高二生物多聚酶鏈式反應擴增dna片段-文庫吧資料
2024-11-20 17:20本頁面
【正文】 高二檢測 )多聚酶鏈式反應(PCR技術 )是在實驗室中以少量樣品 DNA制備大量 DNA的生化技術 ， 反應系統(tǒng)中包括微量樣品DNA、 DNA聚合酶 、 引物 、 足量的 4種脫氧核苷酸等 。 (2)微量離心管：一種薄壁塑料管 ， 總容積為 mL。 PCR反應的實驗操作過程 1． 反應體系的配方 10倍濃縮的擴增緩沖液 5 μL 20 mmol/L的 4種脫氧核苷酸的等量混合液 1 μL 20 μmol/L的引物 Ⅰ μL 20 μmol/L的引物 Ⅱ μL H2O 28～ 33 μL 1～ 5 U/μL 的 TaqDNA聚合酶 1～ 2U 模板 DNA 5～ 10 μL 注： ① 總體積 50 μL， ② 模板 DNA的用量在 1 pg～ 1 mg之間 (1)PCR儀： PCR自動化程度較高，參照下表設計程序即可。 因為不同大小的DNA帶有不同數(shù)量的電荷 ， 所以在電場中遷移速率不同 ， B項正確 。 跟蹤訓練 (2020年海淀區(qū)高二檢測 )關于 DNA片段 PCR擴增實驗的描述中不正確的是 ( ) A． 加入的 Taq DNA聚合酶耐高溫 B． 不同大小 DNA在電場中遷移速率不同 C． 此過程需要 DNA連接酶 D．擴增區(qū)域由兩種引物來決定 解析： 選 C。 用于 PCR的引物長度通常為20～ 30個核苷酸 。 【 探規(guī)尋律 】 (1)引物是一小段 DNA或 RNA， 它能與 DNA母鏈的一段堿基序列互補配對 。 3． 生物體內(nèi) DNA復制與 PCR反應的區(qū)別 體內(nèi)復制 PCR反應 解旋 在解旋酶作用下，細胞提供能 量，部分解開 加熱至 90 ℃ 以上時，雙鏈全部解開，不需解旋酶 引物 一小段 RNA 可以是 RNA或單鏈 DNA分子片段 合成子鏈 在引物基礎上，一條鏈連續(xù)合 成，另一條鏈不連續(xù)合成 分別從兩條鏈的引物端開始，都是連續(xù)合成，控制溫度 72 ℃ 特點 邊解旋邊復制，半保留復制 體外迅速擴增 Taq DNA聚合酶 不需要 需要 循環(huán)次數(shù) 受生物體自身控制 30多次 相同點 生物體內(nèi)的 DNA復制和 PCR體外 DNA擴增都需要模板、四種脫氧核苷酸，且都需要在一定的緩沖溶液中進行 (2020年聊城高二檢測 )下列關于 DNA復制和 PCR的描述中 ， 正確的是 ( ) A． DNA聚合酶不能從頭開始合成 DNA， 只能從5′ 端延伸 DNA鏈 B． DNA復制不需要引物 C． 引物與 DNA母鏈通過堿基互補配對進行結合 D． PCR擴增的對象是氨基酸序列 【嘗試解答】 __C__ 例 1 【 解析 】 由于 DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA， 只能從 3′ 端延伸 DNA鏈 ， 故 DNA復制需要引物 ， 而且它與 DNA母鏈通過堿基互
醫(yī)療健康相關推薦
鄂ICP備17016276號-1