中，位于電場中的帶電離子在電場力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)象，稱之為 電泳 。由于不同離子所帶電荷及性質(zhì)的不同，遷移速率不同，可實(shí)現(xiàn)分離。 按 形狀分類 ： U型管電泳、柱狀電泳、板電泳； 按 載體分類 ：濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳； 傳統(tǒng)電泳分析：操作煩瑣，分離效率低，定量困難，無法與其他分析相比。 高效毛細(xì)管電泳分析 high performance capillary electrophoresis 高效毛細(xì)管電泳在技術(shù)上采取了兩項(xiàng)重要改進(jìn)： 一是采用了 ,； 二是采用了高達(dá)數(shù)千伏的電壓 。 ? 電壓升高 ， 電場推動(dòng)力大 ， 又可進(jìn)一步使柱徑變小 ，柱長增加 ， ? 高效毛細(xì)管電泳的柱效遠(yuǎn)高于高效液相色譜 ， 理論塔板數(shù)高達(dá)幾十萬塊 /米 ， 特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬 。 進(jìn)樣量少。 電場力： FE = qE 阻 力： F =
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