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生物進(jìn)化過程中微生物形成完善的代謝調(diào)節(jié)機(jī)制-展示頁(yè)

2024-10-23 14:53本頁(yè)面
  

【正文】 —— 初篩 有些菌體的形態(tài)變異與產(chǎn)量的變異存在著一定的相關(guān)性,在篩選工作中應(yīng)盡可能捕捉、利用這些直接的形態(tài)特征性變化。 合適誘變劑量的選擇 就一般微生物而言,突變率隨劑量的增大而增高,但達(dá)到一定劑量后,再加大劑量反而會(huì)使突變率下降。菌懸液一般用生理鹽水( %NaCl)稀釋。 用玻璃珠振蕩打散細(xì)胞團(tuán),再用脫脂棉花或?yàn)V紙過濾,得到分散的菌體。 ? 一般要求菌體處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,并采取一定的措施促使細(xì)胞處于同步生長(zhǎng)。 ?自然界直接分離到的野生型菌株 ?經(jīng)歷過生產(chǎn)條件考驗(yàn)的菌株 ?已經(jīng)歷多次育種處理的菌株 菌株來(lái)源 其次是出發(fā)菌株最好已具備一些有利的性狀,如生長(zhǎng)速度快、營(yíng)養(yǎng)要求低和產(chǎn)孢子早而多的菌株。 核酸內(nèi)切酶切開二聚體的 5’末端 ,形成 3’OH和 5’P的單鏈缺口 核酸外切酶從 5’P到3’OH方向切除二聚體,并擴(kuò)大缺口 DNA聚合酶以另一條互補(bǔ)鏈為模板,從原有鏈上暴露的 3’OH 端起合成缺失片段 連接酶將新合成鏈的 3’OH與原鏈的 5’P相連接 紫外誘變的特點(diǎn) ? 方便、誘變效果很好的常用誘變劑 ? 在紅光下操作或暗培養(yǎng) ? 參數(shù):紫外燈功率、工作距離、照射時(shí)間 5溴尿嘧啶誘變 —— 堿基類似物 機(jī)理: 與堿基的結(jié)構(gòu)類似,在 DNA復(fù)制時(shí),它們可以被錯(cuò)誤地?fù)饺?DNA,引起誘變效應(yīng) 酮式的 5BU結(jié)構(gòu)與胸腺嘧啶相似 ,與 A配對(duì) 5BU很容易進(jìn)行酮式與烯醇式結(jié)構(gòu)的互變異構(gòu) 烯醇式 5BU不與 A而與 G配對(duì) A: T?G: C 參數(shù):濃度、時(shí)間、緩沖液 誘變育種的基本過程如下: 在誘變處理前,一般應(yīng)預(yù)先做誘變劑用量對(duì)菌體死亡數(shù)量的致死曲線,選擇合適的處理劑量。 可見光光能( 300500nm)激活光復(fù)活酶 此時(shí)的光復(fù)活酶沒有活性 PRE為光復(fù)活酶 暗修復(fù) 細(xì)胞內(nèi)還存在另一種修復(fù)體系,它不需要光激活 可修復(fù)由紫外線、 γ 射線和烷化劑等對(duì) DNA造成的損傷。往往低產(chǎn)甚至不產(chǎn)所需的產(chǎn)物,只有經(jīng)過進(jìn)一步的人工改造才能真正用于工業(yè)生產(chǎn) 菌種選育 突變、體內(nèi)重組 體外重組(基因工程) 誘變育種 化學(xué)誘變 物理誘變 紫外線 5溴尿密啶 紫外線誘變 造成 DNA鏈的斷裂,或使 DNA分子內(nèi)或分子之間發(fā)生交聯(lián)反應(yīng) 機(jī)理 交聯(lián)是由二聚體引起的,二聚體可以在同一條鏈相鄰的堿基之間產(chǎn)生,也可以是在二條鏈的堿基之間形成。生物進(jìn)化過程中微生物形成完
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