08酶工程制藥-文庫(kù)吧資料
2025-02-22 12:21本頁(yè)面
【正文】 nNeulasta (PEG化 )AmgenAmgen白 細(xì) 胞減少interferon ?2a干 擾 素 ?2aRoferonAPegasys (PEG化 )RocheRoche/Nektar 乙肝、丙肝、白血病Kaposi39。從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞從游離酶到固定化酶可以多次使用，且酶的穩(wěn)定性提高固定化的葡萄糖異構(gòu)酶： 6065℃ ， 1000h固定化黃色短桿菌的延胡索酸酶： 反應(yīng) 1年活力不變酶與底物和產(chǎn)物易于分開(kāi)： 產(chǎn)物中無(wú)殘留酶，易于純化，產(chǎn)品質(zhì)量高固定化酶的優(yōu)點(diǎn)從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞反應(yīng)條件易于控制： 可實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化反應(yīng)的連續(xù)化和自動(dòng)控制利用效率高： 單位酶催化的底物量增加，用酶量減少比水溶性酶更適合于多酶反應(yīng)從游離酶到固定化酶固定化酶的優(yōu)點(diǎn)從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞連續(xù)的多酶反應(yīng)主要缺點(diǎn) : 固定化時(shí)，酶活力有損失從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞固定化的方法物理法 結(jié)晶法 化學(xué)法 共價(jià)結(jié)合法分散法 交聯(lián)法物理吸附法 包埋法 網(wǎng)格型離子結(jié)合法 微囊型從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞化學(xué)法： 共價(jià)結(jié)合法n 酶與載體以共價(jià)鍵結(jié)合 ——使用和報(bào)道最多的方法！n 載體 無(wú)機(jī)物（玻璃、陶瓷） 天然有機(jī)物（多糖、蛋白質(zhì)） 合成聚合物（聚酯、聚胺、尼龍）從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞化學(xué)法： 共價(jià)結(jié)合法n 載體 反應(yīng)基團(tuán) 活性基團(tuán)（ SH） 相關(guān)基團(tuán)活化（ OH、 COOH、 NH2等） 雙功能試劑（戊二醛）n 酶 反應(yīng)基團(tuán) ?/ε 氨基， ?/ ?/?羧基 羥基、巰基、咪唑基、酚基等n 優(yōu)點(diǎn)： 結(jié)合牢固，酶不易脫落n 缺點(diǎn)： 反應(yīng)劇烈，酶活回收低（ 30%）從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞化學(xué)法：共價(jià)結(jié)合法化學(xué)法： 交聯(lián)法n 雙功能 /多功能試劑 ，酶 酶以共價(jià)鍵結(jié)合（不需要載體?。﹏ 酶 反應(yīng)基團(tuán) 氨基（ N末端）、 ε 氨基、 巰基、酚基、咪唑基n 交聯(lián)劑： 戊二醛從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞化學(xué)法：交聯(lián)法包埋法： 網(wǎng)格型n 凝膠 ，細(xì)微網(wǎng)格n 包埋材料：合成高分子（聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、光敏樹(shù)脂）天然高分子（淀粉、明膠、膠原、海藻膠等）從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞包埋法： 微囊型n 半透膜 ，顆粒n 顆粒直徑通常為幾微米到幾百微米， 比網(wǎng)格型要小得多，有利于底物與產(chǎn)物的擴(kuò)散從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞包埋法網(wǎng)格型、微囊型n 優(yōu)點(diǎn)：酶活回收高 —— 不需要酶蛋白的氨基酸殘基參與反應(yīng)適合于小分子底物和產(chǎn)物n 缺點(diǎn)： 酶也易失活 —— 包埋時(shí)發(fā)生化學(xué)聚合反應(yīng) 但可設(shè)計(jì)反應(yīng)條件改善從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞固定化酶的方法比較從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞固定化酶的性質(zhì)n 固定化也是一種化學(xué)修飾 ，酶本身的結(jié)構(gòu)必然受到擾動(dòng)n 酶固定化后，擴(kuò)散限制效應(yīng)、空間障礙、載體性質(zhì)造成的分配效應(yīng)等因素必然對(duì)酶的性質(zhì)產(chǎn)生影響從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞固定化酶的性質(zhì)酶活力變化： 多數(shù)情況下，酶活降低 Km增大 —— 與底物的親和力下降酶穩(wěn)定性變化 熱穩(wěn)定性提高 —— 最適溫度 酸堿穩(wěn)定性提高 —— 最適 pH 對(duì)有機(jī)溶劑、酶抑制劑穩(wěn)定性提高 貯藏穩(wěn)定性提高從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞從游離酶到固定化酶固定化的方法固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞固定化酶的性質(zhì)固定化細(xì)胞n 固定化細(xì)胞： 受物理、化學(xué)等因素，被限制自由移動(dòng)的細(xì)胞，保留催化活性，并可反復(fù)或連續(xù)使用。s病dornase alfa， DNA酶 Pulmozyme (CHO) Genentech 囊性 纖維 化Tenecteplase， t
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