基因工程的基本概念和原理-文庫吧資料
2024-09-24 20:50本頁面
【正文】 術(shù)，是現(xiàn)代生物學(xué)中一切工程技術(shù)的總稱，包括：基因工程、酶工程、細胞工程、微生物工程、發(fā)酵工程等。 （二）重組 DNA技術(shù) (DNA rebination technique) 是用酶學(xué)的方法將不同來源的 DNA在體外切割，連接組成一個雜合的 DNA分子的技術(shù)。 （ 2） 作為動詞 ，即利用體外 DNA重組技術(shù)將一個特定的基因或 DNA順序插入一個載體分子。 基因工程相關(guān)的概念： （一）克隆（ clone,cloning） （ 1） 作為名詞 ①基因型（ geype）相同的細胞或生物體的一個群體，通過無性繁殖獲得。 （ 2）即使有了基因圖譜，因為真核基因有內(nèi)含子，不能在原核表達系統(tǒng)剪接出 mRNA，沒有成熟的 mRNA就不能得到相應(yīng)的產(chǎn)物。 3）逆轉(zhuǎn)錄酶－ 1970年 Baltimove和 Temin等同時各自發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶，打破了遺傳學(xué)（生物學(xué)）中心法則，使真核基因的制備成為可能。 （ 3）然而，直到 1973年 Cohen才能將質(zhì)粒作為基因工程載體使用（至今一直是基因工程最重要最廣泛使用的載體）。51(2):37991 2）載體 (“交通工具車子 ” )－基因工程技術(shù)誕生的第二個技術(shù)準備 （ 1） 有了切割與縫合（ ligase）基因 DNA的工具，還得有一個車子將重組 DNA送到宿主細胞中去。 （ 3） 1970年， Smith和 Wilcox在流感嗜血桿菌（ Haemophilus inffuenzae）分離純化了 HindⅡ ，取得了突破，為基因工程奠定了最為重要的技術(shù)基礎(chǔ)。 基因工程 3大理論 , 3大技術(shù)準備： （二） 技術(shù)上的 3大發(fā)明： 1） “ 基因剪刀 ” －限制性內(nèi)切酶的發(fā)明 （ 1） 20世紀 40－ 60年代，科學(xué)家們就為基因工程設(shè)計了美好的藍圖， 但是面對龐大的 dsDNA束手無策，無從下手把它切成單個基因片斷。 2） 20世紀 50年代， Watsoncrick提出了 DNA結(jié)構(gòu)的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，搞清楚了生物遺傳物質(zhì)的分子機制。 1973年， PNAS上發(fā)表了題為“ Construction of Biologically Functional Bacterial Plasmid In Vitro” （ S. N. Cohen, A. C. Y. Chang, H. W. Borer, and R. B. Helling, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 70:32403244, 1973） 的論文，宣布體外構(gòu)建的細菌質(zhì)粒能夠在細胞中進行表達 ,從而完善了 Berg開創(chuàng)的基因重組技術(shù)。 于是他們進行第二步的實驗就是從 λdvgal
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