【正文】 為青島農(nóng)業(yè)大學(xué)。 論文（設(shè)計(jì)）作者簽名： 日期： 2020 年 3 月 10 日 畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）版權(quán)使用授權(quán)書 本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）作者同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文（設(shè)計(jì)）的復(fù)印件和電子版，允許論文（設(shè)計(jì)）被查閱和借閱。 楚 雄 師 范 學(xué) 院 本 科 生 畢 業(yè) 論 文 題 目： 火燒跡地厚皮香對三葉鬼針草、麻櫟 化感作用研究 專 業(yè)： 生物技術(shù) 學(xué) 號： 20202052124 系 （院）： 化學(xué)與生命科學(xué)系 畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）誠信聲明 本人聲明： 所呈交的畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，論文中引用他人的文獻(xiàn)、數(shù)據(jù)、圖表、資料均已作明確標(biāo)注，論文中的結(jié)論和成果為本人獨(dú)立完成，真實(shí)可靠，不包含他人成果及已獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本人授權(quán)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）。 論文（設(shè)計(jì)）作者簽名： 日期： 2020 年 3 月 10 日 指 導(dǎo) 教 師 簽 名： 日期： 年 月 日 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 3 目錄 摘要 ……………………………………………………………………… … ……………………………Ⅰ 關(guān)鍵詞 ………………………………………………………………………… … ………………………Ⅰ Abstract ………………………………………… ………… ……………… … …………………………Ⅱ Key words ………………………………… ……… … … ……… ………………………………………Ⅱ 前 言 …………………………… ………… …………………………………… … ……………… … … … 1 1 材料與方法 ………………………………………………… …… … …………… ………………… … 1 材料 …………………………………………………………………………… …………… ……… 1 方法 ………………………………………………………………………………… …………… … 1 植株水浸液的的制備 ………………………………………………… ……………………… … … 2 種子萌發(fā)及幼苗生長的測定 ……………………………………………………………………… 2 脯氨酸含量的測定………………………………………………………………………………… 2 MDA 含量測定 ……………………………………………………………………………………… 2 POD 活性的測定…………………………………………………………………………………… 3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 …………………………………………………………………………………… 3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 ……………………………………… …………………………………………… 3 2 結(jié)果與分析 ……………………………………………… …… …… … ………… …………… … …… 3 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)率的影響 … …… … … …… … … …… … … …… … 3 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草麻櫟幼苗的株高影響 … …… … … …… … … …… … … …… … … … 4 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟幼苗根長影響…… … … …… … … ………… … … …… … … 4 厚皮香葉水浸液對三葉鬼針草植株脯氨酸含量影響…… … … ……… … … ……… … … ……… … 5 對三葉鬼針草和麻櫟 MDA影響 … … … ……… … … … … ……… … … … … ……… 5 POD影響……… … … … … ………… … … … … ………… … 