呼吸道九聯(lián)檢sop-文庫吧資料
2024-10-03 23:07本頁面
【正文】 盒中，37℃溫育90分鐘。L不稀釋的陽性對照，在另一個載玻片的每孔中加入15181。L吸附劑處理過的血清。處理后的血清要離心1015分鐘除去沉淀，以防干擾檢測。L吸附劑中，徹底混勻。2）用吸附劑處理稀釋后的血清：將30181。L PBS中。 實驗步驟1）樣本的稀釋：按1:1比例稀釋血清標(biāo)本，即15181。C備用。3. 操作步驟 實驗前準(zhǔn)備1）實驗所需物品準(zhǔn)備：1000ml量筒、1000ml燒杯、離心管、微量移液器、溫育濕盒、洗瓶、水平搖床、恒溫箱、蓋玻片、熒光顯微鏡。封閉介質(zhì)甘油緩沖液，便于觀察。FITC結(jié)合物熒光素標(biāo)記的抗人免疫球蛋白結(jié)合物，含有染色液、防腐劑和蛋白穩(wěn)定劑。質(zhì)控品用于證明試劑盒及試驗的有效性，含有人血清及防腐劑。在下一步驟中，抗原抗體復(fù)合物與熒光素標(biāo)記的抗人球蛋白反應(yīng)，用免疫熒光顯微鏡觀察結(jié)果。間接免疫熒光法（IFA）（圖1）是基于待測樣本中的抗體與吸附在載玻片上的抗原發(fā)生的反應(yīng)。三、 呼吸道九聯(lián)檢產(chǎn)品介紹九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒，采用間接免疫熒光法（IFA），同時檢測人血清中呼吸道感染主要病原體的IgM抗體，可檢的病原體包括：嗜肺軍團菌血清1型、肺炎支原體、Q熱立克次體、肺炎衣原體、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒2和3型。最大吸收光波長為490～495nm，最大發(fā)射光波長520～530nm，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光，有兩種同分異結(jié)構(gòu)，其中異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性、與蛋白質(zhì)結(jié)合能力等方面都更好，在冷暗干燥處可保存多年，是應(yīng)用最廣泛的熒光素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。免疫熒光測定技術(shù)：抗原抗體反應(yīng)后，利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法。如果檢查未知抗體，則表明抗原標(biāo)本是已知的，待檢血清為第一抗體，其它步驟的抗原檢查相同。其根據(jù)反應(yīng)體系的不同可分為：直接法：將標(biāo)記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體，室溫下干燥后封片、鏡檢。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性，所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。但近年來發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測定，已經(jīng)很好改善了這些缺點，與酶免疫測定和放射免疫分析一樣，應(yīng)用在臨床檢驗中。該技術(shù)的主要特點是：特異性強、敏感性高、速度快。熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同，還可進(jìn)一步分做若干種。這兩種方法總稱免疫熒光技術(shù)，因為熒光色素
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