實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：黃酮提取(ppt31頁(yè))-文庫(kù)吧資料
2025-03-02 15:53本頁(yè)面
【正文】 化合物。 ? (2)氨水反應(yīng)：取待測(cè)液 1． 0 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴氨水振搖，反應(yīng)完后溶液呈黃色，表明有黃酮類化合物。用分光光度計(jì)在確定的最大吸收波長(zhǎng) λmax = 525 nm 處測(cè)吸光度，計(jì)算總黃酮對(duì)亞硝胺合成阻斷率。用移液管吸取 上述溶液加到 7 cm2 培養(yǎng)皿中，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) % Na2CO3 溶液 mL，于紫外分析儀 (254nm 波長(zhǎng) )上輻照 15 min。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 總黃酮對(duì)亞硝胺合成阻斷率的測(cè)定 ?分別吸取總黃酮提取液 、 、 、 、 、 mL，于 6支 25 mL 比色管中。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) % 對(duì)氨基苯磺酸 mL，搖勻靜置 5 min，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) % 鹽酸萘乙二胺 mL，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻靜置 15 min。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 多酚含量的測(cè)定采用 FolinCiocalteu反應(yīng)比色法 ?取 1mL提取稀釋液（樣液稀釋 10倍）于 25mL比色管內(nèi)，加 10 mL蒸餾水，搖勻，再加 mL Folin Ciocalteu試劑，充分搖勻，立即加入 6 mL10 % Na2CO3溶液，混勻，加水定容，再混勻，然后在30℃ 下避光放置反應(yīng) 2 h，以試劑樣為空白，在波長(zhǎng) 760 nm處測(cè)定吸光值，根據(jù)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算提取液中多酚含量 (以沒(méi)食子酸計(jì) )，經(jīng)進(jìn)一步計(jì)算即得多酚提取得率。然后分別精密吸取 0、 、 、 、 mL沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液定容于 50 mL容量瓶?jī)?nèi)，配成濃度為 056 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。冷卻后定容至 1000 mL，過(guò)濾，儲(chǔ)存于棕色瓶中，放入冰箱中保存?zhèn)溆谩? 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? ? 福林酚（ FolinCiocalteu）試劑的配制 ?稱取 100 g鎢酸鈉和 25 g鉬酸鈉置于 2L的磨口圓底燒瓶中，用 700 mL蒸餾水溶解，再緩慢加入 50 mL 85 %的磷酸和 100 mL的濃鹽酸，充分混勻，放入數(shù)粒玻璃珠，連接回流冷凝裝置，文火回流10 h。 ? 樣品黃酮含量測(cè)定 ?精密吸取提取液 mL于 10 mL比色管中，按“各加 80 %乙醇至 5 mL”起依法進(jìn)行操作，同時(shí)精密吸取黃酮提取液 mL于 10 mL比色管中，加 80 %乙醇至 5 mL，再加 1mL水， 4 mL4 %NaOH溶液，作樣品空白測(cè)定吸光度值。分別精密吸取 mL， mL， mL， mL和 mL置于 10mL比色管中，各加 80%乙醇至 5 mL，加 5% NaNO2溶液 mL，搖勻放置 6 min，再加 10 % A1(NO3)3。 ? (10)與堿性試劑 (1％ NaOH)反應(yīng)：在 1 mL提取物中加入0． 5 mL的 1％ NaOH，觀察顏色變化。 ? (8)與 5％的醋酸鉛反應(yīng)：在 5％的醋酸鉛溶液中滴加數(shù)滴提取物，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (7)堿性試劑顯色反應(yīng)在樣品液中加入 5 % NaNO2溶液 。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? (5)氯化鐵反應(yīng)：在試管中加 1 mL提取物，再加入 mL的 2％ FeCl3，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ?(3)硝酸鋁反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴硝酸鋁振搖，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ?二、樣品測(cè)定 ?1. 黃酮測(cè)定 ? 黃酮類物質(zhì)的鑒定方法 ?(1)鹽酸一鎂粉反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，加入少許鎂粉振搖，滴加幾滴濃鹽酸，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ?一、 樣品的處理及提取 ?1. 處理：新鮮木芙蓉花水洗后，于 60℃ 烘干，粉碎機(jī)粉碎，過(guò)篩備用。 ? 1 % 鹽酸萘乙二胺溶液。 ? 1 1% 、 %對(duì)氨基苯磺酸溶液。 ? 的檸檬酸 磷酸氫二鈉緩沖液 : mol/L磷酸氫二鈉與 mol/L檸檬酸混合即可。 ? 1％ KMnO4溶液。 ? 4 % NaOH 溶液； 1 % NaOH 溶液。 ? 2％ FeCl3溶液。 ? 10% A1(NO3)3溶液。 ? 試劑： ?木芙蓉花采自湖北師范學(xué)院校區(qū)；蘆?。ㄉ虾Ｕ乖苹び邢薰荆粚?duì)氨基苯磺酸（分析純）；檸檬酸（分析純）；磷酸氫二鈉（分析純）；鹽酸萘乙二胺（分析純）；二甲胺（分析純）； 1萘胺（分析純）；鎢酸鈉（分析純）；鉬酸鈉
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