6 … … … … … ………… … … … … ………… … … … … … ……… 6 3 結(jié)論與討論 ………………………………………………………………………… …………… …… 8 參考文獻(xiàn) ……………………………………………………………………………… …………… …… 9 附錄 ………………………………………………………………………………… … ………… ……… 10 致謝 ………………………………………………………………………………… …………… ……… 32 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） I 火燒跡地厚皮香對 三葉鬼針草、麻櫟 化感作用研究 摘要 ： 為探究 火燒跡地優(yōu)勢物種的 化感作用機(jī)理， 以 火燒跡地 厚皮香（ Ternstroemia gymnanthera (Wight et Arn.)Sprague） 、 麻櫟（ Quercus acutissima Carruth）、三葉鬼針草（ Biden pilosa L.） 為材料。設(shè)置 5 個(gè)濃度梯度的水浸液以及各 3 組平行組。結(jié)果表明： 厚皮香 葉片浸提液能不同程度地降低了 三葉鬼針草 和麻櫟 種子發(fā)芽率 、苗高 和根長；尤其對 三葉鬼針草 的種子萌發(fā)和幼苗生長抑制作用顯 著；高濃度時(shí)抑制效果顯著，較低濃度時(shí)，有微弱促進(jìn)作用；受體植物麻櫟、厚皮香的脯氨酸、 MDA 含量隨濃度的升高表現(xiàn)為正相關(guān)， POD 值在 g/ml時(shí)顯著升高。 表明厚皮香 厚皮對三葉鬼針草和麻櫟存在化感作用，且對三葉鬼針草作用更為顯著。 especially of Bidens pilosa Seeds Germination and seedlings growth significantly inhibited when the concentration is high。 Quercus acutissima, receptor plants Ternstroemia proline, MDA content increased with concentration is positively related to performance, the POD values increased significantly at g/ml. The receptor plant root and stem tip cells increased with the chromosome number of the concentration of the extracts showed a downward trend. That thick skin fragrant thick skin of Bidens pilosa and Quercus acutissima the allelopathic effects of Bidens pilosa L, and the effect is more significant. Key words： Burned area。 Ternstroemia。 Quercus acutissima。 enzyme activity。 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 1 火燒跡地厚皮香、三葉鬼針草、麻櫟三者 化感作用研究 前言 化感作用是森林生態(tài)系統(tǒng)中廣泛存在的一種生態(tài)化學(xué)現(xiàn)象，是影響森林植物種群生長發(fā)育、結(jié)構(gòu)功能乃至整個(gè)生態(tài)系統(tǒng)群落演替的重要因素 [1]。森林水文調(diào)節(jié)能力的變化則直接影響到 山 地水分來源 [3]； 在林業(yè)科學(xué)研究及林業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中，對于森林經(jīng)營過程中出現(xiàn)的連栽障礙、指導(dǎo)森林更新和建植、地力衰退、 “土壤中毒 ”、對農(nóng)作物布局、果園經(jīng)營等生產(chǎn)實(shí)踐有廣闊的開發(fā)和應(yīng)用前景有重要的意義 [4]。 麻櫟喜歡在光線充足，土壤深厚的山坡地上生長，形成 麻櫟樹林或與松樹組成混合樹林。 具有木材材質(zhì)堅(jiān)硬、紋理美觀、耐腐耐水濕等優(yōu)良性狀，是珍貴的優(yōu)良建筑材和家具材用材樹種 [5]。葉倒卵形至長圓形，長 3—7 厘米，寬 2 厚皮香 (5 張 )—3厘米，頂端鈍圓或短尖，基部楔形，全緣，表面綠色，背面淡綠色，中脈在表面下陷，側(cè)脈不 明顯；葉柄長 5—10 毫米。果實(shí)圓球形，呈漿果狀，干燥，徑約 1． 5 厘米，萼片宿存。