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3、1菊花的組織培養(yǎng)(給力的課件)-文庫吧資料

2025-01-24 23:27本頁面
  

【正文】 植體帶菌 培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底 接種操作時帶入 環(huán)境不清潔 污染途徑 思考:你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對照實驗嗎? 答:每種材料或配方至少要做 一組以上 的重復(fù)。 材料的切取和接種 將消過毒的菊花莖段在 無菌培養(yǎng)皿 中切成~ 1cm的小段,用 鑷子 夾取菊花莖段接種。用 70%的酒精 噴霧使空氣消毒, 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺并用紫外線照射 20分鐘 。 菊花的組織培養(yǎng)控制在 。 菊花的組織培養(yǎng)控制在 18~ 22℃ 。 使用順序 實驗結(jié)果 先使用生長素,后使用細胞分裂素 有利于細胞分裂,但不利分化 先使用細胞分裂素后使用生長素 細胞既分裂、也分化 同時使用 分化頻率高 使用比例 實驗結(jié)果 生長素 細胞分裂素 生長素 細胞分裂素 生長素 細胞分裂素 = 有利于根的分化 有利于芽的分化,抑制根的分化 促進愈傷組織生長 ?激素的使用順序、使用量及比例影響植物細胞的發(fā)育方向: 思考:以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問題? 生長素 / 細胞分裂素 高 利于根的形成 適中 利于愈傷組織的形成 供參考的配方 ?誘導(dǎo)菊花愈傷組織: ?在 MS培養(yǎng)基中加入 BA和 NAA,質(zhì)量濃度均為 /L ?2、誘導(dǎo)菊花從芽 : ?在 MS培養(yǎng)基中加入 BA和 NAA,質(zhì)量濃度分別為 23mg/L和 — /L ?誘導(dǎo)菊花生根: ?在 MS培養(yǎng)基各成分用量減半,并添加入 NAA或 IAA,質(zhì)量濃度均為 /L 4.溫度、光照、 pH的影響 光照: 菊花每日用日光燈照射 12h。 作用:促進細胞的分裂與分化,其中 KT能 明顯促進芽的分化而抑制根的形成。 細胞分裂素類: 激動素( KT)、 6-芐基嘌呤( 6-BA)、玉米素( ZT)等。與微生物的培養(yǎng)不同, MS培養(yǎng)基則需提供大量 無機營養(yǎng) ,無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。 蕭縣郝集中學(xué) MS固體培養(yǎng)基成分及比例 討論:你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?同專題 2中微生物培養(yǎng)基的配方相比, MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同 ? 答: 微量元素和大量元素提供植物細胞生活所必需的 無機鹽 ;蔗糖提供 碳源 ,同時能夠維持細胞的 滲透壓 ;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求 。 營養(yǎng) MS培養(yǎng)基 A、大量元素 : N、 P、 K、 Ca、 Mg、 S B、微量元素 :B、 Mn、 Cu、 Zn、 Fe、 Mo、 I、 Co C、有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素 、 蔗糖 D、植物激素:生長素、細胞分裂素、赤霉素等 N、P主要影響蛋白質(zhì)、核酸的合成; K、 Ca、 Mg、 S主要影響酶的活性。 ?表達條件 :離體條件 無菌操作 適宜物質(zhì)的誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)(植物激素) 適宜的營養(yǎng)物質(zhì) 溫度、酸堿度、光照等條件的控制 思考 這個試驗說明了已經(jīng)分化的細胞核具有什么特性? 高度分化的動物體細胞的細胞核有發(fā)育成完整個體的潛能 對比: 多利羊的誕生 動物細胞有沒有這種能力? 已經(jīng)分化的細胞,仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。 切取 形成層 無菌接種 誘導(dǎo)愈傷組織
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