植物組織培養(yǎng)實驗新-展示頁
2025-05-22 10:01本頁面
【正文】 常用種類有： ? 1. 生長素類：生理作用（ P61），主要有吲哚乙酸（ IAA）、萘乙酸（ NAA）、吲哚丁酸（ IBA）、 2， 4D等。 用量一般在 410g/l之間。 常用的碳源是蔗糖，濃度為 2—5%。 維生素有維生素 B1（硫胺素）、維生素 B6（吡哆醇）、維生素 B3或維生素PP（煙酸）、維生素 B5（泛酸鈣）等 氨基酸中最常用的是甘氨酸。 鐵促進細胞分裂與伸長，還影響到葉綠體的結(jié)構(gòu)組成與葉綠素形成。 ? （三）鐵鹽 現(xiàn)在培養(yǎng)基中幾乎都采用 Fe ? （二）微量元素 植物所需的微量元素至少包括鐵、硼、錳、鋅、鉬、銅、鈷和氯。 植物必需的元素在體內(nèi)的生理作用有四方面（ P49）。 ? 配置中注意 8個字： 大、微、鐵、有、糖、瓊、激、 PH。 ? （ 3）玻璃器皿及耐熱用具等可采用干熱滅菌 即利用烘箱加熱到 160180℃ 的溫度來殺滅微生物。 ? （ 2）不耐熱的物質(zhì)將采用過濾滅菌 如赤霉素、玉米素、脫落酸、尿素和某些維生素等。 滅菌的功效主要是靠溫度，而不是壓力。 ? （ 1）培養(yǎng)基的滅菌： 常規(guī)方法是放入高壓滅菌鍋內(nèi)加熱加壓滅菌。 無菌的范疇： 經(jīng)過高溫灼燒或蒸煮過后的物體，經(jīng)其他物理的或化學(xué)滅菌方法處理過后的物體，是無菌的。 最常用的洗滌助劑就是家庭用的洗衣粉及肥皂。 植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點 ? 1. 研究材料來源單一，無性系遺傳背景一致 ? 2 . 經(jīng)濟方便效率高 ? 3 . 條件可控誤差小 ? 4. 生長快周期短重復(fù)性強 ? 5 . 周年試驗或生產(chǎn) ? 組織培養(yǎng)的幾道主要工序： 培養(yǎng)器皿的清洗；培養(yǎng)基的配置、分裝、包扎和高壓滅菌；無菌操作 ——材料的表面滅菌和接種；放入培養(yǎng)室培養(yǎng)；試管苗的種植與初期管理。 ? 這項技術(shù)已在快速繁殖、去除病毒、加速育種進程、次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)和種質(zhì)資源的保存等方面取得了巨大的經(jīng)濟效益、社會效益及生態(tài)效益。 植物組織培養(yǎng) 陳 勇 ? 一、培養(yǎng)基的成分及作用 ? 二、培養(yǎng)基的制備 ? 概念：本世紀初開始，以植物生理學(xué)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的一項技術(shù)。即應(yīng)用無菌操作方法，培養(yǎng)植物的一個離體器官、組織或細胞。 ? 根芽形成的激素控制理論： 細胞分裂素與生長素的比例與絕對含量，調(diào)控著植物組織的形態(tài)發(fā)生及細胞分化，當(dāng)比值高時產(chǎn)生芽，低時產(chǎn)生根，比值適中時可能維持原組織生長而不分化。 ? 操作技術(shù) ? 1. 洗滌 培養(yǎng)過程中最經(jīng)常最大量的工作之一，是洗滌培養(yǎng)瓶及其它常用器皿。 ? 2. 滅菌 有菌的范疇： 凡是暴露在空氣中的物體，曾經(jīng)接觸過自然水源的物體，至少它的表面，毫無例外都是有菌的。 常用的滅菌方法可分為物理方法和化學(xué)方法兩大類。一般少量的液體只要 121℃ 即每平方厘米 20分鐘就能達到徹底滅菌。 ? 高壓滅菌鍋的使用可選用以下任一種： A .打開放氣閥，煮沸 15分鐘后再關(guān)閉； B 打開放氣閥煮沸至大量熱蒸汽噴出再關(guān)閉； C 先關(guān)閉放氣閥，待壓力上升到 以上時，打開放氣閥放出空氣，再關(guān)閉。 過濾滅菌的原理：溶液通過濾膜后，細菌的細胞和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻。 ? （ 4）用于無菌操作的器械采用灼燒滅菌 ? （ 5）布制品采用高壓滅菌 ? （ 6）其它 二、培養(yǎng)基的成分及作用 ? 完善的培養(yǎng)基配方： 包括大量元素、微量元素、鐵鹽溶液、碳
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