目前有學(xué)者對其扦插繁殖及光照強(qiáng)度對其幼苗生長、 種子特性與扦插繁殖、厚皮香植物群落特征及繁殖特性、厚皮香造林技術(shù)等繁殖方面進(jìn)行了大量而細(xì)致的研究 [67]。三葉鬼針草種子具有較好的初始萌發(fā)能力，無需經(jīng)過休眠，且不需經(jīng)過任何特殊處理就能快速而整齊的萌發(fā)。 對 厚皮香、三葉鬼針草、麻櫟間的化感作用和機(jī)理研究有重要的意義 ，有助于我們更加合理地理解和解釋 火災(zāi)后的優(yōu)勢物種 現(xiàn)象 ，對森林的恢復(fù)重建工作提供一定的理論依據(jù) [10]。01′″東經(jīng) E101176。 方法 植株水浸液的的制備 將采集來的厚皮香 葉片、根在室溫條件下陰干并打磨成粉，分別取 120 g、 90 g、 60 g、 30 g、 15 g，各加 300 mL的蒸餾水恒溫 25℃ 泡 48 h，用濾紙雙重過濾后得到植株 葉和根 浸提液，濃度分別為 ／ mL、 g／ mL 、 g／ mL、 g／ mL、 g／ mL，靜置備用 種子 萌發(fā)及幼苗生長的測定 挑選均勻飽滿、大小一致的 麻櫟、厚皮香 種子，用 3%的雙氧水消毒 30分鐘，然后用蒸餾水沖洗干凈。每天觀察麻櫟和厚皮香 種子的萌發(fā)（胚根或胚軸破皮 1～ 2mm時(shí)為萌發(fā)）情況，第 7 天完成統(tǒng)計(jì)，計(jì)算發(fā)芽率（ GR）。 分別計(jì)算發(fā)芽率、苗高、苗鮮重、苗干重、根干重、根鮮重的化感效應(yīng)指數(shù)（ RI）和綜合化感效應(yīng)指數(shù)（ SE）。 RI0 為促進(jìn)作用， RI0 為抑制作用，絕對值的大小與強(qiáng)度一致。取標(biāo)準(zhǔn)溶液各 2 mL, 加 2 mL 3 % 磺基水楊酸 , 2mL 冰醋酸和 4 mL % 酸性茚三酮試劑于具塞試管中 , 置沸水浴中顯色 1h ,冷卻后加入 4 mL 甲苯蓋好蓋子于旋渦混合儀上振 min, 靜置分層 , 吸取紅色甲苯相 , 于波長 520nm 測定OD 值 ,以 OD 值為縱坐標(biāo) , 脯氨酸濃度 (μg/ mL) 為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算公式為：脯氨酸含量（ ug/g）） =[X5/2]/樣重（ g）。將勻漿轉(zhuǎn)移到試管中，再用 23 磷酸緩沖液分兩次沖洗，合并提取液；在提取液中加入 5 ml %硫代巴比妥酸溶液，搖勻。以 %硫代巴比妥酸溶液為空白測 532nm、 600nm、 450nm處的吸光度；結(jié)果計(jì)算 :MDA（ ） =〔 *（ A652A600）*A450〕 *Vt/Vs*FW； [式中， Vt:提取液總體積（ ml）， Vs：測定用提取液體積（ ml）， FW：樣品鮮重（ g） ]。以每分鐘 OD 變化值表示酶活性大小 , 即以ΔOD470/min/mg 蛋白 質(zhì) (或鮮重 g) 表示。 細(xì)胞形態(tài)的觀察 制作不同濃度處理的三葉鬼針草和麻櫟植株根和莖尖顯微切片，探索其細(xì)胞形態(tài)的變化。 2 結(jié)果 與分析 厚皮香 葉浸提液對 三葉鬼針草 和麻櫟 種子萌發(fā) 率 的影響 從 表 1 可以看出， 厚皮香 葉浸提液對 三葉鬼針草 種子萌發(fā)的影響表現(xiàn)為抑制，隨著 厚皮香 葉浸提液濃度的升高，種子的萌發(fā)率降低。 異顯著（ P=），其它濃度下，差異達(dá)到極顯著水平（附錄 1），說明 厚皮香 葉浸提液對 三葉鬼針草 種子萌發(fā)具有顯著的抑制作用。把萌發(fā)率的化感指數(shù)進(jìn)行單因素方差分析， P≈ ，說明各濃度間的化感效應(yīng)指數(shù)差異達(dá)到極顯著水平。 表 1 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)及幼苗生長的影響 Table .1 thick skin Geranium effects of extracts on Germination and seedling growth of Bidens pilosa and seeds of Quercus acutissima 水浸液濃度 (g/ml) 受體植物 萌發(fā)率 （ %） 株高 （ cm） 根長 （ cm） ck 三葉鬼針草 麻櫟 三葉鬼針草 * 麻櫟 * 三葉鬼針草 * 麻櫟 * ** * 三葉鬼針草 ** ** 麻櫟 ** ** ** 三葉鬼針草 ** ** * 麻櫟 * * ** 三葉鬼針草 ** ** * 麻櫟 * * 注： * 表示實(shí)驗(yàn)組與對照組的差異顯著性。 ** 表示差異極顯著。下表同。把麻櫟幼苗的株高進(jìn)行單因素方差分析， P≈，說明各濃度間的株高差異極顯著。說明低濃度下的厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗的株高沒有明顯影響，高濃度下的厚皮香