xxxx菊花的組織培養(yǎng)(公開課件)(編輯修改稿)
2025-02-12 20:54 本頁面
【文章內容簡介】 菊花的組織培養(yǎng)控制在 。 制備 MS固體培養(yǎng)基 外植體消毒 接種 培 養(yǎng) 栽 培 四、實驗操作 移 栽 沖洗 — 酒精 — 無菌水沖洗 —氯化汞 — 無菌水沖洗至少三次之上 配制各種母液 配制培養(yǎng)基 滅菌 （一）制備 MS固體培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基包括 20多種營養(yǎng)成分，實驗室一般使用 4℃保存配制好的 培養(yǎng)基 母液 來制備 配制各種母液 ①無機物中大量元素濃縮 10倍，微量元素濃縮 100倍，常溫保存 ②激素類、維生素類以及用量較小的有機物一般可按 1mg/ml的質量濃度 單獨 配制成母液 ③用母液配制培養(yǎng)基時，需要根據各種母液的濃縮倍數，計算用量 配制培養(yǎng)基 分裝到錐形瓶中，每瓶分裝 50ml或 100ml ① 配制培養(yǎng)液 ② 調 PH ③ 培養(yǎng)基的分裝 由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激素 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌 選材： 菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝 （二）外植體消毒 消毒 ①流水沖洗 菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在 流水 下沖洗 20min左右 ② 酒精處理 用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入 體積分數為 70％的酒精 中搖動 2－ 3次，持續(xù) 6－ 7s，立即將外植體取出，在 無菌水 中清洗 ③消毒液處理 取出后用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入 質量分數為 ％的氯化汞溶液 中 1－ 2min，取出后在 無菌水 中至少清洗 3次，漂凈消毒液 （三）接種 污染的主要來源是空氣中的 細菌和孢子 ，接種室消毒是至關重要的。用 70％的酒精 噴霧使空氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺并用紫外線照射 20分鐘 。 接種室消毒 無菌操作要求 操作要在 酒精燈火焰旁 完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。 材料的切取和接種 將消過毒的菊花莖段在 無菌培養(yǎng)皿 中切成～ 1cm的小段，用 鑷子 夾取菊花莖段接種。 接種注意事項 ①每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分數為 70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種 ②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數量根據錐形瓶的大小確定，一般 胡蘿卜 3－ 4塊，菊的莖或葉 6－ 8塊 ，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和光照條件 ③插入時應注意方向， 形態(tài)學上端朝上，形態(tài)學下端朝下， 不要倒插。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分 正常苗 污染苗 外植體帶菌 培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底 接種操作時帶入 環(huán)境不清潔 污染途徑 思考：你打算做幾組重復？你打算設置對照實驗嗎？ 答：每種材料或配方至少要做 一組以上 的重復。設置對照實驗可以取用一個 經過滅菌 的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以 說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染 。 （四）培養(yǎng) ?接種后的錐形瓶最好放在 無菌箱 中培養(yǎng)，培養(yǎng)期間應定期消毒 ?培養(yǎng)溫度控制在 1822℃
外語相關推薦
鄂ICP備17016276號-1