【正文】 troenterol 2021； 11(19):29226. （論著） 4 陳源文 , 李定國 ， 吳建新 , 陳穎偉 , 陸漢 明。轉(zhuǎn)化生長因子 β 與轉(zhuǎn)基因治療肝纖維化。 2021 年申請國家自然科學(xué)基金項目“ IL10 或 uPA 基因修飾骨髓源性肝干細胞移植防治肝纖維化的比較研究”獲資助（編號 30500236）。在中藥（粉防己堿、氧化苦參堿）抗肝纖維化作用、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因轉(zhuǎn)染與基因重組和干細胞研究方面有較豐富的理論基礎(chǔ)與研究經(jīng)歷。 2021 年畢業(yè)于江西醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系，獲學(xué)士學(xué)位，同年考入原上海第二醫(yī)科大學(xué)， 2021 年獲內(nèi)科學(xué)博士學(xué)位。 （論著） 在本課題中負責(zé)課題設(shè)計、組織實施、 質(zhì)量控制、 數(shù)據(jù)收集整理和統(tǒng)計分析等 。大黃與粉防己堿抗實驗性肝纖維化的對照研究。中華消化雜志 2021； 25(7):4345。 （論著） 18 汪余勤 , 李定國 , 吳建新 , 宗春華 , 董國芳 , 瞿春瑩 , 陸 漢明。 外源 Smad7 基因?qū)υ涡菭罴毎钚院突虮磉_調(diào)控的影響。上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2021； 25(2):1036。 （論著） 16 陳穎偉 , 陳源文 , 王連升 , 李定國。 Smad7 和組織器官纖維化。上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2021；21(3):2102。 （論著） 13 Wei FS, Li DG, Lu HM, Zhan YT, Wang ZR, Hang X, Xu QF. The role of enalapril in pathogenesis of CCL4 induced hepatic fibrosis. Journal of Shanghai Second Medical University 2021； 13(1):1923. （論著） 14 程計林 , 周欣 , 李定國 , 黃新 , 魏紅山 , 徐芹芳。 RGDS 肽對 TGFβ 刺激肝星狀細胞分泌細胞外基質(zhì)的影響。中華消化雜志 2021； 22(10):6213。 （論著） 11 陳源文 , 吳建新 , 李定國 , 陸漢明。外源性轉(zhuǎn)化生長因子 β1與小鼠肝細胞 Smad7 mRNA 及蛋白表達的關(guān)系。放射免疫學(xué)雜志 2021； 17(6):4335。 （論著） 9 杜學(xué)亮 , 陳穎偉 , 王連升 , 徐芹芳 , 李定國 , 吳真。 RGDM6P 對原代肝星狀細胞的影響。中華消化雜志 2021；23(7):4356。 （論著） 7 王志榮 , 李定國 , 陳錫美 , 魏紅山 , 黃新 , 展玉濤 , 徐芹芳 , 陸漢明。粉防己堿抑制肝纖維化大鼠肝組織 cfos 和 cjun mRNA 表達。中國藥理學(xué)通報 2021； 21(5):5637。 （論著） 5 陳源文 , 李定國 , 吳建新 , 陳穎偉 , 陸漢明。粉防己堿對大鼠肝星狀細胞跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響。上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2021；25(2):1016。近五年 發(fā)表的與本課題相關(guān)論文 （第一作者或通訊作者），其中一篇與本課題設(shè)計密切相關(guān)的重要論著 2021 年發(fā)表于 SCI 索引源期刊“ Journal of Ethnopharmacology”并被 SCI 收錄（收錄號 IDS Number: 963XN）（見附件二、三） ： 1 李定國 , 陳穎偉。 先后承擔(dān)包括國家自然基金在內(nèi)的各類科研項目 15 項，指導(dǎo)或協(xié)助指導(dǎo)博士后、博士生及碩士生 70 余名 ，獲省部級以上科技進步獎 10 項。 本項目負責(zé)人長期從事 肝纖維化防治研究 ，在抗肝纖維化中藥篩選與機制研究、生物小分子合成、脂質(zhì)體藥物傳遞和基因轉(zhuǎn)染、基因重組及基因治療等方面有豐富研究經(jīng)驗。 現(xiàn)任上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 消化系疾病第三研究室主任 、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院消化內(nèi)科主任。主任醫(yī)師、 研究員、 教授 和 博士生導(dǎo)師 。 我們 可免費使用相關(guān)設(shè)備如層流無菌室、質(zhì)譜儀、高效液相色譜儀、定量 PCR 儀 、 NICOMP Particle Sizer Model 3700 分析系統(tǒng) 、流式細胞儀和 FlousS MultiImage 圖像分析儀等， 新華醫(yī)院和學(xué)院 均有SPF 級的動物飼養(yǎng)條件 。實驗室擁有本項目研究相關(guān)的 大部分 生化、細胞生物學(xué) 及 分子生物學(xué)等方面的各種儀器設(shè)備，如倒置顯微鏡攝影設(shè)備、 γ計數(shù)儀、 CO2培養(yǎng)箱、酶聯(lián)免疫測定儀、電轉(zhuǎn)膜儀、 低溫冰箱、低溫超速離心機及 其它 分子生物學(xué)設(shè)備 等。