xxxx菊花的組織培養(yǎng)(公開課件)-文庫吧資料
2025-01-29 20:54本頁面
【正文】 養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染 。 接種注意事項 ①每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為 70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種 ②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般 胡蘿卜 3－ 4塊，菊的莖或葉 6－ 8塊 ，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和光照條件 ③插入時應(yīng)注意方向， 形態(tài)學(xué)上端朝上，形態(tài)學(xué)下端朝下， 不要倒插。 接種室消毒 無菌操作要求 操作要在 酒精燈火焰旁 完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。 制備 MS固體培養(yǎng)基 外植體消毒 接種 培 養(yǎng) 栽 培 四、實驗操作 移 栽 沖洗 — 酒精 — 無菌水沖洗 —氯化汞 — 無菌水沖洗至少三次之上 配制各種母液 配制培養(yǎng)基 滅菌 （一）制備 MS固體培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基包括 20多種營養(yǎng)成分，實驗室一般使用 4℃保存配制好的 培養(yǎng)基 母液 來制備 配制各種母液 ①無機物中大量元素濃縮 10倍，微量元素濃縮 100倍，常溫保存 ②激素類、維生素類以及用量較小的有機物一般可按 1mg/ml的質(zhì)量濃度 單獨 配制成母液 ③用母液配制培養(yǎng)基時，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量 配制培養(yǎng)基 分裝到錐形瓶中，每瓶分裝 50ml或 100ml ① 配制培養(yǎng)液 ② 調(diào) PH ③ 培養(yǎng)基的分裝 由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激素 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 選材： 菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝 （二）外植體消毒 消毒 ①流水沖洗 菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在 流水 下沖洗 20min左右 ② 酒精處理 用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入 體積分?jǐn)?shù)為 70％的酒精 中搖動 2－ 3次，持續(xù) 6－ 7s，立即將外植體取出，在 無菌水 中清洗 ③消毒液處理 取出后用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 ％的氯化汞溶液 中 1－ 2min，取出后在 無菌水 中至少清洗 3次，漂凈消毒液 （三）接種 污染的主要來源是空氣中的 細(xì)菌和孢子 ，接種室消毒是至關(guān)重要的。 pH： 不同植物對培養(yǎng)基最適 pH的要求不 同，大多數(shù)控制在 5～ 。 溫度： 大多數(shù)植物組織培養(yǎng)控制在 23～ 27℃ ， 低于 15℃ 時植物組織會表現(xiàn)生長停止； 高于 35℃ 時對植物生長不利。與微生物的培養(yǎng)不同， MS培養(yǎng)基則需提供大量 無機營養(yǎng) ，無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。 無機鹽 蕭縣郝集中學(xué) MS固體培養(yǎng)基成分及比例 討論：你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題 2中微生物培養(yǎng)基的配方相比， MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同 ？ 答： 微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的 無機鹽 ；蔗糖提供 碳源 ，同時能夠維持細(xì)胞的 滲透壓 ；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所
外語相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1