dna的生物合成(2)-展示頁
2025-01-15 14:22本頁面
【正文】 處切一口，使結(jié)松開。 二、 DNA的復(fù)制 DNA解除高級結(jié)構(gòu) dnaA蛋白與起始點形成復(fù)合物，促進其他 dna蛋白也與起始點形成復(fù)合物。 二、 DNA的復(fù)制 DNA的復(fù)制過程 （ 1）合成起始 DNA復(fù)制有固定的起始點。 實驗結(jié)果：短時間（ 2S）標記出現(xiàn)在分子質(zhì)量較小的片段，只有在標記時間長（ 30S以上）才出現(xiàn)在分子質(zhì)量較大的片段。 ? 至今發(fā)現(xiàn)的 DNA聚合酶 只能催化從模板的 3′ 端向 5′ 端前進的反應(yīng)。 （三）與解除 DNA高級結(jié)構(gòu)有關(guān)的酶與蛋白因子 （ primase） 多數(shù)以 RNA片段 為引物，也存在 DNA片段 引物、tRNA引物 —— 促進引物合成的酶稱為 引發(fā)酶 （三） RNA引物 DNA聚合酶 ? 不能 催化兩個游離dNTP在 DNA模板上聚合 ? 需要具 3’ OH的引物 RNA聚合酶 ? 能 催化兩個游離 NTP在 DNA模板上聚合 ? 提供 3’ OH ? 引物最后被 DNA聚合酶 Ⅰ 除去、補滿，再由連接酶連接 減少突變，提高 DNA復(fù)制的真實性 二、 DNA的復(fù)制 半保留復(fù)制方式 Old strand New strand The hypothesis of semiconservative replication proposed by Watson and Crick in 1953. 親代 DNA 子 代 子 代 半保留復(fù)制 新鏈 Radioisotope labeling and density gradient centrifugation clearly distinguishes replications of semiconservative from conservative. （ 1958） ? 通過 DNA復(fù)制形成的新 DNA分子 , 與原來的 DNA分子完全相同。 Ⅰ 型酶： 使一定部位的一條鏈切口 封口反應(yīng) Ⅱ 型酶： DNA兩條鏈同時發(fā)生 切口 封口反應(yīng) Ⅱ 型酶還可使 DNA形成超螺旋 解除超螺旋 （三）與解除 DNA高級結(jié)構(gòu)有關(guān)的酶與蛋白因子 ? 依賴 DNA單鏈存在，對單鏈親和力強 ? 大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)多種與解除螺旋結(jié)構(gòu)有關(guān)的蛋白質(zhì) DnaA,DnaB,DnaC協(xié)同作用，解開 DNA。每種亞基都有 2個，整個分子形成一個不對稱的二聚體 DNA聚合酶 Ⅰ ? 多功能酶 5’ 3’ 外切酶 3’ 5’ 外切酶 5’ 3’ 聚合酶 ? 單鏈多肽（ Zn2+） 大小二個片段 ? 切除 RNA引物， 填補空缺 ? 損傷后修復(fù) DNA聚合酶 Ⅲ ? 多功能酶 5’ 3’ 聚合酶 3’ 5’ 外切酶 ? 不對稱二聚體 單體 1前導鏈 /單體 2隨從鏈 ? DNA復(fù)制的主要酶 高續(xù)進性 高聚合酶活性 高產(chǎn)物真實性 真核細胞 DNA聚合酶 哺乳動物中已發(fā)現(xiàn) 5種 DNA pol α、 β、 γ、 δ、 ε ? polα和 δ—— 新鏈的延長 ? Polβ—— DNA的重組修復(fù) ? polγ—— 線粒體的復(fù)制 ，還具 3’ 5’ 外切活性 ? Polε—— 聚合作用 和 3’ 5’ 外切活性 （二） DNA連接酶（ DNA ligase) ? DNA雙螺旋中一條鏈有缺口，并且 3’OH與 5’P相鄰 ? 特異性不高， ? 在 DNA不連續(xù)復(fù)制、重組及損傷修復(fù)中起作用 ? 哺乳動物： ATP輔酶，大腸桿菌： NAD輔酶，都需要Mg2+ ? 連接方式：酶先與 ATP或 NAD形成 酶 — AMP，酶 — AMP與 5’P形成 焦磷酸 而活化 （三）與解除 DNA高級結(jié)構(gòu)
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