構(gòu)思本課題的重要原因之一是探討解決簡單單一藥物治療中發(fā)現(xiàn)的諸多問題而開展的，密切相關(guān)的細胞學(xué)、動物學(xué)實驗基礎(chǔ)也是本實驗成功的重要保證。由于以上的工作基礎(chǔ)，我們擁有豐富的生物分子合成經(jīng)驗，成熟的生物分子構(gòu)建技術(shù)和良好的人員與設(shè)備支持。 目前 我們正在利 用基金很少量結(jié)余款項進行合成 RGDM6P 修飾 SSL 的工作。 細胞及動物學(xué)實驗均證實pCIRGDSmad7 和 RGDM6P 可減輕 ECM 沉積，并影響 TGFβ1和整合素表達強度和分布 。（參見申請人簡歷及附件二、三） 生物小分 子化學(xué)合成及脂質(zhì)體構(gòu)建相關(guān)工作基礎(chǔ)。近兩年，我們在上海市教委基金項目“ 粉防己堿影響肝星狀細胞活化信號分子研究（編號 02BK14） ”資助下完成了小劑量粉防己堿抗肝纖維化效果與機制的研究，在國內(nèi)外首次報道小劑量粉防己堿可通過影響 TGFβ Smads信號通路抑制 HSC 活化，相關(guān)研究論文被 SCI 收錄 (收錄號 IDS Number: 963XN)。 粉防己堿抗肝纖維化研究工作積累。 自 1981 年以來，我們 研究室 長期從事肝纖維化防治研究，先后對鈣拮抗劑、鈣調(diào)蛋白拮抗劑、大黃素、激活素、腎素 血管緊張素系統(tǒng)及卵泡抑素等在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用進行了 系列 的研究，積累 了較 豐富 的 理論 ，掌握了相關(guān)研究技術(shù)。 研究證實 XXXXXXX可成為抗肝纖維化藥物新劑 型開發(fā)的有效載體。 體外研究證實 XXXXXXXX。本課題是利用分子機制指導(dǎo)中西藥聯(lián)合應(yīng)用、構(gòu)建中藥靶向制劑提高療效 降低副作用 和多途徑協(xié)同作用抗肝纖維化的全新嘗試，是在總結(jié)自身工作基礎(chǔ)上進行的大膽設(shè)想與創(chuàng)新。將新型配體人工化學(xué)合成、受體調(diào)節(jié)藥物靶向技術(shù)與新型脂質(zhì)體載藥技術(shù)三者結(jié)合應(yīng)用于肝纖維化防治， 有很強的原始創(chuàng)新性 。作為上海交通大學(xué)的附屬單位，將在科研究設(shè)備和技術(shù)上更方便的得到比以往更廣泛的支持。新華醫(yī)院消化內(nèi)科系 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（原 上海第二醫(yī)科大學(xué) ）國家級重點學(xué)科 和“ 211”工程重點建設(shè)學(xué)科的 組成單位之一，長期從事肝纖維化防治研究，先后承擔(dān)包括國家自然科學(xué)基金在內(nèi)的各級各類科研項目 20余項。近四年主持了國家自然科學(xué)基金 項目 “RGD修飾細胞生物信息調(diào)控分子和綴合基因的功能研究 (編號 30170412） ”和 “人卵泡抑素防治肝纖維化的實驗研究 (編號30170411)”的研究工作 ，項目組主要成員參與并完成以上研究工作。 人員配備合理，具有扎實的相關(guān)工作基礎(chǔ)和完善的實驗設(shè)備及技術(shù)支持 。本研究使 用的實驗方法、動物模型和 生物分子化學(xué)合成 等多為國內(nèi)外應(yīng)用多年的經(jīng)典方法 ，并有自身實踐基礎(chǔ) 。掌握 了 國內(nèi) 外 在 受體調(diào)節(jié)藥物靶向 、 低毒性高效中藥新劑型開發(fā) 和 以HSC的靶標(biāo)的肝纖維化靶向治療 中的最新研究動態(tài)， 借鑒“雙靶向”干預(yù)的最新 研究成果，并與自身實踐相結(jié)合 ，在理論上、實踐上均有可靠基礎(chǔ)。 立項依 據(jù)有堅實的理論與實踐基礎(chǔ) 。 (3)治療效果檢測 主要比較以下指標(biāo)： XXXXXXXXXXXXXXX。 第六部分 XXXXXXX 防治大鼠肝纖維化 (1)造模 采用膽總管結(jié)扎和 CCl4肝纖維化兩種動物模型。 (2) XXXXXXX 大鼠體內(nèi) 藥代動力學(xué) 采用 XXXXXXXX。 (3)XXXXXXXX 大鼠 HSC TGFβ 受體 XXXXXXX 信號通路影響 XXXXXXXXXXXXXX。 (1) XXXXXXX 對 HSC 活化狀態(tài)影響 XXXXXXXXX。 第四部分 XXXXXXX 對 HSC 生物學(xué)特性影響與機制 采用酶法分離大鼠 HSC。 (4) 細胞熒光定位、配體表面結(jié)合率與內(nèi)吞率測定 XXXXXXXXXX。 (2) 配體結(jié)合的時間 效應(yīng)關(guān)系 XXXXXXXXXXXX。待貼壁后， 1%胎牛血清 DMEM培養(yǎng)過夜，細胞同步化。以包封率為評價指標(biāo)，采用二項逐步回歸計算回歸方程，并進行方差分析，優(yōu)化條件。 (2) 性質(zhì)鑒定 XXXXXXXXXXXXXXXX。 反應(yīng)圖（略） 第二部分 長循環(huán)脂質(zhì)體制備、鑒定與 技術(shù) 條件優(yōu)化 (1) 脂質(zhì)體制備 采用經(jīng)我們改良的逆相蒸發(fā)法制備 。 合成反應(yīng)圖示如下。 反應(yīng)圖（略） (2) XXXXXXXXXXX 采用一步法合成。合成反應(yīng)圖示如下。 3 擬采取的研究方案及可行性分析 研究方案： 第一部分 XXXXX 及 XXXXX 合成 (1) XXXXXX 合成及鑒定 采用我們研究室建立的方法，化學(xué)合成 XXXX